奋乃静片含量测定方法的比较

董 煜

(大连市食品药品检验所，辽宁 大连 116021)

奋乃静片含量测定方法的比较

董 煜

(大连市食品药品检验所，辽宁 大连 116021)

目的用高效液相色谱法测定奋乃静片的含量及有关物质。方法用Tigerkin ODS-3C18色谱柱（4.6 mm×150 mm，5 μm），缓冲液（取冰醋酸28.6 mL，置100 mL量瓶中，在搅拌下加入三乙胺34.8 mL，继续搅拌约5 min，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取该溶液10 mL，置1000 mL量瓶中，加水稀释至刻度）-乙腈-甲醇（52∶40∶8）为流动相，流速：1.0mL/min，检测波长：254 nm，柱温：40 ℃，进样量：10 μL。结果含量测定方法在10.12～30.36μg/mL范围内，r=0.9999，平均回收率为99.92%。结论本方法简便，专属性强、准确可靠，适合于奋乃静片的质量控制。

HPLC；奋乃静；含量；有关物质

奋乃静又名羟哌氯丙嗪，为抗精神病用药。临床上用于精神分裂或其他精神病性障碍。此品种收载于中国药典2010版[1]，其含量测定方法是UV法，有很多文献报道采用HPLC法测定含量[2,3]。本文采用与其不同的色谱条件，用HPLC法和UV法，对奋乃静片含量测定方法进行比较。

1 仪器与试药

1.1 仪器

Waters2695/2996高效液相色谱仪（紫外检测器）。

1.2 试药

甲醇、乙腈均为色谱纯，其他试剂均为分析纯。奋乃静对照品（批号100133-200602，中检所）；供试品（批号A1、A2，规格为2 mg；B1、B2，规格为4 mg，共4批；市售）。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

高效液相色谱柱为Alltima C18（4.6 mm×150 mm，5 μm），流动相：缓冲液（取冰醋酸28.6 mL，置100 mL量瓶中，在搅拌下加入三乙胺34.8 mL，继续搅拌约5 min，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取该溶液10 mL，置1000 mL量瓶中，加水稀释至刻度）-乙腈-甲醇（52∶40∶8）；检测波长：254 nm[1]。流速：1.0 mL/min；柱温：40 ℃。进样量：10 μL。奋乃静的保留时间约为8 min，奋乃静及其他有关物质峰的分离度符合要求，理论板数按奋乃静计为2500。

2.2 线性关系

对照品溶液 取奋乃静对照品10.12 mg，精密称定，置50 mL量瓶中，加甲醇适量，振摇使溶解，并稀释至刻度，摇匀，分别精密量取2.5、4、5、6及7.5 mL置50 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度摇匀，进样10 μL(n=3)，记录色谱图，以浓度X为横坐标，峰面积Y为纵坐标，计算线性回归方程：Y=58587 X-11208，r=0.9999。结果表明：奋乃静在10.12～30.36 μg/mL浓度范围内呈良好的线性关系。

2.3 方法专属性研究

取奋乃静对照品10 mg，分别置10 mL具塞刻度试管中，进行如下处理：①加1 mol/L盐酸1 mL，100 ℃加热2 h；②加1 mol/L氢氧化钠溶液1 mL，105 ℃加热2 h；③加10%过氧化氢溶液1 mL，放1.5 h；④光照破坏（4500lx，2 d）；⑤高温破坏（100 ℃，43 h），然后调pH至中性，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液按“2.1”项下色谱条件测定，记录色谱图，结果表明降解产物与主成分能有效分离。

2.4 加样回收率试验

精密吸取已知含量的样品（201.7 μg/mL）（批号：A1）2.5 mL共9份，分别置50 mL量瓶中，分别精密加入奋乃静对照品溶液（202.4μg/mL）2、2.5、3 mL，加甲醇稀释至刻度，摇匀，相当于80%，100%，120%浓度的供试品溶液，按“2.1”项下色谱条件测定，计算加样回收率，结果见表1，平均回收率（n=3）以%表示，测定低、中、高3种浓度的回收率，结果分别为99.30%(RSD=0.53%)，99.88%(RSD=0.21)，99.47%(RSD=0.45%)平均回收率(n=9)为99.6%，RSD=0.3%。

2.5 稳定性实验

取供试品溶液（批号A1），室温放置，0、4、8、12、24 h后进样测定，面积基本不变，结果表明：该溶液稳定性良好，能满足测定要求。

2.6 精密度试验

取含量测定项下供试品溶液（批号A1），连续6次进样测定，其RSD为0.9%。

2.7 含量测定

①HPLC法：避光操作。取本品20片，除去包衣后，精密称定，研细，精密称取细粉（约相当于奋乃静10 mg），置50 mL量瓶中，加甲醇适量，超声10 min使溶解，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5 mL，置50 mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，为供试品溶液；分别取供试品溶液和线性关系项下的对照品溶液各10 μL注入液相色谱仪，按“2.1”项下色谱条件测定，记录色谱图，按外标法计算，测定结果与UV法[1]比较，见表1。②按文献[1]的方法测定含量结果，见表1。

表1 样品测定结果 （%）（n=3）

3 讨 论

3.1 流动相的选则

①以甲醇-水（50∶50）为流动相，不论如何调比例，主峰与杂质峰分不开；②以甲醇-水-8.5%磷酸（50∶50∶0.15）为流动相，主峰与杂质峰仍分不开；③以0.05 mol/L磷酸氢二钠溶液[用磷酸（1→5）溶液调pH至5.2]-甲醇（40∶60）为流动相，主峰出峰时间太快；④以缓冲液（取冰醋酸28.6 mL，置100 mL量瓶中，在搅拌下加入三乙胺34.8 mL，继续搅拌约5 min，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取该溶液10 mL，置1000 mL量瓶中，加水稀释至刻度）-乙腈-甲醇（52∶40∶8）为流动相，出峰时间恰好且主峰与杂质能达到很好分离，理论板数及分离度均能达到规定。

3.2 从表1可以看出，紫外法测定含量的数据高于HPLC法的测定的数据，其原因有可能是其他物质在此波长也有吸收，吸光度产生叠加从而使主药的吸光度偏高。本实验建立的HPLC测定方法，经专属性试验考察，主峰均能与其他降解物很好的分离；HPLC测定含量排除了杂质的干扰，专属性更强，比紫外专属性更强，比紫外法更准确，而且简便。可用于奋乃静片的质量控制。

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(二部)[M].2010年版.北京:中国医药科技出版社,2010:452.

[2] 胡丹,吕长淮,吴玮,等.RP-HPLC法测定奋乃静片的含量[J].安徽医药,2012,16(4):467-469.

[3] 吴珺.HPLC法测定奋乃静片的含量和有关物质[J].中国药品标准,2010(6):458-460.

R9

B

1671-8194（2014）23-0078-02