肝素化血浆标本对偶氮砷Ⅲ法血钙测定结果的影响分析

叶章发　张超

【摘要】 目的 观察分析肝素化血浆标本进行偶氮砷Ⅲ法血钙测定时， 对实验检测结果有无影响。方法 采集血液标本， 分别使用肝素化血浆和血清标本， 进行偶氮砷Ⅲ法血钙测定， 两组检测数据结果进行统计学分析。 结果 肝素化血浆血钙测定结果：2.71 mmol/L， 血清血钙测定结果：2.31 mmol/L。 统计学分析显示：两组数据差异具有统计学意义。结论 肝素化血浆标本对偶氮胂Ⅲ法血钙测定结果具有严重影响， 不宜使用肝素化血浆标本进行偶氮砷Ⅲ法血钙测定。

【关键词】 肝素化血浆；偶氮砷Ⅲ法；血钙测定

在临床实验室质量管理中， 分析前质量保证有重要意义， 不同标本处理方式， 可能影响实验结果。作者观察分析肝素化血浆和血清标本， 使用偶氮砷Ⅲ法测定血钙的结果， 现报告如下。

1 材料与方法

1. 1 一般资料 门诊、住院患者随机血液标本105例（剔除严重脂血、溶血及黄疸标本）， 年龄1.0～78.0岁， 其中男50例， 女55例。

1. 2 仪器 OLYMPUS AU-2700全自动生化分析仪。

1. 3 试剂及相关用品 江苏康健医疗用品有限公司提供一次性真空采血管（肝素管、普通管）， 其中肝素管（肝素钠）每支抗凝血液5.00 ml。

RANDOX （Human-Sera分析用人血清基质）定值冻干质量控制血清。

偶氮砷Ⅲ法血钙测定试剂盒（国内某品牌），试剂主要成分：偶氮砷Ⅲ（ARSENAZO Ⅲ）：0.20 mmol/L； 咪唑： 75 mmol/L。

1. 4 实验方法 采集患者清晨空腹静脉血液， 分别注入一次性真空采血管肝素管（5.00 ml）和普通管（3.00～5.00 ml）中， 待普通管血液收缩后， 再一起进行标本离心处理。于此同时， 将5支同一批号的定值冻干质控血清严格按照使用说明进行充分溶解、混匀后， 每支再分别分配到6支检测管中， 共30份， 与检测标本一起上机进行实验检测。

1. 5 统计学方法 检测数据处理采用SPSS11.5统计软件进行分析， 使用配对资料组间差异 t检验。

2 结果

肝素化血浆与血清标本血钙测定结果， 两组检测数据配对资料组间差异t检验， 差异有统计学意义（P<0.01）；所用定值冻干质控血清参考值（ARSENAZO Ⅲ法 ）：2.30 mmol/L。

3 讨论

血钙或者血液总钙测定， 一般是指使用血液血清标本进行总钙含量测定。关于血钙测定， 虽然已经使用过许多钙结合染料， 其中邻-甲酚酞络合酮和偶氮砷Ⅲ（ARSENAZO Ⅲ）， 至今一直在广泛应用， 当然， 钙离子与偶氮砷Ⅲ结合力还受到缓冲液， Ph和钠浓度的影响[1]。血钙检测作为临床一般常规检测项目， 目前较多使用偶氮砷Ⅲ比色法， 而且已经有文献证明， 该方法是较为理想的方法[2]。按照《全国临床检验操作规程》的具体要求[1]， 应该使用血清标本进行血钙的测定。但在实际工作中， 使用肝素化血浆标本进行血钙测定的情况确实存在。亦有文献报道血清与肝素化血浆标本，血钙测定结果差异不具显著性[3]， 但其未提供具体的实验方法以及试剂具体配方。在购买的试剂盒， 一般都有生产厂家提供的详细产品使用说明书， 对标本处理有具体的要求。我们选择国内一家较为知名的试剂生产商提供的偶氮砷Ⅲ法血钙检测试剂盒， 厂家在使用说明上明确这样注明样本要求：血清、肝素化血浆、尿。血清或肝素化血浆中的钙， 在2～8℃下可稳定10 d。但在实际工作中， 发现有一定问题， 故进行了此次实验。通过此次实验的观察、分析。可以从以上实验结果看出， 肝素化血浆与血清标本， 偶氮砷Ⅲ法血钙测定结果差异甚大， 足以影响临床医生对患者病情的分析以及治疗措施的制定。特别是对于那些低清蛋白血症、慢性肾功能衰竭、甲状腺功能减退、维生素D缺乏、电解质代谢紊乱等低钙血症患者， 可能产生严重后果[4]。而另一家国内试剂生产商提供的偶氮砷Ⅲ法血钙试剂盒， 试剂主要配方为偶氮砷Ⅲ（ARSENAZO Ⅲ）： 0.10×10-3 mol/L，磷酸盐缓冲液（pH7.0）：50×10-3 mol/L。则明确要求使用血清标本进行测定， 此次实验未使用次家试剂。临床生化检测， 一般要求使用血清进行， 尤其对《全国临床检验操作规程》中要求使用血清进行实验的项目， 改为血浆进行实验操作时， 必须进行大量实验证实， 方可使用， 以免影响实验检测结果的准确性、可靠性， 影响临床的诊断与治疗。临床医生亦应依据检验科采集标本的具体要求， 严格督促工作人员采集合格的标本， 保障医疗工作的顺利开展。

参考文献

[1] 叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程.第3版.南京：东南大学出版社， 2006：383-383.

[2] 张莉.偶氮砷Ⅲ发钙试剂盒不确定度的分析.临床和实验医学杂志， 2012，11（20）：1661-1662.

[3] 苏少华.肝素抗凝血浆用于急诊生化检验的研究.中国现代医生， 2007，45（6）：13-14.

[4] 周新.涂植光.临床生物化学和生物化学检验.北京：人民卫生出版社， 2006：43-44.endprint