黄精提取液对正常小鼠抗疲劳能力的影响及机制探讨

卢焕俊，刘思源，李香兰

(延边大学医学院，吉林延吉133002)

黄精是重要的药用植物，含有黄精皂苷、烟酸、糖类、醌类、氨基酸及微量元素，具有补肾益精、滋阴润燥之功效，用于滋补强身和治疗肾虚精亏，肺虚燥咳以及脾胃虚弱之证，是中药常用的药物之一［1］。已有研究［2，3］表明，黄精具有免疫激发、增强免疫、延缓衰老、抗病毒等作用。但目前关于黄精对于抗疲劳和抗氧化方面的研究内容较少。2013年12月～2014年4月，我们观察了黄精提取液对正常小鼠抗疲劳能力的影响，并探讨其可能机制。

1 材料与方法

1.1 黄精提取液制备 中药黄精购于延边中医院，用一蒸水熬制成生药量为1 g/mL的提取液，再用一蒸水配制成浓度分别为 0.5、1、1.5 g/mL 的提取液备用。

1.2 实验动物分组及处理 清洁级雄性昆明种小鼠96只，体质量18～22 g，由延边大学医学部实验动物科提供。选择48只雄性昆明种小鼠，随机分为4 组各12 只，A、B、C 组小鼠分别以5、10、15 g/kg黄精提取液灌胃，D组给予等容量蒸馏水，连续灌胃15 d，用于负重游泳力竭实验。另取48只雄性昆明种小鼠，随机分为4组各12只，E、F、G组分别以5、10、15 g/kg黄精提取液灌胃，H组予等容量蒸馏水，连续灌胃15 d，用于肌肉SOD活力和MDA水平测定实验。

1.3 小鼠一般状态和大体病理观察 在15 d的灌胃期间里，注意观察各组动物的体毛、呼吸、摄食、饮水、大小便、精神状态的变化。实验结束后，各组动物均进行解剖，观察小鼠大体病理情况(心、肝、脾、肺、肾等)。

1.4 小鼠游泳力竭时间测定 末次灌胃结束30 min后，在小鼠尾根部1cm处负重小鼠体质量的5.5%，让小鼠在水深 30cm、水温(25.0±0.5)℃的游泳箱中游泳至力竭。力竭时间为小鼠开始游泳到小鼠下沉不再浮上来5 s的时间。分别记录各组小鼠游泳力竭时间。

1.5 小鼠肌肉组织SOD活力和MDA水平测定灌胃结束后30 min即进行无负重游泳90 min，后取腓肠肌组织0.2～0.3 g放入相当于其9倍体积的生理盐水中，用小剪刀切碎，匀浆器匀浆15 s，停30 s，反复3 次。3 000 r/min，离心15 min，取上清液以200 μL/管分装，－80℃冷冻保存，采用酶联免疫法测定SOD活力、MDA水平。

1.6 统计学方法 采用SPSS11.5统计软件。计量资料以±s表示，进行单因素方差分析及t检验。P≤0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 小鼠一般状态和大体病理比较 实验期间，所有小鼠一般状态均良好。各组动物的进食量、大小便、体毛、精神状态等均无异常。实验结束后，各组动物均进行解剖，肉眼观察肾、脾、心、胃肠、肝和肺等脏器均无明显异常。说明黄精提取液不会导致实质性脏器的大体病理损伤。

2.2 小鼠游泳力竭时间比较 A、B、C、D组小鼠游泳力竭时间分别为(14.20±3.95)、(17.60±3.70)、(17.82±2.92)、(12.20±2.58)min，B、C 组与D 组比较，P均 ＜0.05。

2.3 小鼠肌肉组织SOD活力、MDA水平比较 结果见表1。

表1 各组小鼠肌肉组织SOD活力、MDA水平比较(±s)

表1 各组小鼠肌肉组织SOD活力、MDA水平比较(±s)

注:与 H 组比较，*P ＜0.05;与 E 组比较，△P ＜0.05

组别 SOD(U/mg) MDA(nmol/mg)E组29.17±3.94 12.20±1.42 F 组 33.46±3.51* 10.55±1.28*G 组 36.63±3.96＊△ 10.07±1.06*H组25.53±3.78 13.55±2.54

3 讨论

黄精作为一种传统名贵中药具有宽中益气、益肾填精、滋阴润肺、生津补脾的功效。在临床上，黄精主治肺燥干咳、体虚乏力、心悸气短、久病津亏口干、糖尿病、高血压等。此外大量研究［4～9］表明，黄精在抗衰老、降血脂、降血糖及维护心血管系统功能和抗炎抗病原微生物等方面有一定的功效。

肌肉疲劳是一种复杂的现象，当发生肌肉疲劳时机体不能将它的功能保持在某一特定水平或不能维持某一预定的运动强度，表现为运动时能量体系输出功率和肌肉力量的下降或内脏器官功能的下降而不能维持运动强度，力竭是运动性疲劳的特殊形式，是在疲劳的基础上降低运动强度和改变运动条件，机体继续保持运动直到完全不能运动的现象，是疲劳长期积累而引起机体功能紊乱的病理状态［10，11］。本研究显示，B、C 组小鼠游泳力竭时间长于D组，表明黄精提取液可以有效的提高小鼠的运动以及肌肉抗疲劳能力。

文献［12］发现，生物体内有多种活性氧自由基的存在。氧自由基产生过多或清除能力下降与癌症、衰老及自身免疫功能丧失等多种疾病的发生、发展密切相关。而抗氧化剂就是通过阻止自由基链反应的启动与延伸，终止自由基反应从而预防或减轻自由基对生物机体的损伤，达到疾病防治的目的［13］。在缺血、缺氧、过度疲劳时都可以引起氧化损伤，此时细胞色素氧化酶无力将氧还原成水，氧原子便会被夺去一个电子，由无害的氧变成具有杀伤力的活性氧自由基［14，15］。氧自由基的过氧化杀伤，主要是破坏细胞膜的结构和功能，破坏线粒体，断绝细胞的能源，毁坏溶酶体，使细胞自溶，此时体内氧自由基大量堆积，而大量堆积会导致细胞损伤、衰老、癌变等。SOD是体内重要的抗氧化酶，其作用是维持体内自由基的动态平衡，防止脂质过氧化物MDA对机体的损害［16］。SOD能与体内各种氧化酶结合，清除超氧阴离子自由基(O2－)，终止自由基连锁反应，维护细胞功能免受损伤［17，18］。另有研究［19］显示，运动中自由基的大量产生和血浆脂质过氧化的显著升高，是导致运动性疲劳产生的重要原因。本研究显示，F、G组小鼠肌肉组织SOD活力强于H组，E组弱于G组;F、G组小鼠肌肉组织MDA水平低于H组。提示黄精提取液高中剂量使小鼠清除代谢过程中所产生的自由基的抗氧化能力显著提高。

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