异常黏液质成熟剂(Munziq Balgam)对银屑病小鼠模型的作用

热比姑丽·伊斯拉木，尤力都孜·买买提，伊力亚尔·斯玛依，斯拉甫·艾白

(1.新疆医科大学基础医学院药理教研室，新疆，乌鲁木齐 830054；2. 新疆维吾尔医方剂学实验室，新疆，乌鲁木齐 830049；3.新疆维吾尔自治区维吾尔医药研究所，新疆，乌鲁木齐 830049)

研究报告

异常黏液质成熟剂(Munziq Balgam)对银屑病小鼠模型的作用

热比姑丽·伊斯拉木1,2,3，尤力都孜·买买提2,3，伊力亚尔·斯玛依2,3，斯拉甫·艾白1,2,3

(1.新疆医科大学基础医学院药理教研室，新疆，乌鲁木齐 830054；2. 新疆维吾尔医方剂学实验室，新疆，乌鲁木齐 830049；3.新疆维吾尔自治区维吾尔医药研究所，新疆，乌鲁木齐 830049)

目的 观测维吾尔医经典方剂异常黏液质成熟剂(Munziq Balgam)对银屑病小鼠模型的作用。方法 用盐酸普萘洛尔建立小鼠耳部皮肤银屑病样模型，观察异常黏液质成熟剂对小鼠模型体重、脾脏和胸腺指数、以及该模型病理状态影响； ELISA法检查各组小鼠血清IL-10、IL-17、IL-23水平；同时，观察对小鼠模型的疗效。结果 异常黏液质成熟剂(2、4、8 g/kg剂量)对实验小鼠一般状况、体重变化无明显影响(P>0.05)；8 g/kg剂量能降低小鼠胸腺指数(P<0.05)；2、4、8 g/kg各剂量组对小鼠血清IL-10、IL-17、IL-23水平无明显影响(P>0.05)，但促进小鼠鼠尾表皮颗粒层细胞的形成、改善盐酸普萘洛尔致小鼠耳部皮肤银屑病样组织病理变化。结论 异常黏液质成熟剂对实验性银屑病有一定的治疗作用。

异常黏液质成熟剂；实验性银屑病；药效作用；模型，小鼠

维吾尔医学是以实践经验为主体，以整体治疗为特征的医学体系[1，2]，具有良好的临床疗效和独特的理论内涵。维吾尔医学基础理论中独具特色的体液理论认为，体液是在肝脏中形成，能被机体所转化，为生命活力给予力量，并适于人体本性的复杂物质的总成。体液不断生成，又不断被利用，是人类生命活动的物质基础。机体健康与否，与体液的正常与平衡密切相关。维吾尔医学认为[3]，同一疾病可由不同异常体液导致，但各种异常体液的分布有差异。据我区3196例患者异常体液分型及各种疾病的分布情况调查，异常黏液质型(白里海密 海日 台比依，汉文直译为非自然黏液质)银屑病患病率15.47%。维吾尔医学实践中对异常体液性疾病的治疗，经常采用独具特色的成熟疗法和清除疗法。维吾尔医疗方剂异常黏液质成熟剂(木尼孜其 白里海密，Munziq Balgam)是成熟疗法的经典方剂。本文利用实验性银屑病小鼠模型，探讨维吾尔医经典方剂异常黏液质成熟剂的作用，揭示其科学依据。

1 材料和方法

1.1 实验动物及实验环境

昆明小鼠130只，♀♂各半，SPF级，体质量(18～22)g，由新疆实验动物研究中心提供。实验动物生产许可证号：SCXK(新)2011-0001。实验动物使用许可证号：SYXK(新)2011-0006。

1.2 药品与试剂

本实验所用的药物制剂异常黏液质成熟剂(木尼孜其 白里海密，维吾尔语命名为Munziq Balgam)由新疆维吾尔自治区维吾尔医医院制剂室(GMP认证)提供。阳性对照药甲氨蝶呤片，由上海信宜药厂有限公司提供，国药准字H31020644，批号：20130403。盐酸普萘洛尔片(心得安)常州康普药业有限公司，国药准字H32021276，批号：1203004。小鼠白介素-10(IL-10)，国食药监械(准)字2009第3400951号；小鼠白介素-17(IL-17)，国食药监械(准)字 2012第3401164号；小鼠白介素-23(IL-23)试剂盒，国食药监械(准)字2012第3401163；批号均为：201310，由乌鲁木齐西域医鸣商贸有限公司提供。

1.3 主要仪器

TGL-5-A低速大容量离心机，上海安亭科学仪器厂；Anthos 2010酶标仪、Anthos iWO洗板机，郑州安图实验仪器有限公司；DM2500生物显微镜，德国莱卡公司；RM2235切片机，德国莱卡公司； KD-BM生物组织自动包埋机，浙江金华科迪仪器设备有限公司；KD-TS3D生物组织自动脱水机，浙江金华科迪仪器设备有限公司；KZPG-1A摊片烤片机，天津天利航空机电有限公司。

1.4 小鼠模型的建立和实验方法

1.4.1 小鼠鼠尾鳞片表皮模型和实验[4，5]：因小鼠尾部表皮天然缺少颗粒层细胞，类似银屑病表皮角化不全病理改变，因而可作为银屑病角化异常的传统天然模型。取60只小鼠，适应性饲养2 d后，小鼠♀♂分别按体重随机分为5组，即溶媒对照组、阳性对照药甲氨蝶呤组(1.5 mg/kg剂量)、Munziq Balgam(2、4、8 g/kg剂量)，每组10只，♀♂各半。以0.2 mL/10 g体积，1次/d，灌胃给予相应药物连续20 d。给药第21天脱颈法处死小鼠，取鼠尾距离根部3 cm皮肤标本，用15%甲醛固定、脱水、石蜡包埋并HE染色后在光镜下观察。

1.4.2 对盐酸普萘洛尔致小鼠耳部皮肤银屑病样模型的建立和实验[6，7]：取70只小鼠，适应性饲养2 d后，小鼠♀♂分别按体重随机分为6组，即溶媒对照组、模型组、阳性对照药甲氨蝶呤组(1.5 mg/kg剂量)、Munziq Balgam(2、4、8 g/kg剂量)，每组10只，♀♂各半。除溶媒对照组外，其余各组用5%心得安乳剂(取盐酸普蔡洛尔5 g用50%乙醇溶解, 加入月桂氮卓酮作为透皮吸收促进剂，加入聚乙烯毗咯烷酮5 g为成膜材料，再加50%乙醇至100 mL，即得)，均匀涂抹于小鼠双耳背部皮肤，每耳涂抹0.1 mL，早晚各1次，连续涂抹20 d。造模第21天开始，除模型组小鼠涂抹造模剂外，其余各给药组小鼠上午涂抹造模剂，下午灌胃给予相应药物，以0.2 mL/10 g体积，1次/d，连续20 d。给药第21天，末次给药2 h后，摘眼球法取血，随后取脾脏、胸腺及双侧耳廓。先称脾脏、胸腺，后与右侧耳廓一起迅速放入低温冰箱(-80℃)，待测相关指标。左侧耳廓皮肤标本，用15%甲醛固定、脱水、石蜡包埋并HE染色后在光镜下观察。分离血清，酶联免疫吸附法(ELISA)检测小鼠血清IL-10、IL-17、IL-23水平，操作步骤均严格按照试剂盒说明书进行。

1.5 统计学方法

用SPSS 17.0统计软进行分析。检验水准α=0.05

2 结果

2.1 对盐酸普萘洛尔致小鼠耳部皮肤银屑病样模型的作用

2.1.1 一般情况：与溶媒对照组比较，模型组、甲氨蝶呤组、Munziq Balgam(2、4、8 g/kg剂量)小鼠在实验期间，行为活动、皮毛、粪便、饮食等未见异常。

2.1.2 体重：与溶媒对照组比较，模型组、甲氨蝶呤组、Munziq Balgam(2、4、8 g/kg剂量)小鼠在实验期间，体重变化没有统计学差异(P>0.05)。(表1，2)。

2.1.3 胸腺、脾脏指数：与溶媒对照组比较，模型组小鼠胸腺指数升高(P<0.05)；与模型组比较，甲氨蝶呤组、Munziq Balgam(8 g/kg剂量)组能降低小鼠胸腺指数(P<0.05)；对脾脏指数的影响没有统计学意义(P>0.05)。(表3)

2.1.4 小鼠血清IL-17、IL-23、IL-10水平：与溶媒对照组比较，模型组小鼠血清IL-10降低，IL-17、IL-23略升高(P>0.05)。与模型组比较，甲氨蝶呤组、Munziq Balgam(2、4、8 g/kg剂量)对小鼠血清IL-10、IL-17、 IL-23水平无明显影响(P>0.05)(表4)。

表1 造模期间小鼠体重变化Tab.

表2 给药期间小鼠体重变化Tab.2 Changes of body weight of the mice during the drug ±s，n=10)

注：与溶媒对照组比较，P>0.05 Note. vs. solvent control group,P>0.05

表3 小鼠胸腺、脾脏指数Tab.

注：与溶媒对照组比较，﹡P<0.05，与模型组比较，▲P<0.05。

Note: vs. solvent control group,﹡P<0.05; vs. model group,▲P<0.05.

表4 小鼠血清IL-17、IL-23、IL-10水平Tab.

注：分别与溶媒对照组、模型组比较，P>0.05。

Note. vs. solvent control group and model group,P>0.05.

2.2 小鼠皮肤组织病理学变化[8]

2.2.1 银屑病样模型小鼠耳朵皮肤组织病理学变化：溶媒对照组，角质层为不全角化，上皮变薄。有颗粒细胞层，但颗粒不明显。真皮内无炎细胞浸润。皮脂腺、毛囊结构清晰。

与溶媒对照组比较，模型组角质层增厚，角质层内有角栓和微小脓肿形成。有颗粒细胞层，且颗粒明显。棘层增厚。真皮内血管扩张充血，大量炎细胞浸润。说明模型成立。与模型组比较，甲氨蝶呤组角质层变薄、均匀，角质层内角栓和微小脓肿明显减少。有1～2层颗粒细胞层，且颗粒明显。棘层变薄3～4层。真皮内炎症明显减轻。Munziq Balgam(2、4、8 g/kg剂量)能使角质层渐变薄，角质层内微小脓肿逐渐减少；有1～2层颗粒细胞层，且细胞内颗粒明显；棘细胞层变薄；真皮层内炎细胞逐渐减少(图1,见封三)。无明显剂量规律性

2.2.2 鼠尾鳞片表皮模型小鼠的组织病理学变化: 溶媒对照组，无颗粒细胞层。与溶媒对照组比较，甲氨蝶呤组个别区域内出现1～2层颗粒细胞层，但细胞内颗粒不明显。Munziq Balgam(2、4、8 g/kg剂量)部分区域出现1～2层颗粒细胞层，且细胞内颗粒明显(图2见封底)。无明显剂量规律性。

3 讨论

维吾尔医学认为，正常黏液质体液(白里海密 台比依)[1-3]是进入人体的营养物质和体液经肝脏吸收改变之后形成的，储存于人体各个器官中最小部位的白色浓液体，属性湿寒。由于各种内外因素的影响，使黏液质发生变化，就会为相应的各种疾病的产生形成内部条件。异常黏液质(白里海密 海日 台比依)，系指失去变为血液功能的黏液质或黏液质成分中未成熟的异常部分。这种异常黏液质的增多不但产生一系列疾病，影响血液的补充，而且可引起贫血、慢性炎肿、皮肤疾病等。在维吾尔医学临床实践中[1-3]，对异常体液性疾病的治疗经常采用维吾尔医独具特色的成熟和清除疗法，首先给予该体液的成熟剂(木尼孜其，Munziq)，待物质成熟的特征出现后，再给予清除异常体液的该类体液的清除剂(木斯黑力，Mushil)，待全身被清理后，再根据失调气质引起的疾病症状给予专门的治疗药物或补益药。

本文使用的异常黏液质成熟剂(木尼孜其 白里海密，Munziq Balgam)[3]由铁线蕨、玫瑰花、地锦草等组成，属性湿热。按照维吾尔医学临床治疗疾病方法，通过动物实验的途径和方法，探讨该异常黏液质成熟剂的药效和药理作用。实验结果表明，Munziq Balgam能促进小鼠鼠尾表皮颗粒层细胞的形成；能改善盐酸普萘洛尔致小鼠耳部皮肤银屑病样织病理学变化，但对小鼠的血液指标变化不明显，结果提示单独使用Munziq Balgam 对实验性银屑病小鼠模型有一定的改善作用，依据维吾尔医学的黏液质体液理论的临床实践，其治疗疾病步骤方法包括成熟疗法、清除疗法，最后给予专门的治疗药物或补益药疗法。本实验初步证明异常黏液质成熟剂对实验性银屑病模型小鼠的皮肤组织结构和病理有作用，提示可利用异常黏液质成熟剂治疗银屑病，具有应用前景。

近几年维吾尔医学药学的基础理论研究已有了一定的突破，但很多方面尚难以用现代科学技术的观点来阐明，如果不从现在给予足够重视，维吾尔医学药学事业的继续发展将是极为困难的。因此，应用现代科学技术对维吾尔医学体液理论进行研究，揭示其科学内涵具有非常迫切的现实意义。本文的工作为利用现代药效和药理研究的方法阐明维吾尔药学方剂Munziq Balgam的机理做了有益的尝试，也为维吾尔医学的黏液质体液理论提供了现代医学研究的参考价值。

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Therapeutic action of a Uyghur medicine Munziq Balgam on the mouse model of psoriasis

Rabigul·Islam1,2,3, Yultuz Mamat2,3, Ilyar.Ismayil2,3, Sirapil Abay1,2,3

(1. Department of Pharmacology, Basic Medical College of Xinjiang Medical University, Urumqi 830054, China;2. Laboratory of Traditional Uyghur Medicine Prescription of Xinjiang, Urumqi 830049;3. Institute of Xinjiang Traditional Uyghur Medicine, Urumqi 830049)

Objective To observe the effect of a Uyghur medicine Munziq Balgam on the mouse model of psoriasis. Methods 130 healthy Kunming mice were used in this study. The mouse model of psoriasis was established by applying 5% propranol hydrochloride emulsion to the mouse ear. The tail and ear skin histology was examined using HE staining, and the serum levels of IL-10, IL-17, IL-23 were measured with ELISA. Results The mice of Munziq Balgam treated groups (2, 4, 8 g/kg) did not show obvious abnormalities of general condition and body weight changes (P>0.05). The 8 g/kg Munziq Balgam treated group showed decreased thymus index (P<0.05). The 2, 4, and 8 g/kg Munziq Balgam treated groups showed no significant changes of the serum levels of IL-10, IL-17, and IL-23 (P>0.05). The 2, 4, and 8 g/kg Munziq Balgam treated groups showed promoted formation of epidermis granular layer in the mouse tail skin and improved histology of the ear skin. Conclusions The Uygur medicine Munziq Balgam shows therapeutic effect on experimental mouse models of psoriasis.

Munziq Balgam; Psoriasis; Therapeutic action; Model, mouse

新疆维吾尔自治区公益性科研院所项目(编号：KY201302)，自治区卫生厅(编号：2007ZMY14)。

热比姑丽·伊斯拉木(1970-)，女，博士研究生，研究方向：维药药理学。E-mail: rabiya272@126.com。

斯拉甫·艾白(1960-)，男，博士生导师，研究方向：维药药理学。E-mail: aibai@263.net。

R33

A

1671-7856(2014) 08-0024-04

10.3969.j.issn.1671.7856. 2014.008.006

2014-06-30