黄芩苷减轻奥沙利铂导致热痛觉过敏的脊髓机制

宋超 赵静 嵇绍干

目前, 奥沙利铂仍是推荐应用的一线胃肠道肿瘤化疗药物, 但是, 奥沙利铂可导致严重的外周神经病变和痛觉过敏现象, 在很大程度上限制了铂类化疗药的应用［1］。遗憾的是,目前镇痛药物并不能有效缓解化疗药物导致的疼痛性神经病变［2］。本文旨在寻找能安全有效缓解化疗后疼痛的药物。在前期筛选中, 作者发现传统中药黄芩的活性提取物黄芩苷可能有效。黄芩苷具有抗炎、抗氧化、镇静以及抗脑损伤等多种有益的作用［3,4］, 并且还能显著缓解神经损伤导致的难治性神经病理性疼痛［5］。黄芩苷能否缓解奥沙利铂导致的痛觉过敏？将在下文中详细探讨。

1 材料与方法

1.1 材料 成年健康雄性SD大鼠(徐州医学院动物实验中心), 体重180～220 g, 清洁级, 12 h明暗交替饲养, 自由进食进水。在进行实验前, 至少适应环境和实验条件1周。

1.2 实验试剂和仪器来源 奥沙利铂购自南京制药厂有限公司(批号20100703)；黄芩苷, 纯度95%, 购自南京泽朗植提技术有限公司；7-NI购自美国sigma公司；热敏测痛仪购自美国harvard公司。

1.3 奥沙利铂诱导的疼痛模型建立 参考国外学者的实验方法［6］, 奥沙利铂溶解于5%的葡萄糖水中, 现用现配。给大鼠奥沙利铂4 mg·kg-1腹腔注射, 每周连续注射2 d, 间隔5 d, 共3个周期。建立化疗药物诱导的疼痛模型。将实验动物随机分为四组, 模型对照组(奥沙利铂, 腹腔注射4.0 mg·kg-1), 黄芩苷治疗组(在注射奥沙利铂前, 鞘内注射黄芩苷 40 μg ·10 μl-1), 7-NI治疗组 (在注射奥沙利铂前 , 鞘内注射7-NI 40 μg·10 μl-1)和空白对照组(仅接受与注射奥沙利铂同等体积的5%葡萄糖水)。

1.4 热痛觉过敏测定 按照文献方法测定各组大鼠热刺激缩足反射阈值 (thermal withdrawal threshold, TWT)［7］。各组大鼠在接受奥沙利铂和/或黄芪苷等处理后的第7、14、21天时, 用热敏仪刺激大鼠后足, 记录后足抬起时的读数值,每只大鼠接受刺激5次, 每次间隔>10 min, 记录后4次测定的平均值。

1.5 统计学方法 利用SPSS15.0软件进行统计分析, 计量资料以均数±标准差(±s)表示, 采用t检验, 组间差异比较采用单因素方差分析。检验水准取α=0.05。P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 黄芩苷可以模拟nNOS抑制剂7-NI的作用 显著减轻奥沙利铂诱导的热痛觉过敏行为学显示, 与注射奥沙利铂之前相比, 奥沙利铂注射后第7、14、21天, 大鼠对于热刺激缩足的反应阈值显著缩短(P<0.01), 说明长期应用奥沙利铂,可以诱发大鼠热痛觉过敏的现象。黄芩苷治疗组与相应天数的模型对照组比较, 热痛觉过敏的现象显著减轻(P<0.01或P<0.05), 并且与7-NI的治疗作用相类似, 见表1。

表1 各组大鼠热刺激缩足反射阈值比较( ±s)

表1 各组大鼠热刺激缩足反射阈值比较( ±s)

注：a与自身基础值比较, P< 0.01, b与模型对照组比较, P< 0.05, c与模型对照组比较, P< 0.01

基础值 第7天 第14天 第21天空白对照组 12.61±2.41 12.42±1.85 11.54±2.64 11.60±1.47模型对照组 11.82±2.25 7.46±3.11a 5.74±2.11a 5.21±1.26a黄芩苷治疗组 12.24±2.97 9.41±1.32b 8.79±3.11c 7.12±1.14c 7-NI治疗组 11.94±1.46 9.22±2.54b 8.43±2.13c 7.45±0.89c

3 讨论

铂类化疗药物导致痛觉过敏的现象是其临床常见的副作用之一, 患者通常痛苦不堪。本文发现, 黄芩苷能够抑制奥沙利铂导致的热痛觉过敏, 提示黄芪苷可能对于奥沙利铂导致的CIPN具有很好的治疗作用。作者仍想知道的是黄芩苷抑制奥沙利铂导致的热学痛觉过敏的机制。

研究发现, 化疗药物导致脊髓水平一氧化氮水平升高,nNOS和cGMP蛋白水平升高, 可能是导致痛觉过敏产生的重要因素［8］, 并且在疼痛信号的初级整合中心——脊髓部位给予nNOS的抑制剂7-NI, 可以减轻长春新碱诱导的外周神经疼痛的症状［9］。这说明, 脊髓NO可能促进了化疗药物神经病理性疼痛的产生。本文发现, 黄芩苷可模拟7-NI的作用,抑制奥沙利铂导致的热痛觉过敏。这说明, 黄芩苷可能通过抑制脊髓NO的合成从而减轻了CIPN的程度。鉴于黄芩苷的安全性和有效性, 这一研究成果可能对于临床缓解铂类化疗使用患者的痛苦具有一定的临床实用价值。

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