精浆中性α—葡萄糖苷酶测定在男性不育症诊断中的应用
2014-05-30褚超
褚超
【摘要】 目的 探讨中性α-1,4葡萄糖苷酶在精浆中的活力水平及与男性不育症的关系。方法 采用以对硝基酚α-D吡喃葡萄糖苷(PNPG)为底物的酶分光光度法。结果 本文测定了315例正常及不育男性精浆中的α-葡萄糖苷酶活性。正常对照组、不育Ⅰ组、不育Ⅱ组、少精症组、及无精子症组,各不育组与正常对照组间均差异显著(P<0.05)。结论 男性不育患者的中性α-葡萄糖苷酶活力明顯低于正常生育组。附睾上皮功能不全是男性不育的重要原因之一。
【关键词】 中性α-糖苷酶;精浆;男性不育
文章编号:1004-7484(2014)-06-3200-01
附睾是精子运输、储存和成熟的场所,它在男性生殖活动中具有重要作用[1]。精浆α-葡萄精苷酶大部份来源于附睾,是附睾功能的特异性酶及标志酶[2]。中性α-葡萄糖苷酶的活力在一定程度上可反映附睾的功能状态。
1 资料与方法
1.1 研究对象
1.1.1 正常对照组44例,年龄23-35周岁。
1.1.2 不育Ⅰ组(精子计数>60×109/L)124例,年龄25-41周岁。
1.1.3 不育Ⅱ组(精子计数>20×109/L)87例,年龄24-40周岁。
1.1.4 少精症组(精子计数<20×109/L)31例,年龄25-40周岁。
1.1.5 无精症组29例,年龄26-40周岁。
1.2 样品采集与处理 禁欲3-5天的受试者,用手淫法收集一次射出的全部精液,液化后按照WHO(1987年)精液检查手册描述的方法进行精液常规检查后,精液经2000r/min离心10min,取上清液(精浆)用作酶活力测定。
1.3 试剂与方法
1.3.1 仪器 美国产DRG-3000型酶标仪。
1.3.2 试剂 由上海科华生物工程有限公司提供。
1.3.3 方法 按照Cooper等建立的方法以对硝基吡喃葡萄糖苷(PNPG.Sigma)作为底物,在精浆中性α-葡萄糖苷酶作用下水解释放出对硝基酚(PNP),反应温度37℃,反应体系0.22ml,PH6.8,准确保温4h后以终止液0.22ml终止反应。在DRG-3000型酶标仪上,405nm处测定PNP的吸光度值,并按照标准曲线换算成酶活性,结果以U/L及U/一次射精表示。
2 结 果
精液常规分析:正常对照组与不育Ⅰ组、Ⅱ组及少精症组的精子密度、存活率、活动度结果,见表1。
精浆中性α-葡萄糖苷酶的活力水平:正常对照组与不育Ⅰ组、Ⅱ组、少精症组及无精症组的结果见附表。各不育组与对照组间均差异显著(P<0.05)。
3 讨 论
α-葡萄糖苷酶又称麦芽糖酶,它能够水解多糖和寡糖上的葡萄糖残基,在精子的成熟、获能以及受精过程中具有重要的作用[1]。精浆α-葡萄糖苷酶主要来源于附睾上皮细胞的分泌,因而测定精浆α-葡萄糖苷酶活性一定程度上反映了附睾的功能状态。
α-葡萄糖苷酶由附睾分泌但并非与精子同源。有人推测是因为中性α-葡萄糖苷酶可能与淀粉糖苷酶(amylo-glu cosidase)协同作用催化精子的糖元降解,供给精子代谢与运动的能源[3]。也有人推测这种相关性可能是由于睾丸生精过程与该酶活力水平都受到雄性激素调节所致,因此酶的活力对精子的代谢与功能有重要意义。
α-葡萄糖苷酶作为附睾的功能性指标,在男性学上有它的应用价值。
参考文献
[1] 姜永光,熊旭林,鲁功成,等.精索静脉曲张不育患者精浆α-糖苷酶的检测及其意义.临床泌尿外科杂志,1995,10(1).
[2] 谷翊群,陈振文,梁晓薇,等.改良精浆中性α-糖苷酶测定法的效果观察.生殖医学杂志,1992,1(2).
[3] 吴明章,潘碧霞,董赛珍,等.精浆肉毒碱和α-糖苷酶的测定在男性学中的应用.生殖与避孕,1989,9(3).