康乐鼻炎片的质量标准研究

管志美

（湖南省药品审评认证与不良反应监测中心，长沙 410000）

康乐鼻炎片［1］是由白芷、防风、牡丹皮、薄荷脑、马来酸氯苯那敏、辛夷、黄芩、穿心莲等11味药物加工制成的片剂，其功效主要为：疏风清热、活血驱瘀和祛湿通窍。临床主治：鼻炎、过敏性鼻炎和鼻窦炎。康乐鼻炎片收载于《中国卫生部药品标准》（中药成方制剂）第十二册［1］，但旧的药品标准中仅有穿心莲和马来酸氯苯那敏的薄层鉴别。为了提高药品质量的控制标准，本研究对原标准进行了进一步完善和提高，对白芷、薄荷、马来酸氯苯那敏和黄芩4味主要药味进行了定性鉴别，同时对黄芩中黄芩苷的含量进行了定量分析，完善了康乐鼻炎片的质量标准，现报道如下。

1 仪器与材料

岛津 SCL－10Avp高效液相色谱仪、SPD－10AV紫外检测器，METTLER AE240电子天平（感量0.1mg、0.01mg）。甲醇为色谱纯，其他试剂试药均 为 分 析 纯［2］。 黄 芩 苷 （110715－200212）、黄 芩（120955－200305）、白 芷 （120945－200305）、薄 荷（120916－200006）和 马 来 酸 氯 苯 那 敏 （120985－200309）均购自中国药品生物制品检定所；康乐鼻炎片由华中科技大学同济医学院附属同济医院药学部制备 （规 格：0.4g／片；批 号：130601、130801、130802）。

2 定性鉴别

2.1 白芷的薄层鉴别

取本品10片，研细，加石油醚（40～60℃）15 mL，摇匀，超声处理5min，过滤，滤液低温浓缩至2 mL，将其作供试品溶液。取白芷0.5g，置具塞试管中，加石油醚1mL（40～60℃），超声处理10min，静置，取上清液作为对照药材溶液［3］。按照薄层色谱法（《中国药典》2010年版一部附录ⅥB）试验，吸取供试品溶液和对照药材溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚（30～40℃）－乙醚（3∶2）为展开剂，展开并取出，将其晾干，置于365 nm紫外光灯下检视。在与对照药材色谱相对应位置的供试品色谱中，可显现同色的荧光斑点［4］。阴性无干扰（见图1）。

图1 白芷的TLC图

2.2 薄荷的薄层鉴别

取本品20片，研细，将其置于挥发油提取器中提取挥发油。用1mL石油醚（40～50℃）吸收挥发油，同时吸取石油醚溶液作为供试品溶液；取薄荷2 g，同法制成对照药材溶液［5］。参照薄层色谱法（《中国药典》2010年版一部附录ⅥB）试验，吸取上述对照药材溶液和供试品溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯－醋酸乙酯（20∶1）为展开剂，将其展开，取出并晾干，以香草醛硫酸试液－乙醇的混合溶液（1∶4）喷之，80℃ 加热至斑点显色清晰为止［6］。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，呈显出同色的斑点［4］。阴性无干扰（见图2）。

2.3 黄芩的薄层鉴别

取本品1片，除去包衣，研细，加甲醇10mL使其溶解，超声处理10min，取上清液作为供试品溶液；另取黄芩对照药材1g，加甲醇5mL溶解制成溶剂，取其上清液作为对照药材溶液［7］。照薄层色谱法（《中国药典》2010年版一部附录ⅥB）试验，吸取上述供试品溶液和对照药材溶液各10μL，分别将其点于同一硅胶G薄层板上（以含5%醋酸钠的羧甲基纤维素钠溶液为黏合剂），以醋酸乙酯－丁酮－甲酸－水（10∶5∶2∶2）为展开剂，展开，取出并晾干，喷显色剂（1%三氯化铁乙醇溶液）。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，其呈显出同色的斑点［4，8］。阴性无干扰（见图3）。

图2 薄荷的TLC图

图3 黄芩的TLC图

2.4 马来酸氯苯那敏的薄层鉴别

取本品3片，除去包衣，研细，加氯仿20mL，使其溶解，滤过，取续滤液作为供试品溶液；另取马来酸氯苯那敏对照品，加氯仿制成1mL含马来酸氯苯那敏0.15mg的溶液（必要时滤过）作为对照品溶液；按照薄层色谱法（《中国药典》2010年版一部附录ⅥB）试验，吸取上述2种溶液各20μL点于同一硅胶G薄层板上，以甲醇－浓氨溶液（120∶1）为展开剂，展开后晾干，用碘蒸汽熏之，供试品溶液所显主斑点的颜色与位置应和对照品溶液所显主斑点相同［4，9］。同时进行阴性对照试验，在相应位置无斑点，阴性对照无干扰（见图4）。

图4 马来酸氯苯那敏的TLC图

3 含量测定

3.1 色谱条件

色谱柱：岛津 ODS柱（4.6mm×200mm ，5 μm）；流动相：甲醇－水－磷酸（47∶53∶0.2）；流速：1.0mL／min；检测波长：280nm［10］。

3.2 溶液的制备及测定

3.2.1 对照品溶液的制备 精密称取经干燥的黄芩苷对照品适量，加甲醇制成含黄芩苷60μg／mL的溶液，即得。

3.2.2 供试品溶液的制备 取本品10片，除去包衣并研细，取0.15g，精密称定后将其置于100mL量瓶中，加甲醇80mL，超声处理30min，待其冷却后加甲醇至刻度线，振摇均匀，过滤，将初滤液弃掉，取续滤液，即得［11，12］。

3.2.3 阴性样品溶液的制备 取缺黄芩的阴性样品0.15g，同法制成阴性样品溶液。

3.2.4 测定法 分别吸取供试品溶液、对照品溶液与阴性样品溶液各10μL，将其注入液相色谱仪，测定并记录色谱图［13］。理论板数按黄芩苷峰计算，应不低于3 000，黄芩苷峰与其他组分峰基线分离，R＞1.5，保留时间在31min左右，阴性溶液在黄芩苷峰相应位置上无吸收（见图5）。

图5 黄芩苷对照品溶液、供试品溶液、阴性样品溶液色谱图

3.3 标准曲线的制备

取黄芩苷对照品溶液（浓度0.068mg／mL）2 μL、5μL、10μL、15μL、20μL分别注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定，以进样量（μg）为X、积分面积值为Y，计算回归方程为Y＝1882509X－19677，r＝0.9998。

3.4 稳定性实验

取同一份对照品溶液，每隔2h进样测定一次，考查5次，结果峰面积变化不大，黄芩苷峰面积平均值为1328746，RSD为0.48%。

3.5 重复性试验

取同一批样品（批号：130601），平行试验6次，结果每片黄芩苷平均含量为20.3mg（50.75mg／g），RSD为1.9%。

3.6 精密度试验

取同一份供试品溶液，重复进样测定6次，结果黄芩苷面积平均值为1283664，RSD为0.76%。

3.7 加样回收试验

精密称取已知含量的供试品（批号：130601，含黄芩苷50.75mg／g）9份，置于100mL量瓶中，分别精准加入精密配制的黄芩苷（浓度为0.234mg／mL）8mL、8mL、8mL、10mL、10mL、10mL、12 mL、12mL、12mL，加甲醇溶解至刻度线，按本文试验方法测定其含量并计算回收率（见表1）。由表1可见，本方法具有较高的回收率，且测定方法可靠。

表1 黄芩苷回收率测定结果表（n＝9）

3.8 样品测定

取3个批次制备的康乐鼻炎片，按本文含量测定法测定每片样品中黄芪苷的含量（见表2）。

表2 三批样品含量测定结果表（n＝2）

4 讨论

由于市售康乐鼻炎片质量不稳定，且其处方中药味较多，化学成分复杂，给其药味的薄层鉴别带来了一定困难［14］。笔者通过预试验，选出白芷、薄荷、黄芩和马来酸氯苯那敏4味药，采用薄层色谱法对其进行定性鉴别，结果表明：此4味药材的薄层色谱鉴别方法重现性良好，可作为康乐鼻炎片的质量控制方法。由于其他药材有阴性干扰，还没有找到更好的分离方法，本次研究只选择上述4味药材作为定性鉴别的依据。

黄芩作为中医常用的药物之一，具有清热燥湿、泻火解毒、止血和安胎之功效，临床上单用或与其他中药配伍主要用于治疗呼吸道感染、急性菌痢、病毒性肝炎、过敏性疾病和妇科疾病等。黄芩苷作为黄芩发挥功效的主要活性成分之一，具有抗病毒细菌、抗炎、抗氧化、抗肿瘤、保护心脑血管、保肝等作用［15］。笔者建立了黄芩苷含量测定的高效液相色谱法，对3批制备的康乐鼻炎片中黄芩苷含量进行测定，结果提示其含量稳定，平均值为20.3mg／片，高于《中国药典》2010年版一部“黄芩”［2］项下规定：黄芩药材按干燥品计算，含黄芩苷（C21H18O11）不得少于9.0%。以转移率80%计，康乐鼻炎片中黄芩苷含量应不少于17.6mg／片。结果表明：该方法操作简单、准确度高、重现性好，能有效控制康乐鼻炎片的质量，以确保临床合理安全用药。

［1］国家卫生部.中华人民共和国卫生部药品标准［S］.第十二册，标准号 WS3－B－2423－97.

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