黄白痤疮膏体外抑菌实验

陈卫平宾 琳杨胜辉

1湖南中医药高等专科学校 株洲 412012 2湖南中医药大学

·实验研究·

黄白痤疮膏体外抑菌实验

陈卫平1宾 琳1杨胜辉2

1湖南中医药高等专科学校 株洲 412012 2湖南中医药大学

目的 探讨黄白痤疮膏体外抑菌效果。方法 采用试管倍比稀释法、平板法，用黄白痤疮膏水煎液、头孢曲松钠、维A酸乳膏，对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌进行抗菌实验。结果 黄白痤疮膏方煎液、维A酸乳膏、头孢曲松钠金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度（MIC）分别为125mg/mL、500mg/mL、4μg/mL。表皮葡萄球菌的最小抑菌浓度分别为125mg/mL、500mg/mL、16μg/mL。结论 黄白痤疮膏方水煎液对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌有较好的抑菌和杀菌效果。

黄白痤疮膏；金黄色葡萄球菌；表皮葡萄球菌；抑菌试验

黄白痤疮膏是一种纯中药制剂，外用治疗寻常性痤疮临床疗效确切[1]，能通过有效降低血清雄激素水平来调节雌、雄激素水平，使到达皮肤基底皮脂腺细胞部位的睾酮水平随之降低，从而抑制皮脂腺细胞的增生和分泌功能，影响皮脂腺斑的增生，有效缩小皮脂腺斑[2]。为探讨黄白痤疮膏抑菌效果，本实验拟采用试管倍比稀释法、平板法，对黄白痤疮膏进行抗菌实验，现报道如下。

1 实验材料

1.1药 物 黄白痤疮膏药物组成：大黄、黄连、硫磺、白芷、白茯苓、白蔹。中药均从湖南中医药大学附属第一医院中药房购置，并经药剂师鉴定。将原方单味药（除硫磺外）各取10g，分别加入700mL蒸馏水浸泡过夜后，常规水煎，浓缩至70mL煎液（相当于1.0g/mL生药）。硫磺研磨至细粉状，取10g加入煎液中,调节pH值为7.5，8磅、105℃灭菌15min备用。

1.2对照用药 注射用头孢曲松钠（1g/瓶，上海罗氏制药有限公司），加入7.8mL生理盐水，配置成128mg/mL的贮存液备用。维A酸乳膏（重庆华邦制药股份有限公司），精密称取10g，加入吐温-80 10mL，搅拌使其完全乳化，加入10mL生理盐水，配置成药物浓度0.5g/mL，8磅、105℃灭菌15min备用。

1.3实验菌株 金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌均来源于湖南中医药大学免疫学基础与病原生物学教研室保存菌种。

1.4培养基 按照文献常规配制肉汤培养基及肉汤琼脂培养基,在肉汤培养基加入酚红至终浓度为0.002%，8磅、105℃灭菌15min后置4℃冷藏备用。

2 实验方法

采用试管倍比稀释法、平板法，对黄白痤疮膏水煎液进行抗菌实验。

2.1制备菌悬液 分别取各菌种，接种肉汤琼脂平板上，37℃下需氧培养24h,分别用接种环挑取单个菌落，于试管肉汤培养基中培养8h，达到对数生长期。用灭菌生理盐水校正至0.5麦氏比浊单位（约1.5×108cfu/mL）。

2.2药液稀释 排列无菌试管6支，共4组，分别加入1mL肉汤培养基，另取三只灭菌试管，各加入1.8mL培养基，取0.2mL头孢曲松钠贮存液（128mg/ mL），稀释至128μg/mL，为工作液。取黄白痤疮膏水煎液、维A酸乳膏、头孢曲松钠工作液各1mL，加入第一管，充分混匀后取出1mL加入第二管，再混匀后取出1mL加入第三管，如此连续稀释至第五管，取出1mL弃掉，设第六管为不加药对照。将黄白痤疮膏水煎液稀释至500、250、125、62.5、31.25mg/mL；维A酸乳膏分别稀释成终浓度为250.0、125.0、62.5、31.25、15.625mg/mL；头孢曲松钠稀释成终浓度64、32、16、8、4μg/mL。

2.3抑菌试验 每只试管里加入50μL菌悬液，将含药试管放置于37℃恒温箱培养24h后观察各试管颜色，以培养基浑浊和变为黄色判断为有菌生长，以最大稀释浓度试管中无细菌生长为最低抑菌浓度（MIC）。试验以头孢曲松钠作为西药抑菌试验对照组。

2.4杀菌试验 在各药物试管中分别用接种环取一环液体，于琼脂平板上划线，置37℃恒温箱培养24h，观察菌落生长情况，以最高稀释度药物试管中菌液仍无菌落生长为最低杀菌浓度。实验重复3次。试验以头孢曲松钠作为西药杀菌试验对照组。

3 实验结果

黄白痤疮膏方煎液、维A酸乳膏、头孢曲松钠对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度（MIC）分别为125mg/mL、500mg/mL、4μg/mL，对表皮葡萄球菌的最小抑菌浓度分别为125mg/mL、500mg/mL和16μg/ mL。黄白痤疮膏方水煎液对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌有较好的抑菌和杀菌效果，但低于头孢曲松钠西药对照组。对金黄色葡萄球菌的MIC见表1，对表皮葡萄球菌的MIC见表2。

表1 三组金黄色葡萄球菌MIC

表2 三组表皮葡萄球菌MIC

4 讨 论

经验方黄白痤疮膏是在《医宗金鉴》颠倒散的基础上，运用中药配伍原理结合多年临床观察设计而成的纯中药外用制剂，功能清热解毒，散瘀消肿。采用局部用药能直达病所，用于治疗轻、中度痤疮，疗效满意[1]。该药能抑制皮脂腺细胞的增生和分泌功能，影响皮脂腺斑的增生，有效缩小皮脂腺斑[2]；药理研究证明，大黄、黄连、硫磺有较强的抗菌消炎作用；本组体外抑菌实验研究证实黄白痤疮膏对金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌有较好的抑菌和杀菌效果。

［1］刘百祥，肖跃群，符逢春，等，黄白散治疗青春期寻常痤疮99例疗效观察［J］.湖南中医杂志，2007，23（1）：31.

［2］陈卫平，刘百祥，符逢春，等，黄白痤疮膏对金黄地鼠白细胞雄激素受体及皮脂腺斑组织结构的影响［J］.中华中医药学刊，2009，27（3）：521-523.

Bacteriostasis Effect of Huangbai Acne Ointment in Vitro

CHEN Weiping1,BIN Lin1,YANG Shenghui2. 1 Hunan Traditional Chinese Medical College,Zhuzhou(412012),China;2 Hunan University of Traditional Chinese Medicine.

Objective To investigate the bacteriostasis effect of Huangbai acne ointment.Methods Tube fold dilution method and plate method were used to observe the bacteriostasis effect of Huangbai acne ointment water decoction,ceftriaxone,and vitamin A acid cream on Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidermidis in vitro. Results The minimum inhibitory concentration（MIC）of Huangbai acne ointment water decoction,ceftriaxone,and vitamin A acid cream against Staphylococcus aureus was 125mg/mL,4 μg/mL,and 500mg/mL,respectively.The MIC of Huangbai acne ointment water decoction,ceftriaxone,and vitamin A acid cream against Staphylococcus epidermidis was 125mg/mL,16 μg/mL,and 500mg/mL,respectively.Conclusion Huangbai acne ointment water decoction has a good bacteriostatic and bactericidal effect on Staphylococcus aureus and Staphylococcus epidermidis.

Huangbai acne ointment;Staphylococcus aureus;Staphylococcus epidermidis;Bacteriostatic test

2013-09-16

湖南省教育厅科技计划项目（No.09C030）