改良生活饮用水菌落总数测定方法

【摘 要】 目的：改进生活饮用水中菌落总数测定方法；方法：在营养琼脂中加入一定量的TTC按GB/T5750-2006生活饮用水标准检验方法微生物指标菌落总数平皿计数法进行检测；结果：同一样品利用该法与国标法检测生活饮用水中菌落总数经统计学检验无显著性差异；结论：TTC琼脂平板计数结果准确，对有杂质水样具有较高的灵敏性，受干扰少值得推广。

【关键词】 TTC琼脂平板 菌落总数

【Abstract】 Objective： To improve determination of total bacterial count in drinking water； methods： adding a certain amount of the nutrient agar TTC by GB/T5750-2006 drinking water standard test methods Microbiological Total plate count of colonies were detected； result： same sample using this method with the national drinking water standard method to detect the total number of colonies no statistically significant difference test； Conclusion： TTC agar plate count results are accurate， there are impurities in water samples to have a high sensitivity， interference less worthy of promotion.

【keywords】 TTC agar plates ； Total number of colonies

【中图分类号】 R155.5 【文献标识码】 A 【文章编号】 1671-8801（2014）09-0317-01

生活饮用水的卫生和安全关系到每个人的身体健康，一直备受各国政府和公众的高度重视，水中菌落总数超标对人体健康危害极大。目前国标方法在菌落总数计数过程中部分菌落细小或生长于琼脂内部的菌落，由于颜色与营养琼脂较相近，须借助放大镜计数，这给大量计数工作带来不便，同时有杂质水样中的沉渣给菌落鉴别造成一定的困难。本方法加入TTC能够被细菌还原成红色物质，因此添加到培养基中，可以使菌落成红色，便于观测和计数，很好地解决上述问题，现将实验结果报告如下：

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 仪器：同GB/T5750.12-2006中1.1.4

1.1.2 试剂：

1.1.2.1 营养琼脂

1.1.2.2 0.003%TTC琼脂：在100mL營养琼脂中加入0.3%的TTC溶液1mL，121℃15分钟高压灭菌。

1.2 方法

平板计数法按国标GB/T5750.12-2006检验，TTC法直接使用0.003%TTC琼脂按国标GB/T5750.12-2006检验。

2 结果与讨论

2.1 加入TTC后对结果的影响

TTC（氯化三苯基四氮唑）溶于水中成为无色溶液，但经过细菌胞氢酶还原后即生成红色的三苯基甲腙，该物质比较稳定，不会被空气中的氧自动氧化，但TTC在一定浓度下对细菌也有抑制作用，经实验证明TTC浓度在0.001%-0.01%浓度中基本无抑制现象，本实验采用0.003%TTC营养琼脂。

2.2 样品检测结果比较

用平板计数国标法与TTC琼脂平板法同时对10份样品按试验方法进行菌落总数检测，检测结果见表1

从表1可以看出，用TTC法结果和国标法对水中菌落总数的检测结果基本一致，该两种方法的检测结果经统计学处理t=0.109，t0.05（18）=2.101，t0.05（18）>t两种方法无显著性差异.

2.3 对细小可疑菌落的鉴定

在10份样品同时用两种方法计数的培养皿中，挑取细小可疑的菌落，点种在血平板上，观察其生长数.结果在营养琼脂平板上挑取200个，TTC琼脂平板中挑取100个无色可疑菌落，其生长数分别为143和8个，分别占71%和8%，在前者培养基中有67个不生长占29%，可见营养琼脂平板法至少有近30%的误判率，两者相差明显.

3 结论

本文通过TTC营养琼脂改良法与国标法对生活饮用水中菌落总数的测定比较，证实TTC改良法使得经培养的菌落呈红色，便于识别杂质，从而提高了检测结果的准确性和可靠性，特别是检测临近标准界限值的样品，该法由于错判率低对样品的检测更有意义。

参考文献

[1]GB/T5750-2006 生活饮用水标准检验方法

[2]化妆品卫生规范 中华人民共和国卫生部2007年1月262-264页。

作者简介：张振春，男，1969年12月，辽宁沈阳人，毕业于辽宁医学院，工作单位。沈阳市康平县疾病预防控制中心