超声波提取在中药汤剂煎煮中的应用研究

李清霞赵君颖

（1 新野县城郊乡卫生院，河南 新野 473000；2 河南省中医院，河南 郑州 450002）

超声波提取在中药汤剂煎煮中的应用研究

李清霞1赵君颖2

（1 新野县城郊乡卫生院，河南 新野 473000；2 河南省中医院，河南 郑州 450002）

目的 考察超声波提取在中药汤剂煎煮中的应用。方法 对比超声波提取、煎煮法同时使用与单独煎煮对汤剂各项指标的影响。结果 超声波提取、煎煮法同时使用可以使汤剂一些指标得到提高。结论 超声波提取有可能在中药汤剂中进行推广应用。

超声波；提取；汤剂

中药煎煮过程是对中药成分进行提取、合煎时对各种成分相互反应进行催化的过程，同时也是一个消毒的过程，但煎煮过程对中药成分提取效果较差、能耗大，工作环境恶劣，一次煎煮有效成分难以全部溶出。超声波提取是一种物理破碎过程，利用超声波辐射压强产生的强烈空化效应，以及机械效应、热效应促进提取的过程，所需设备简单、操作方便、提取效率高、成本低廉。如果中药煎药机设备在保证常规煎煮的基础上利用超声提取促进中药有效成分溶出，将有效提高中药的利用率。超声波提取在中药汤剂中进行研究，可以扩大超声提取法的应用。

黄连解毒汤源自《外台秘要》，是清热解毒的常用方剂。处方为黄连9 g、黄芩6 g、黄柏6 g、栀子9 g，其中黄连为君药。本研究对比超声波提取、煎煮法同时使用和单独煎煮对黄连解毒汤汤剂的性状色泽、密度、浸出物、君药黄连中4种生物碱的含量影响，以考察超声波提取在中药汤剂中的应用。

1 仪器、试剂与药材

1.1 仪器

LC—2010A高效液相色谱仪（CLASS—VP数据处理系统，二极管阵列检测器，日本岛津）；BS 210S电子天平（北京赛多利斯天平有限公司）；METTLERAE240型十万分之一电子天平（瑞士）；DHG-9076A型电热恒温鼓风干燥箱(上海精宏实验设备有限公司)；KQ-500DV型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；DZKW-4电子恒温不锈钢水浴锅（上海东星建材试验设备有限公司）； SHZ-D（Ⅲ）循环水式真空泵（巩义市英峪予华仪器厂）；SZ-93自动双重纯水蒸馏器（上海亚荣生化仪器厂）。

1.2 试剂与试药

盐酸小檗碱标准品（中国药品生物制品检定所，批号110713-200911）；甲醇(色谱纯，天津市四友精细化学品有限公司，批号110901)；磷酸二氢钾（分析纯，广州化学试剂厂，批号21100621）；十二烷基硫酸钠（化学纯，天津永大化学试剂有限公司，批号20100914）；乙腈（Dikmapure，DIKMA TECHNOLOGIES INC，LOT. NO.74112）

2 方法与结果

2.1 样品的制备

2.1.1 煎煮样品的制备：称取黄连解毒汤复方的四种饮片黄连9 g，黄芩6 g，黄柏6 g，栀子9 g，置砂锅中，加蒸馏水500 mL，浸泡30 min；煎煮30 min，趁热用4层纱布过滤至烧杯中，冷却至室温，吸取1 mL用甲醇定容至5 mL容量瓶中，摇匀，即得供试品溶液。

2.1.2 超声波提取、煎煮法同时使用样品的制备：打开超声波清洗器，设定功率为500 W，温度为80 ℃；称取黄连解毒汤复方的四种饮片黄连9 g，黄芩6 g，黄柏6 g，栀子9 g，置大烧杯中，加蒸馏水500 mL，浸泡30 min；加热煮沸后开始超声提取30 min，提取后趁热用4层纱布过滤至烧杯中，冷却至室温，吸取1 mL用甲醇定容至5 mL容量瓶中，摇匀，即得供试品溶液。

2.1.3 对照品溶液的制备：精密称取盐酸小檗碱对照1.20 mg，用色谱甲醇定容至10 mL容量瓶中，摇匀。

2.2 样品指标评价

分别制备3个煎煮样品，3个超声波提取、煎煮法同时使用样品，然后分别对性状色泽、密度、浸出物、君药黄连中4种生物碱的含量进行对比研究。

2.2.1 性状、色泽、味道鉴别：煎煮样品和超声波提取、煎煮法同时使用样品均为黄棕色溶液。放置一段时间后有细小微粒出现并附着于容器壁，液体呈土黄色混悬液，沉淀显棕褐色，口服味极苦。

2.2.2 密度及水溶性浸出物测定：①密度测定：使用波美计对煎煮样品和超声波提取、煎煮法同时使用样品测定并计算其密度。②水溶性浸出物测定：按2010年版药典附录水溶性浸出物测定项下规定的操作法中的冷浸出物含量测定法，分别精密量取黄连解毒汤煎煮、超声提取样品液20 mL，置已干燥至恒重的蒸发皿中，在水浴上蒸干后，于105 ℃干燥3 h，置干燥器中冷却30 min，迅速精密称定重量。以干燥品计算供试品中水溶性浸出物的含量（%），具体结果见表1。

2.4 一侧多评法[1]测定样品中表黄连碱、巴马汀、小檗碱、小檗碱的含量

2.4.1 色谱条件：色谱条件：色谱柱：Agilent TC-C18（2）（4.6 mm×250 mm，5 µm）；流动相：乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢钾溶液（50∶50）（每100 mL中加十二烷基硫酸钠0.4 g，再以磷酸调节ph值为4.0）；检测波长：345 nm；柱温：25 ℃；流速为1 mL/min；理论塔板数以盐酸小檗碱计＞2000。

表1 煎煮样样品密度及浸出物测定

表2 超声波提取＋煎煮法样品密度及浸出物测定

2.4.2 表样品中小檗碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱色谱峰的确定和含量的测定：取对照品溶液用0.22 μm微孔滤膜过滤后进样10 μL，色谱图如图1，保留时间为24.309 min，峰面积为4487980。

取煎煮样品1，超声波提取、煎煮法同时使用样品1用0.22 μm微孔滤膜过滤后分别进样10 μL色谱图如图2，图3。

图1 盐酸小檗碱标准品HPLC

图2 煎煮样品HPLC

图3 煎煮法超声提取同时使用样品HPLC

计算煎煮样品1、2、3、4号色谱峰与盐酸小檗碱对照品色谱峰的相对保留时间，根据2010版药典中规定的相对保留时间，确定1号峰为表小檗碱，2号峰为黄连碱，3号峰为巴马汀，4号峰为小檗碱。见表3。

表3 煎煮样品中表小檗碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱色谱峰的确定

以盐酸小檗碱对照品的峰面积为对照，计算煎煮样品中小檗碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀的含量。见表4。

表4 煎煮样品中表小檗碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱含量的测定

2.4.3 样品中表黄连碱、巴马汀、小檗碱、表小檗碱的含量的含量测定：按照2.4.2项下方法分别确定样品中小檗碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱的色谱峰，计算峰面积，测定含量。见表5。

表5 煎煮样样品四种生物碱含量测定

表6 超声波提取＋煎煮法样品含量测定

煎煮、超声提取同时使用样品和单独煎煮样品相比性状、色泽、口感未发生明显改变，但样品密度大于单独煎煮样品，水溶性浸出物量也增大；一测多评法计算表明煎煮、超声提取同时使用样品中黄连碱、巴马汀、小檗碱、表小檗碱的含量都大于单独煎煮样品。

3 讨 论

3.1 煎煮法的主要原理是通过加热让水充分浸润饮片促进饮片的成分溶出，其溶出的动力是饮片细胞内外的浓度差；超声技术主要依靠超声波产生的强烈振动，高的加速度，强烈的空化效应，外加超声波的许多次级效应，如机械振荡、乳化、扩散、击碎、化学效应等都能加速物响散成分进入溶剂。煎煮法和超声提取的成分溶出动力来源不同，如果两种方法同时使用，药效成分的提取效果将得到增加。

3.2 文献报道[2-10]超声提取法对多糖、皂苷、黄酮、挥发油、鞣质、维生素、萜类等成分的提取效果和水提取法相比要优于后者或和后者水平相当，并且超声提取设备简单，可以缩短提取时间，减少能耗，改善工作环境；超生提取还可以避免高温对有效成分的破坏，特别适用于中药煎煮时需要后下的饮片，可以保证药效的同时提高提取效率。进一步研究超声提取在中药煎煮中的应用，有可能提高中药汤剂的药效，扩大超声提取法的应用。

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[5] 秦大伟,李树英,段洪东,等.超声波提取嘉菊总黄酮的工艺研究[J].时珍国医国药,2008,19(10):2475-2476.

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[7] 陈毅挺,林明峰,郑水钦.翻白草中鞣质的超声提取工艺研究[J].闽江学院学报,2010,31(2):107-110.

Ultrasonic Extraction Applied Research in Chinese Medicine Decoction

LI Qing-xia1, ZHAO Jun-ying2
(1 Xinye Chengjiao Hospitals, Xinye 473000, China; 2 Henan Province Hospital, Zhengzhou 450002, China)

Objective To examine ultrasonic extraction in Chinese medicine decoction. Method comparison of ultrasonic extraction and decoction decoction indicators. Results Compared with the boiling method, ultrasonic extraction energy, improve the working environment better Chinese medicines extracted. Conclusion The ultrasonic extraction may promote the use of Chinese medicine decoction.

Ultrasonic; Extract; Decoction

R445.1

B

1671-8194（2014）19-0014-02