百令胶囊对实验性糖尿病大鼠肾脏的保护作用

宋艳丽,刘兴林,陈德森

(湖北医药学院,湖北十堰 442000 1 附属太和医院消毒供应中心; 2 实验动物中心; 3 机能实验室)

百令胶囊对实验性糖尿病大鼠肾脏的保护作用

宋艳丽1,刘兴林2,陈德森3

(湖北医药学院,湖北十堰 442000 1 附属太和医院消毒供应中心; 2 实验动物中心; 3 机能实验室)

目的观察百令胶囊对实验性糖尿病大鼠肾脏的影响并探讨其作用机制。方法45只大鼠随机分为对照组、模型组及百令胶囊组,其中模型组及百令胶囊组大鼠采用腹腔注射链脲菌素(25 mg/kg)建立糖尿病模型,对照组仅注射0.5 m L枸橼酸缓冲液,1周后百令胶囊组以10 mg/kg百令胶囊灌胃,每天1次;对照组及模型组以10 m L/kg生理盐水灌胃,每天1次,3组大鼠连续灌胃49 d。于第7、28、49天各组分别处死大鼠5只,测量肾脏质量并计算肾指数;第7、28、49天大鼠尾静脉取血测定血糖、血清肌酐及尿素氮水平;同时收集24 h尿液测定尿微量清蛋白的水平。结果第7、28、49天百令胶囊组肾脏质量、肾指数、血清肌酐、尿素氮及尿微量清蛋白水平明显低于模型组,差异均有显著性(F＝13.32～85.36,q＝3.58～92.39,P＜0.05)。百令胶囊组血糖与模型组比较,差异无显著性(P＞0.05)。结论百令胶囊对实验性糖尿病大鼠肾脏具有一定的保护作用,其作用机制可能与其阻止肾间质病变、纠正蛋白质及脂质代谢、延缓肾功能减退,进而改善肾功能有关。

百令胶囊;尿微量清蛋白;血糖;血尿素氮

百令胶囊是经现代工艺发酵冬虫夏草菌粉制成的中药,该药具有补肺肾,益精气,保护肾脏和肝脏等作用[1]。用于肺肾两虚引起的腰背酸痛及糖尿病肾病(DKD)的辅助治疗。本研究旨在观察百令胶囊对实验性糖尿病大鼠肾脏的影响,为临床治疗DKD提供理论依据。现将结果报告如下。

1 材料与方法

1.1 实验动物

选择雄性SD大鼠45只,体质量180～220 g, SPF级,由湖北省实验动物研究中心提供,合格证号:SCXK(鄂)2010-2013。

1.2 药品试剂及仪器

百令胶囊为杭州中美华东制药有限公司产品,链脲佐菌素(STZ)为美国Sigma公司产品,大鼠尿清蛋白EIA测定试剂盒为美国RND公司产品,日立7150型全自动生化分析仪为日本日立精密仪器株式会社产品。

1.3 实验性大鼠糖尿病模型制备及各组处理

按文献[2]的方法给予大鼠高糖高脂饮食5个月,然后禁食12 h,随机分为对照组、模型组及百令胶囊组,模型组及百令胶囊组大鼠均腹腔注射STZ 25 mg/kg诱导糖尿病模型(每天1次,连续注射1周),对照组注射0.5 m L枸橼酸缓冲液。以腹腔注射后第7天大鼠随机血糖(Blu)≥16.7 mmol/L,尿糖(⧻～)以上者为糖尿病模型造模成功。造模成功后,对照组及模型组大鼠每天每次以10 m L/kg生理盐水灌胃,百令胶囊组每天每次以10 mg/kg百令胶囊灌胃,连续灌胃49 d,于第7、28、49天分别尾静脉取血检测大鼠Blu、血清肌酐(Cr)和血尿素氮(BUN)的水平;同时留取24 h尿液,检测尿微量清蛋白(U-MA)含量。各组于第7、28、49天处死5只大鼠,取右侧肾脏,清除肾门处血管及结缔组织,测定大鼠肾脏质量(LRW)及并计算肾指数(RWI)。

1.4 观察指标及检测方法

使用Uritest-500尿液分析仪以免疫比浊法测定U-MA的含量,使用日立7150型全自动生化分析仪电极法测定血清BUN和Cr的水平。Blu按常规方法检测。

1.5 统计学处理

采用SPSS 15.0及PPMS 1.5[3]软件进行数据处理,结果以±s表示,组间比较采用方差分析。

2 结 果

2.1 百令胶囊对糖尿病大鼠LRW及RWI的影响

模型组大鼠第7、28、49天LRW及RWI明显高于对照组,差异有显著性(F＝23.29～85.36,q＝9.58～90.31,P＜0.05)。而百令胶囊组在第7、28、49天LRW及RWI明显底于模型组,差异有显著性(q＝21.54～68.39,P＜0.05)。见表1。

2.2 百令胶囊对糖尿病大鼠Blu及U-MA水平的影响

模型组第7、28、49天Blu含量均明显高于对照组,差异有显著意义(F＝27.85～79.36,q＝3.58～46.01,P＜0.05)。百令胶囊组第7、28、49天Blu含量与模型组比较,差异无显著性(P＞0.05)。百令胶囊组第7、28、49天U-MA水平明显低于模型组,差异有显著性(q＝11.58～70.37,P＜0.05)。见表2。

2.3 百令胶囊对实验性糖尿病大鼠Cr和BUN水平的影响

模型组第7、28、49天Cr、U-MA含量均明显高于对照组,差异有显著意义(F＝13.32～85.36,q＝3.58～47.31,P＜0.05)。百令胶囊组第7、28、49天Cr的含量均明显低于模型组,差异有显著意义(q＝11.51～76.31,P＜0.05)。百令胶囊组在第28及49天BUN水平明显低于模型组,差异有显著性(q＝3.58、92.39,P＜0.05)。见表3。

表1 百令胶囊对糖尿病大鼠LRW及RWI的影响(±s,n＝5)

表1 百令胶囊对糖尿病大鼠LRW及RWI的影响(±s,n＝5)

与对照组比较,F＝23.29～85.36,∗q＝9.58～90.31,P＜0.05;与模型组比较,＃q＝21.54～68.39,P＜0.05。

组 别LRW(m/g) RWI(χ/%)第7天第28天第49天第7天第28天第49天对 照 组0.663±0.062 0.671±0.061 0.677±0.063 0.314±0.041 0.309±0.401 0.312±0.032模 型 组 0.889±0.038∗0.912±0.039∗0.874±0.392∗0.494±0.039∗0.487±0.037∗0.464±0.238∗百令胶囊组 0.827±0.035＃0.748±0.029＃0.696±0.357＃0.412±0.025＃0.395±0.036＃0.364±0.027＃

表2 百令胶囊对糖尿病大鼠Blu和U-MA水平的影响(±s,n＝20)

表2 百令胶囊对糖尿病大鼠Blu和U-MA水平的影响(±s,n＝20)

与对照组比较,F＝27.85～79.36,∗q＝3.58～46.01,P＜0.05;与模型组比较,＃q＝11.58～70.37,P＜0.05。

组 别Blu(c/mmol·L-1) U-MA(mg/24 h) 7天28天49天7天28天49天对 照 组7.29±0.31 6.57±0.22 7.25±0.32 1.79±0.17 1.52±0.19 1.66±0.12模 型 组 22.39±2.31∗24.58±2.12∗29.26±2.36∗7.27±0.22∗7.11±0.33∗7.19±0.21∗百令胶囊组20.31±2.37 21.64±2.29 25.53±1.47 5.71±0.25＃4.55±0.21＃3.94±0.15＃

表3 百令胶囊对糖尿病大鼠Cr和BUN水平的影响(±s,n＝20)

表3 百令胶囊对糖尿病大鼠Cr和BUN水平的影响(±s,n＝20)

与对照组比较,F＝13.32～85.36,∗q＝3.58～47.31,P＜0.05;与模型组比较,＃q＝3.58～92.39,P＜0.05。

组 别Cr(ρ/mg·L-1) BUN(c/mmol·L-1) 7天28天49天7天28天49天对 照 组5.2±0.3 5.8±0.3 5.2±0.2 90.71±0.33 91.57±0.45 91.56±0.39模 型 组 37.3±1.4∗30.1±1.3∗24.2±1.1∗135.21±10.54∗135.14±10.13∗128.74±9.41∗百令胶囊组 14.5±1.1＃8.1±0.5＃6.4±0.3＃129.69±8.52 92.52±2.42＃90.72±0.67＃

3 讨 论

DKD是晚期糖尿病最重要的微血管并发症之一,是终末期肾病的主要原因,也是糖尿病的主要死因[4]。主要表现为蛋白尿,渐进性肾功能损害、高血压、水肿等,死亡率高。因此,对DKD的诊治显得尤为重要,而中医药在控制DKD的症状及延缓病情发展方面有着重要的作用,筛选开发治疗DKD的生物资源对糖尿病病人的康复和生活质量的提高具有重要意义。

百令胶囊富含氨基酸、多糖、有机酸、多种微量元素、核苷、肽类及甾醇类等多种化学成分,主要成分是虫草多糖,具有多种药理活性,包括保护肝肾功能、抗炎及免疫调节作用等。可通过调节人体免疫功能、调控肾脏固有细胞增殖及细胞外基质合成,调节细胞因子、生长因子及改善人体代谢机制,发挥减少尿蛋白、改善肾功能及减轻肾脏病理改变等多种作用[5]。

本研究结果显示,百令胶囊组在治疗后U-MA排泄量逐渐下降,且明显低于模型组,提示百令胶囊能有效降低U-MA水平,这与胡杨青等[6]利用人工虫草干预大鼠后,可明显减少大鼠24 h的U-MA水平,从而保护肾脏,延缓肾小球硬化的进程一致。本实验结果亦显示,百令胶囊对糖尿病大鼠肾脏具有一定的保护作用,其作用机制可能与减少炎性递质的产生,增加肾血流量及肾小球滤过率,改善微循环,降低U-MA及肾小管对Cr及BUN的重吸收进而改善肾功能有关[7]。现代药理学与临床研究亦证明,百令胶囊可降低糖尿病大鼠LRW及RWI,具有延缓肾小球基底膜增厚及足突融合,抑制肾间质病变等保护肾脏的作用。与本文研究结果一致。

总之,本实验研究证实,百令胶囊对糖尿病大鼠肾脏有一定的保护及治疗作用,下一步我们将采用免疫学方法观察百令胶囊对糖尿病大鼠肾小管再生情况的影响。

[1]田劭丹,李冬云,侯丽,等.百令胶囊抗肿瘤研究进展[J].实用中医内科杂志,2006,20(1):7-8.

[2]张丽,李素梅,叶山东,等.安体舒通对2型糖尿病大鼠肾脏的保护作用及对肾组织mcp-1表达的影响[J].陕西医学杂志2010,39(1):9-10.

[3]周晓彬.医用统计学软件PPMS 1.5在医学科学研究中的应用价值[J].青岛大学医学院学报,2011,47(6):504-506.

[4]王丽萍,朱本章.糖尿病肾病71例死因分析[J].陕西医学杂志,2009,38(3):371-372.

[5]陈晓燕.百令胶囊的药理与临床研究进展[J].中医药导报, 2009,15(2):92.

[6]胡杨青,周巧玲,刘抗寒,等.百令胶囊对糖尿病肾病鼠肾组织转化生长因子β/C-myc表达的影响[J].肾脏病与透析肾移植杂志,2005,14(5):413.

[7]高清华,王铭,张瑞杰,等.银杏达莫联合百令胶囊治疗早期糖尿病肾病的临床研究[J].齐鲁护理杂志,2010,16(21):123.

(本文编辑 厉建强)

PROTECTIVE EFFECT OF BAILING CAPSULE ON THE KIDNEY OF EXPERIMENTAL DIABETIC RATS

SONG Yanli,LIU Xinglin,CHEN Desen (Disinfection Centre,Taihe Affiliated Hospital,Hubei University of Medicine,Shiyan 442000,China)

ObjectiveTo observe the protection of Bailin capsule on the kidney of experimental diabetic rats and explore its mechanism.MethodsForty-five rats were evenly randomized to control group,model group and Bailing capsule group.A diabetes model was created in rats in model group and Bailing capsule group by intraperitoneal injection of streptozotocin(25 mg/ kg),those in the control group were injected only 0.5 m L citric acid buffer solution.One week later,the rats in the model group started to receive intragastric Bailing capsule(10 mg/kg,once a day,for 49 days),those in the control group and model group were given intragastric normal saline(10 m L/kg,once a day,for 49 days).On days 7,28,and 49,five rats in each group were killed in each time,the weight of the kidney was measured,and the quality index calculated;the blood samples were taken from caudal vein for blood sugar,creatinine and blood urea nitrogen detection,and 24-hour urine was collected for detecting urinary albumin.ResultsThe kidney quality,kidney index,serum creatinine,urea nitrogen and urinary albumin levels(on days 7,28 and 49)in rats of Bailing capsule group were lower than that of the control group,the differences were significant(F＝13.32-85.36,q＝3.58-92.39,P＜0.05),the difference of blood sugar between the two groups was not significant(P＞0.05).ConclusionBailing capsule shows protection on the kidney of experimental diabetic rats,its mechanism may be related to preventing pathologic changes of renal interstitial,correcting protein and lipid metabolism,and delaying the deterioration of kidney function, and thus improving the renal function.

bailing capsule;urinary microalbumin;blood glucose;blood urea nitrogen

R587.1

A

1008-0341(2014)01-0035-03

10.13362/j.qlyx201401013

2013-03-16;

2013-08-22

宋艳丽(1971-),女。

陈德森(1970-),男,副教授。