鼠神经生长因子对急性脑出血患者肿瘤坏死因子-α、血清基质金属蛋白酶-9和超氧化物歧化酶水平的影响

项 婕，潘小娟

鼠神经生长因子对急性脑出血患者肿瘤坏死因子-α、血清基质金属蛋白酶-9和超氧化物歧化酶水平的影响

项 婕a，潘小娟b

目的 探讨鼠神经生长因子(NGF)对急性脑出血患者肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和超氧化物歧化酶(SOD)水平的影响。方法 选择急性脑出血患者64例，随机分为研究组和对照组。两组患者均予以控制血压、血糖和颅内压，营养脑细胞、止血、给氧及维持酸碱平衡等治疗。研究组在此基础上加用NGF 20 μg肌肉注射，1次/d，连用2周。观察并比较两组患者治疗前后TNF-α、MMP-9和SOD水平的变化，并观察两组的临床疗效和不良反应。结果 治疗2周后，两组患者血清TNF-α、MMP-9水平均较治疗前明显下降，血清SOD活性较治疗前明显上升，且研究组下降或上升幅度明显大于对照组(P<0.05)；同时两组患者神经功能缺损评分均有明显下降(P<0.05或P<0.01)，且研究组下降幅度较对照组更明显(P<0.05)，研究组临床总有效率明显高于对照组(χ2=6.56,P<0.05)。两组患者治疗期间均未出现明显药物不良反应。结论 NGF治疗急性脑出血安全有效，作用机制与降低血浆炎症因子水平、减轻血脑屏障破环和改善氧自由基代谢密切相关。

急性脑出血；鼠神经生长因子；肿瘤坏死因子-α；血清基质金属蛋白酶-9；超氧化物歧化酶

0 引言

急性脑出血是一种严重危害人类健康和生命安全的神经内科常见病，致残率和致死率高。研究表明脑，出血后血肿周围局部脑循环改变、血脑屏障破环、炎症高反应性和神经细胞凋亡均参与了脑出血的病理生理过程[1-2]。鼠神经生长因子(NGF)具有营养、保护、修复神经元等多重生物学功能，近年来用于治疗神经系统疾病取得了较好的疗效[3]，但其对脑出血患者血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9) 和超氧化物歧化酶(SOD) 水平的影响和疗效报道不多。本研究观察了NGF对急性脑出血患者血清TNF-α、MMP-9和SOD水平的影响，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择我院2010年3月至2013年4月住院治疗的急性脑出血患者64例，均符合第四届全国脑血管病会议修订的脑出血诊断标准[4]，并经头颅CT或MR检查证实。排除标准：①小脑、脑干等幕下出血；②血肿破入脑室或蛛网膜下腔出血；③混合性脑卒中；④脑动脉瘤、脑血管畸形等继发性出血；⑤病情危重形成脑疝或深度昏迷；⑥出血量>30 mL需手术治疗者；⑦出血前1个月内均服用抗氧化剂及药物者；⑧伴发或炎症感染性疾病。采用随机数字表法将患者分为研究组和对照组。两组患者性别、年龄、发病时间、神经功能缺损评分和脑出血量等比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。见表1。

表1 研究组与对照组治疗前一般资料比较

1.2 治疗方法 两组患者均予以控制血压、血糖和颅内压，营养脑细胞、止血、给氧及维持酸碱平衡等治疗。研究组在常规治疗的基础上加用NGF 20 μg(商品名：金路捷，武汉海特生物制药股份有限公司，规格：20 μg/支，批号：090927)肌肉注射，1次/d，疗程2周。

1.3 观察指标

1.3.1 血清TNF-α、MMP-9和SOD水平的测定 取静脉血3～5 mL，置抗凝试管内混匀，2 500 r/min，4 ℃离心后取血清，置于-70 ℃冰箱待测。采用双抗体夹心ELISA法测定血清TNF-α、MMP-9水平，采用黄嘌呤氧化法检测血清SOD活性，试剂盒分别由上海川翔生物有限公司和深圳晶美生物有限公司提供。

1.3.2 临床疗效的评估[4]按照第4届全国脑血管病会议制定的神经功能缺损积分治疗前后的下降率进行评分比较，并结合病残程度分级标准进行疗效评估。基本痊愈：神经功能缺损评分减少91%～100%，病残程度0级；显著进步：神经功能缺损评分减少46%～90%，病残程度1～3级；好转：神经功能缺损评分减少18%～45%，病残程度4～6级；无效：神经功能缺损评分减少<17%，病残程度7级。总有效率=基本痊愈率+显著进步率+好转率之和。

2 结果

2.1 两组患者治疗前后血清TNF-α、MMP-9和SOD水平的变化 两组患者治疗前血清TNF-α、MMP-9和SOD水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗2周后，两组患者血清TNF-α、MMP-9水平均较前明显下降，血清SOD活性较前明显上升，且研究组下降或上升幅度明显大于对照组(P<0.05)。见表2。

表2 两组患者治疗前后血清TNF-α、MMP-9和SOD水平的变化

注：与同组治疗前比较，*P<0.01；与对照组治疗后比较，▲P<0.05

2.2 两组治疗前后神经功能缺损评分比较 两组患者治疗前神经功能缺损评分比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗2周后，两组患者神经功能缺损评分均有明显下降(P<0.05或P<0.01)，且研究组下降幅度较对照组更明显(P<0.05)。见表3。

表3 两组患者治疗前后神经功能缺损评分的变化

注：与同组治疗前相比，*P<0.05，**P<0.01；与对照组治疗后比较，▲P<0.05

2.3 两组患者治疗后临床总有效率的比较 治疗2周后，研究组临床总有效率明显高于对照组(χ2=6.56，P<0.05)。见表4。

表4 两组患者治疗后临床总有效率的比较(例，%)

注：与对照组比较，*P<0.05

2.4 两组不良反应比较 治疗期间研究组出现药物不良反应3例，其中恶心2例，注射部位疼痛1例；对照组出现药物不良反应5例，其中恶心3例，腹部不适1例和头昏1例，症状均较轻，未予处理症状自行消失。两组患者药物不良反应发生率比较差异无统计学意义(χ2=0.14，P>0.05)。

3 讨论

近年来研究认为，炎症反应在急性脑出血的继发性损害中发挥重要作用[3]。TNF-α是由单核、巨噬细胞分泌的促炎症细胞因子，在触发炎性反应中处于关键作用。TNF-α可直接促进炎症细胞向病灶区迁延、聚集，诱导对其敏感的细胞发生细胞毒性作用，导致细胞毒性脑水肿的发生[5]；还可活化聚集于出血部位的多形核白细胞，通过吞噬作用和呼吸爆发产生大量氧自由基，促进脂质过氧化，引起脑血管内皮细胞坏死和基底膜受损，致使脑血管通透性增加引发血管源性脑水肿，加重脑组织损伤[6]。SOD是一种氧自由基清除剂，能减少自由基的产生并中断其连锁反应，减轻自由基对细胞膜的破坏。MMPs基质金属蛋白酶是一组同源的以酶原形式分泌的锌依赖性蛋白酶，主要参与细胞外基质的降解，而MMP-9是MMP家族的重要成员[7]。脑出血可激活MMPs系统，导致MMP-9表达上调，过度表达的MMP-9可分解细胞外基质，引发血管源性脑水肿和早期血肿扩大[8]。

NGF是从小鼠颌下腺中提取纯化的生物活性蛋白，具有增强神经递质活性、促进合成代谢，维持神经细胞存活、生长、分化和成熟等生物学效应，还能通过抑制脂质过氧化、降低钙超载和抑制神经元凋亡等作用，缓解继发性脑损伤[9]。孟令秋等[10]研究发现，NGF治疗急性脑出血具有较好的疗效及安全性，可缓解脑出血患者的神经功能缺损，改善患者的日常生活能力。宋伟健等[11]研究发现，神经生长因子可保护急性脑出血患者的大脑神经元，减少脑出血后的继发性损伤，促进神经功能恢复。本研究结果发现，治疗2周后，研究组患者血清TNF-α、MMP-9水平均较治疗前明显下降，血清SOD活性则较治疗前显著上升，且研究组的下降值或上升值显著大于对照组，研究组患者神经功能缺损评分下降幅度较对照组更明显，临床总有效率明显高于对照组，治疗期间无严重药物不良反应发生，表明NGF治疗急性脑出血的疗效确切，安全性较好，作用可能与其减轻炎症反应，下调MMP-9表达，保护血脑屏障、减轻脑水肿，改善超氧化物歧化酶活性，保护脑细胞免受自由基的攻击而减轻脑组织损伤，发挥神经保护作用有关。

[1] Lekic T,Hartman R,Rojas H,et al.Protective effect of melatonin upon neuropathology,striatal function,and memory ability after intracerebral hemorrhage in rats[J].Journal of Neurotrauma,2010,27(3):627-637.

[2] 马莉琴，谢姚屹，温德树，等.系统性炎症反应综合征对急性脑出血患者病情及预后的影响[J].中国医师进修杂志,2011,34(34):68-70.

[3] 孙立保.鼠神经生长因子临床应用研究[J].医学理论与实践,2011,24(13):1538-1539.

[4] 中华神经科学会.各类脑血管疾病的诊断要点和脑卒中患者神经功能评分标准[J].中华神经科杂志,1996,29(6):379-380.

[5] 林昌福，于朝春，齐一龙.依达拉奉对脑出血大鼠脑组织含水量、肿瘤坏死因子-α含量、血清基质金属蛋白酶-9水平和超氧化物歧化酶活性的影响[J].临床神经病学杂志,2012,25(5):362-364.

[6] 石义亭，张新东，李培永，等.实验性脑出血灶周组织及血清肿瘤坏死因子-α含量、灶周白细胞浸润与神经元凋亡的关系[J].临床神经病学杂志,2005,18(6):446-448.

[7] Grossetete M,Rosenberg GA.Matrix metalloprotein ase in hibition facilitates cell death in intracerebral hemorrhage in mouse[J].J Cereb Blood Flow Metab,2008,28(4):752-763.

[8] Zhao C,Ling Z,Newman MB,et al.TNF-α knockout and minocycline treatment attenuates blood-brain barrier leakage in MPTP-treated mice[J].Neurobiology of disease,2007,26(1):36-46.

[9] 吴剑涓.神经生长因子的药理作用及临床应用进展[J].中国药房,2009,20(35):2779-2782.

[10]孟令秋，赵玉军，陈谦，等.神经生长因子治疗脑出血的临床疗效观察[J].中华老年心脑血管病杂志,2013,15(1):46-48.

[11]宋伟健，胡深，李玉丽，等.神经生长因子对脑出血患者血清NSE水平的影响及临床意义[J].中国医药指南,2012,10(5):7-9.

Influence of mouse nerve growth factor (NGF) on tumor necrosis factor-α (TNF-α),serum matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) and superoxide dismutase (SOD) levels of acute intracerebral hemorrhage patients

XIANG Jiea,PAN Xiao-juanb

(a.Pharmaceutical Preparation Department,b.Neurology Department,The People′s Hospital of Songyang County,Zhejiang 323400,China)

Objective To discuss the influence of mouse nerve growth factor (NGF) on tumor necrosis factor-α (TNF-α),serum matrix metalloproteinase-9 (MMP-9) and superoxide dismutase (SOD) levels of acute intracerebral hemorrhage patients.Methods 64 cases of acute intracerebral hemorrhage patients were selected and divided into study group and control group at random.The patients in the two groups were given medical treatment such as the control of blood pressure,blood sugar and intracranial pressure,brain cells nutrition,hemostasis,oxygen therapy,maintaining acid-base balance and etc.The patients in study group were given NGF (20 μg) by intramuscular injection once daily for 2 weeks additionally.The changes of TNF-α,MMP-9 and SOD levels of patients in the two groups were observed and compared before and after medical treatment,and the clinical curative effect and adverse drug reactions were observed.Results After 2 weeks′ medical treatment,the TNF-α and MMP-9 levels of the two groups declined than those before treatment,while the serum SOD activity rose obviously,and the declining or rising rate in study group was much higher than that in control group (P<0.05).Meanwhile,the neurological deficit scores in the two groups were significantly decreased,obviously than those before treatment,and the declining rate in study group was much higher than that in control group.The clinical total efficiency in study group was much higher than that in control group (χ2=6.56,P<0.05).No obvious drug adverse reactions (ADR) appeared in the two groups during the medical treatment.Conclusion NGF has reliable curative effect on acute intracerebral hemorrhage with high security,whose mechanism is close to reduce the inflammatory factor level in plasma and the damage of blood brain barrier (BBB),and improve the metabolism of oxygen free radicals.

Acute intracerebral hemorrhage;Mouse nerve growth Factor (NGF);Tumor necrosis factor-α (TNF-α);Serum matrix metalloproteinase-9 (MMP-9);Superoxide dismutase (SOD)

2013-07-03

浙江省松阳县人民医院a.药剂科，b.神经内科，浙江 松阳 323400