L B-2 1益生菌发酵乳整肠作用研究

冯丽莉，王世杰，王红叶，潘丽，康志远，朱宏，*，李兴峰

（1.河北科技大学，河北石家庄050221；2.石家庄君乐宝乳业有限公司，河北石家庄050221；3.石家庄市发酵乳制品工程技术研究中心，河北石家庄050221）

自20世纪80年代以来，随着人们对肠道菌群重要性的再认识，乳酸菌及其发酵乳的健康促进作用被广泛关注[1]。研究发现，某些乳酸菌（益生菌）具有定殖肠道表面，抵抗病原体感染，保护胃肠道屏障作用等健康益处[2-4]；食用这些乳酸菌及其发酵乳具有调节肠道微生物组成，增加肠道蠕动，减少肠内腐败物质，促进和维护肠道健康的功效，即“整肠作用”[5]。然而，大量的研究也指出，不同的乳酸菌具有不同的健康功效，不是所有的乳酸菌都具有同样的“整肠作用”，因此，研究确认每个发酵乳的实际作用具有重要的现实意义。本文借鉴“肠道改善表观评价方法”[5]对饮用益生菌低脂发酵乳的肠道健康影响进行了研究。

1 材料与方法

1.1 样品

本实验样品为石家庄君乐宝乳业有限公司（石家庄，河北）生产的含有双歧杆菌LB21的低脂发酵乳，其中蛋白质含量2.84%，脂肪含量1.75%，总固形物17.14%，pH为4.17，吉尔涅尔度为89°T。产品中含有嗜热链球菌、保加利亚乳杆菌、双歧杆菌；其中双歧杆菌活菌数≥2.8E+07 CFU/mL；低聚木糖含量3.75‰。

1.2 实验人员

受试人员从石家庄君乐宝乳业有限公司志愿者及其家属中筛选，筛选标准参照文献5，排除胃肠疾病患者、妊娠或哺乳期妇女、服用抗生素、过敏体质人员。最终筛选获得志愿者50人，年龄24～43岁，在试验前重新对实验内容进行说明并签署实验知情书。受试人员性别构成为男性：21人；女性：29；平均年龄：30岁。

1.3 调查方法[5]

50名志愿者（平均年龄30岁）连续饮用样品14 d（饮用量300 mL/d），在早晨、中午、晚上分3次饮用，100 mL/次；试食者在试验前7天开始每天填写《便性调查表》记录相应的肠道改善状况，直至试食试验结束；调查指标包括排便次数、粪便颜色、形状、排便量、气味、硬度、排便后感觉等。

1.4 结果处理及统计分析[5]

通过调查问卷对志愿者的每天排便次数、粪便颜色、粪便形状、粪便量、粪便气味、粪便硬度、排便后感觉进行调查；同时，对志愿者的肠胃状况、饮用后的饱腹感、健康状况、使用药物、异常饮食情况进行跟踪。志愿者摄入实验结束后，收集所有《便性调查表》根据对调查卷中结果分别赋值，进行统计学分析（SPSS statistics 17.0），比较前期（摄入前 1周），中期（摄入1周），后期（摄入第2周）的变化情况。

2 结果与分析

肠道与人体健康密切相关，大量的研究指出，益生菌酸奶对人体的健康促进作用首先是对人体肠道状况的改善[6-7]。通常，通过测定肠道菌群的变化来指示肠道状况的改善，然而粪便中的菌群相当复杂，测定和评价相当繁琐。目前研究发现，粪便特征与肠道菌群之间存在很大的相关性[8-9]，本研究对饮用益生菌LB21低脂发酵乳的45人（50名志愿者中因病使用药物2人、数据不齐全3人，实际有效统计人员为45人）进行调查分析发现，被调查者在饮用饮用益生菌LB21低脂发酵乳后，没有出现不良反应，但是，被调查者的粪便的硬度、粪便的颜色、粪便形状、排便次数、粪便量、排便后的感觉、粪便气味都有一定改善。

2.1 排便的次数

排便次数可直接反应肠道状况的改善。人体内糖、脂肪、蛋白质等物质新陈代谢产生的废物和肠道内食物残渣腐败后，如果不能及时排出体外，在人体内停留超过24 h时，就会在肠道内腐烂变质，污染人体内部环境，成为有害细菌滋生的温床。停留在人体内粪便中的毒素可能会被肠道重新吸收，对肝脏等内脏器官造成危害，所以，粪便在人体内停留时间越长，对人体的危害就越大，因此整肠的排便对人体健康至关重要，通过调查发现，随着受试人员对产品的饮用，每天排便＜1次的人员逐渐减少，排便接近正常排便1次/d的人员逐步增加。受试人员整体在饮用2周以后，排便次数出现了统计学上有意义的增加（p＜0.05）（图1）。

图1 饮用含双歧杆菌LB21的低脂发酵乳对排便次数的影响Fig.1 Effect of low-fat fermented milk containing Bifidobacterium lactis LB21 intake on defecation frequency

2.2 粪便颜色

粪便颜色是可间接反映肠道内的pH环境，粪便的颜色除了因每一个体的饮食习惯有一定变化以外，体内分泌的胆汁和胆红素的颜色是粪便构成特殊的黄色的主要原因。胆汁中的丙酮酸在低pH的条件下呈金黄色，但随着肠内有害微生物的增加，特别是梭状芽孢杆菌（Clostridium spp.）为代表的具有很强的蛋白质分解活性的微生物，使肠内环境随NH4等的大量产生逐步变为碱性，丙酮酸等变为褐色，导致粪便逐步变为深褐色，最后变成黑色，同时将伴随着各种恶臭[5]。调查中发现，试验人员随着产品的饮用，其粪便颜色逐步变成橙黄色，饮用结束后，黑色明显减少，试验人员整体的粪便颜色出现了统计学上有意义的变化（p ＜0.05）（图 2）。

图2 饮用含双歧杆菌LB21的低脂发酵乳对粪便颜色的影响Fig.2 Effect of low-fat fermented milk containing Bifidobacterium lactis LB21 intake on fecal color

该结果提示，饮用益生菌LB21低脂发酵乳后，受调查者肠道内的的环境可能由碱性向酸性转变，从而也预示着有害微生物的减少。

2.3 粪便形状和排便

每个人粪便的形状和体积是不同的，其中受饮食的影响较大：食富含食物纤维的饮食，其大便量多体积大；而食西方型的饮食，食物经过精制，富含肉类、高蛋白、粪便的形状就细长而且体积少。在调查中发现，试验人员的粪便形状，逐步由蚕蛹状向香蕉状转变，饮用1周后开始出现统计学上有意义的变化（p＜0.05）（图3）。而且粪便量在饮用1周后逐步变多，饮用2周后出现了统计学上有意义的变化（p＜0.05）（图4）。

图3 饮用含双歧杆菌LB21的低脂发酵乳对粪便形状的影响Fig.3 Effect of low-fat fermented milk containing Bifidobacterium lactis LB21 intake on fecal shape

图4 饮用含双歧杆菌LB21的低脂发酵乳对粪便量的影响Fig.4 Effect of low-fat fermented milk containing Bifidobacterium lactis LB21 intake on fecal quantity

2.4 粪便的硬度

正常粪便含有70%～80%的水份，形状就象香蕉或类似由管中挤出来的形状。肠内容物从大肠通过的速度是每小时10 cm左右，当速度过慢，水份被吸收过多，就会产生硬便而形成便秘。排泄时粪便干硬，同时伴随疼痛或不适，就是便秘的信号。随着排便次数增加，粪便的水分也会增多，从而降低了粪便的硬度。调查中发现，试验人员粪便的硬度逐步变软，饮用1周后出现了统计学上有意义的变化（p＜0.05）（图5）。

图5 饮用含双歧杆菌LB21的低脂发酵乳对粪便硬度的影响Fig.5 Effect of low-fat fermented milk containing Bifidobacterium lactis LB21 intake on fecal hardness

2.5 其他调查指标

在调查问卷中，试验人员随着产品的饮用，粪便气味、排便后感觉都有一定改善，但是，变化不明显，统计学上无显著性差别。

3 结论

“肠道改善表观调查表”通过对其调查者的排便次数、粪便状况等指标进行定性的选择，然后对各项指标赋值，进行统计分析，使定性的指标进行定量的分析，该方法作为一种简易评价益生菌酸奶对肠道改善的方法，具有很好的应用前景。本研究的结果显示，受试人员在饮用低脂发酵乳LB21一周后，粪便的硬度、粪便的颜色、粪便形状出现了显著性变化（p＜0.05）；排便次数、粪便量、排便后的感觉等指标在饮用结束后出现了显著性变化（p＜0.05）。本研究结果说明饮用含双歧杆菌LB21低脂发酵乳具有一定的“整肠”作用，即：能够增加排便频率，改变粪便状况，促进肠内有益微生物的生长，抑制有害微生物的生长，改善人体肠道健康，然而对其调节肠道的机理进行深一步的研究。

[1] 何方.酸奶内微生物及功效[J].中国食物与营养,2002(6):44-45

[2]BERNET-CAMARD M F,LIEVIN V,BRASSART D,et al.The human Lactobacillus acidophilus strain La1 secretes a nonbacteriocin antibacterial substance(s)active in vitro and in vivo[J].Appl Environ Microbiol,1997,63(7):2747-2753

[3]SEKIROV I,RUSSELL S L,ANTUNES L C M,et al.Gut microbiota in health and disease[J].Physiol Rev,2010,90(3):859-904

[4]WALLANE T C,GUARNER F,MADSEN K,et al.Human gut microbiota and its relationship to health and disease[J].Nutr Rev,2011,69(7):392-403

[5] 王世杰,朱宏,陆淳,等.LB-21乳酸菌饮料对成年女性肠道健康的影响[J].食品研究与开发,2011,32(9):193-196

[6]SANDERS M E,KLAENHAMMER T R.Invited review:The Scientific Basis of Lactobacillus acidophilus NCFM Functionality as a Probiotic[J].J Dairy Sci,2001,84(2):319-331

[7]SALVA S,VILLENA J,ALVAREZ S.Immunomodulatory activity of Lactobacillus rhamnosus strains isolated from goat milk:impact on intestinal and respiratory infections[J].Int J Food Microbiol,2010,141(1/2):82-89

[8] HOSODA M,HE F,KOJIMA T,et al.Effects of fermented-milk with Lactobacillus rhamnosus GG strain administration on defecation,putrefactive metabolites and fecal microflora of healthy volunteers[J].Health and Nutrition Food Research,1998,11(3):1-9

[9] HOSODA M,HE F,HIRAMATSU T,et al.Effects of Lactobacillus GG strain intake on fecal microflora and defecation in healthy volunteers[J].Bifid(Journal of Japanese Bifidus Foundation),1994,8(1):21-28