补充脱氧核苷酸对12岁以下反复呼吸道感染儿童的多中心、前瞻性、随机开放性对照临床研究

董 李李玉欢朱雪云李玉森

（1 福州市儿童医院，福建 福州 350000；2 海南省人民医院，海南 海口 570100；3 海南省儿童医院，海南 海口 570100）

补充脱氧核苷酸对12岁以下反复呼吸道感染儿童的多中心、前瞻性、随机开放性对照临床研究

董 李1李玉欢2朱雪云2李玉森3

（1 福州市儿童医院，福建 福州 350000；2 海南省人民医院，海南 海口 570100；3 海南省儿童医院，海南 海口 570100）

目的评价12岁以下的反复呼吸道感染儿童补充脱氧核苷酸后的有效性及安全性。方法采用前瞻性、多中心、随机开放性对照研究方法，入组反复呼吸道感染患者儿童72对，试验组采用脱氧核苷酸钠注射液[发作期10 mg/（kg·d）静脉滴注，同时给予抗感染药物，祛痰、镇咳药物]，稳定期每周肌内注射或静脉滴注10毫克/（千克·周），连续应用12个月，近期随访7～14 d评价疗效，远期则随访1年以上评价患儿预后情况及发生的不良事件。结果近期研究结果显示，试验组急性症状持续时间(5.24±1.45)vs(7.21±1.73)，抗感染药物使用时间(4.57±1.28)vs(6.23±1.19)，住院时间(4.69±1.21)vs(6.43±1.35)，完全好转时间(7.14±1.28)vs(9.41±1.43)均短于对照组（P＜0.05），可能与脱氧核苷酸提高CD3+(58.9±9.8）vs（52.8±7.01)，(47.9±6.7) vs（36.8±6.8)水平有关，另外试验组近期有效率痊愈率高于对照组(29.2%vs18.0%)。长期应用，脱氧核苷酸可减少平均急性发作次数(2.4±0.4)vs(4.9±2.1)。脱氧核苷酸不良反应为轻微发热，发生率22.2%。结论对于反复呼吸道感染患儿，补充脱氧核苷酸急性期可显著缩短患儿病程，稳定期可减少反复发作次数。

反复呼吸道感染；脱氧核苷酸；临床研究

文献报道，微生物进入机体的主要途径是通过上皮表面和黏膜，超过50%的淋巴组织分布上皮和黏膜，即黏膜相关淋巴组织、免疫细胞如T细胞群、NK细胞群和吞噬细胞群，均能阻止病原微生物的入侵，并促进一系列免疫细胞因子的释放，减少细菌或病毒的再次感染[1]。本研究采用的脱氧核苷酸钠注射液可以通过促进淋巴细胞的增殖，为T淋巴细胞的合成提供原料，同时促进DNA转录，促进机体血清蛋白质的合成，一方面促进损伤细胞的修复，另一方面可以增加患者的抗体水平[2]，但是目前关于脱氧核苷酸是否能够在反复呼吸道感染患儿的远期指标中得到获益，获益指标主要是什么目前尚不清楚，本研究开展此项前瞻性的随机对照试验，试图探究脱氧核苷酸钠在反复的呼吸道感染患儿的临床价值及安全性。

1 对象与方法

1.1 研究对象

入选标准：6个月～12岁，性别不限；符合反复性呼吸道感染诊断标准参照诊断标准。根据全国1987年成都小儿呼吸道疾病会议制定的标准[3]：①0～2岁小儿每年上呼吸道感染7次，下呼吸道感染3次；②3～5岁小儿每年上呼吸道感染6次，下呼吸道感染2次；③6～14岁小儿，每年上呼吸道感染5次，下呼吸道感染2次（两次上呼吸道感染间距时间应＞7 d，若上呼吸道感染次数不够，可加上下呼吸道感染次数）；④依从性好，能坚持采用脱氧核苷酸注射液治疗次数至少8次/年。排除标准：先天性呼吸道畸形病变；入选前曾应用激素超过1个月；入选前1个月内服用免疫激活剂（如胸腺肽制剂、微量元素制剂、泛福舒等）或免疫抑制剂（如环磷酰胺、环孢素等）；治疗过程中，对照组服用了与试验组不一样的药品。或两组服用过其他药品，研究者认为其可能会影响试验药物的疗效评价；患儿有较为严重的心（心功能分四级，属3～4级者）、肝（ALT及AST超过正常值上限2倍）、肾疾病，或合并有白血病、淋巴瘤等；精神疾病患者或智力障碍患者；患者2个月内参与了其他项目的研究；合并有其他疾病的患儿，研究者认为其可能会影响到药物的效果评价。

1.2 治疗方法

纳入3个研究中心的144例6个月～12岁患儿，随机分为两组，试验组72例，对照组72例，两组患儿急性期均给予抗感染、化痰、镇咳等基础治疗，试验组急性期同时给予脱氧核苷酸注射液，溶于100 mL 0.9%NS，静脉滴注，10 mg/kg，1次/天。稳定期给予脱氧核苷酸注射液，溶于100 mL 0.9%NS，静脉滴注，10 mg/kg，1次/周。对照组急性期给予生理盐水滴注，稳定期不给予任何药物，连续应用12个月。

1.3 评价指标

近期随访14 d，观察患儿症状持续时间，包括发热、咳嗽、咯痰持续时间、抗生素或抗病毒药使用天数、住院天数。同时在治疗前及治疗后3 d进行症状、体征评分。①咳嗽：0分，无；1分，轻度咳嗽，不影响用餐、玩耍；2分，中度咳嗽，部分影响用餐、玩耍；3分重度咳嗽，患儿无法用餐、玩耍；②咳痰：0分，无；1分，很容易；2分，能咳出，但需要过程；3分较难咳出；③啰音：0分，无；1分，少量啰音；2分，中等量啰音；3分，大量啰音；④疼痛：0分，无；1分，轻度疼痛、咽干；2分，中度疼痛、咽干；3分，重度疼痛、咽干；⑤鼻塞流涕：0分，无；1分，轻度，有堵塞感，声重偶有流涕；2分，中度，鼻塞时有时无，时流清涕；3分，重度，鼻塞持续不解，持续流涕；⑥头痛：0分，无；1分，轻微头痛；2分，中度头痛，烦躁，时流清涕；3分，重度头痛不能坚持。根据病情程度：轻度0～6分，中度6～12分，重度12～18分，疗效评价标准采用积分评价，痊愈：治疗前积分-治疗后积分/治疗前积分≥90%；显效：治疗前积分-治疗后积分/治疗前积分≥70%，＜90%；有效：治疗前积分-治疗后积分/治疗前积分≥30%，＜70%；无效：治疗前积分-治疗后积分/治疗前积分＜30%。同时于治疗前后检测患者的细胞免疫（T细胞）及体液免疫功能（抗体水平）。远期随访12个月，观察年发病次数，平均呼吸道感染间隔时间。

1.4 评价指标

统计分析拟采用SAS统计分析软件包进行分析。检验水准取0.05，即P＜0.05将被认为所检验的差别有统计意义。不同治疗组的计量资料将采用均数±标准差进行统计描述，与入组时的基础值进行比较，采用配对t检验比较组内前后差异。两组治疗前后的变化采用方差分析（ANOVA）和Wilcoxon秩和检验进行比较。不同治疗组的计数资料采用频数（构成比）进行统计描述。两组治疗前后的变化采用χ2检验或非参数检验。安全性分析：采用χ2检验或Fisher确切概率法等比较两组不良事件发生率，并列表描述本次试验所发生的不良事件；实验室检验结果在试验前后正常/异常的变化情况以及发生异常改变时与试验药物的关系。

2 结 果

2.1 临床基线

试验组脱落17例，对照组脱落13例，均为失访人群。两组患者年龄、性别构成、病情严重程度均无明显统计学差异（P>0.05）。两组病例基本情况比较见表1。

表1 两组病例基本情况比较

2.2 近期症状持续时间

试验组急性症状持续时间(5.24±1.45) vs （7.21±1.73)，抗感染药物使用时间(4.57±1.28) vs （6.23±1.19)，住院时间(4.69±1.21) vs（6.43±1.35)，完全好转时间(7.14±1.28) vs （9.41±1.43)均短于对照组，并具有明显的统计学差异（P＜0.05）。见表2。

表2 两组病例近期症状持续时间比较

2.3 近期有效率

试验组痊愈率高于对照组(29.2% vs 18.0%)，并具有统计学差异（P＜0.05），显效率(47.2% vs 50.0%)、有效率（13.8% vs 15.2%），两组比较均无明显统计学差异（P>0.05）。见表3。

表3 两组病例近期有效率比较

2.4 免疫功能

表4 两组病例免疫功能比较

2.5 远期疗效

试验组年平均急性发作次数(2.4±0.4) vs (4.9±2.1)，年平均抗生素使用天数(11.9±4.2) vs (32.9±9.4)，年平均住院时间(14.8±8.2) vs (15.6±11.2)两组比较均无明显统计学差异（P＜0.05），年平均感染间隔时间显著长于对照组（152.8±32.8） vs (78.6±28.2），并具有统计学差异（P＜0.05）。见表5。

表5 两组病例远期疗效比较

2.6 不良事件

试验组因注射脱氧核苷酸发热患儿16例，占22.2%，对照组无因注射药物所致的发热事件。发热一般均为低热，均低于38 ℃，无1例采用非甾体抗炎药物处理。另外试验组有1例患儿发生轻微皮疹。其余未见其他明显不良事件发生。且患儿随着注射事件延迟，发热的患儿一般在第3、4次注射，即未见发热不良事件。

3 讨 论

脱氧核苷酸钠注射液是以生物技术提取的脱氧核糖核酸为原料，经多种生物酶作用形成，富含腺嘌呤核苷酸、鸟嘌呤核苷酸、胞嘧啶核苷酸、胸腺嘧啶核苷酸等4种核苷酸成分，参与体内核酸代谢过程，具有促进DNA合成，促进受损肝细胞再生、改善肝功能，调节机体免疫力等药理作用，已成为核酸代谢疗法的临床代表用药。核酸是生命的本源，是一切生物细胞的基本成分或核心物质，也是调节生命现象的重要物质，它控制着蛋白质的合成，因此当机体核苷酸不足，将影响蛋白质的合成，从而会使细胞分裂缓慢，细胞缺陷[4]。细胞分裂减慢导致人体衰老出现功能性退化等疾病，而细胞缺陷则会引起机体损伤、病变，甚至死亡[5]。基础研究显示，脱氧核苷酸钠主要具有以下药理作用[6]：①增加机体蛋白质的合成，促进细胞修复，尤其是对肝细胞或炎症损伤型细胞的修复，增加细胞的DNA合成，RNA转录，促进细胞膜的再生成，对于溃疡性损伤，神经细胞的修复、退行性疾病的预防有较好临床疗效[7]。②激活人体的免疫功能[2]，将脱氧核苷酸钠注射液腹腔注射100 mg/d于beagle犬，连续注射7 d，结果显示犬血清的，细胞较注射前有显著增加，另外IgM，IgG水平亦有明显的增高。Caramori[8]通过活检7岁以下的患儿气道黏膜，显示患儿的呼吸道黏膜中免疫细胞水平、抗体水平均显著低于正常儿童，然而，血检结果显示免疫细胞水平却并不低于正常患儿，上述研究，在临床非常常见，因此常常患儿的免疫功能低下常常受到忽略。本研究采用的脱氧核苷酸钠注射液可以通过促进淋巴细胞的增殖，为T淋巴细胞的合成提供原料，同时促进DNA转录，促进机体血清蛋白质的合成，一方面促进损伤细胞的修复，另一方面可以增加患者的抗体水平。抵抗微生物的入侵，因此具有减少反复呼吸道感染发作的作用。本研究采用DNA治疗后，急性期可缩短发热、咳嗽、咯痰症状持续时间明显缩短，住院时间进一步缩短。稳定期可减少感染发作次数，应用过程未见明显不良事件。因此临床上补充脱氧核苷酸对免疫功能下降的患儿具有较高的临床价值，且安全性较高，可以作为预防儿童反复发作的常规的药物。

[1] Gold PM.The 2007 GOLD Guidelines: a comprehensive care framework[J].Respir Care,2009,54(8):1040-1049.

[2] Leff RD.A review of the GOLD guidelines for the diagnosis and treatment of patients with COPD[J].Int J Clin Pract,2008,62(8): 1219-1236.

[3] 何威,周佩军,沈周俊.新型的免疫佐剂:CpG寡聚脱氧核苷酸[J].中国临床医学,2008,5(13):42-46.

[4] Swigris JJ,Brown KK,Behr J,et al.The SF-36 and SGRQ: validity and first look at minimum important differences in IPF[J].Respir Med,2010,104(2):296-304.

[5] Quint JK,Donaldson GC,Kumari M,et al.SERPINA1 11478G→A variant,serum α 1antitrypsin,exacerbation frequency and FEV1decline in COPD[J].Thorax,2011,66(5):418-424.

[6] Agustí A,MacNee W,Donaldson K,et al.Hypothesis: Does COPD have an autoimmune component?[J].Thorax,2003,58(10):832-834.

[7] Pilette C,Durham SR,Vaerman JR,el al.Mucosal immunity in asthma and chronic obstructive pulmonary disease:a role for immunoglobulin A?[J].Proc Am Thorac Soc,2004,1(2):125-135.

[8] Caramori G,Adcock IM,Casolari P,et al.Unbalanced oxidantinduced DNA damage and repair in COPD: a link towards lung cancer[J].Thorax,2011,66(6):521-527.

Sodium Deoxyribonucleotide Intervention in Repeated Respiratory Infection of Children under 12——A Multi-centric, Randomized Clinical Trial

DONG Li1, LI Yu-huan2, ZHU Xue-yun2, LI Yu-sen3
(1 Fuzhou Children's Hospital, Fuzhou 350000, China; 2 Hainan Provincial People's Hospital, Haikou 570100, Chian; 3 Children's Hospital of Hainan Province, Haikou 570100, China)

ObjectiveTo evaluate the efficacy and safety of deoxyribonucleotide in intervention with repeated respiratory infection of children under 12.MethodsA prospective, multicenter, randomized open-control study was conducted. 144 patients with repeated respiratory infection were included. The experiment group (n=72) were received conventional therapy and deoxyribonucleotide 10 mg/(kg·d) in acute period, and weekly 10 mg/kg for 12 months. The control group (n=72) were received conventional therapy only.ResultsTimes of duration of symptoms(5.24±1.45)vs(7.21±1.73), hospital time (4.69±1.21)vs(6.43±1.35), antibiotic application time(4.57±1.28)vs(6.23±1.19) were shorter than the control group. And it may be related with that the deoxyribonucleotide improve the immune function. And the recovery rate of the experiment group was superior to the control group (29.2% vs 18.0%). There is no obvious adverse effect in the course of treatment.Deoxyribonucleotide can decrease acute attack times (2.4±0.4)vs(4.9±2.1), when long-time application.ConclusionFor children with recurrent respiratory tract infection, acute phase complementary deoxynucleotide children can significantly shorten the course, stable can reduce recurrent episodes.

Recurrent respiratory tract infections; Deoxynucleotides; Clinical research

R725.6

B

1671-8194（2014）23-0060-03