2012年度海口市人民医院细菌耐药性监测

吴多荣，姚敏，黄会，韩小胜，张冬霞，周望

(海口市人民医院中南大学湘雅医学院附属海口医院检验科，海南 海口 570208）

·论著·

2012年度海口市人民医院细菌耐药性监测

吴多荣，姚敏，黄会，韩小胜，张冬霞，周望

(海口市人民医院中南大学湘雅医学院附属海口医院检验科，海南 海口 570208）

目的分析海口市人民医院2012年临床分离细菌对抗菌药物的耐药趋势。方法用VITEK 2 compact鉴定仪对细菌进行鉴定，采用纸片扩散法（K-B法）、仪器法和E-test法对2012年度临床分离菌株分别进行药敏试验，结果按CLSI 2012年版标准判读，用WHONET5.6软件进行耐药性分析。结果2012年共收集非重复临床分离菌株3746株，其中革兰氏阴性菌占78.8%(2950/4746)，革兰氏阳性菌占21.2%(796/3746)。MRSA和MRCNS检出率分别为35.4%和69.9%，未发现对万古霉素和利奈唑胺耐药的葡萄球菌和肠球菌。肺炎链球菌中青霉素耐药株(PRSP)为26.7%。β溶血链球菌对万古霉素、青霉素、氨苄西林和头孢吡肟均高度敏感。大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中ESBLs阳性率分别为59.0%和35.8%，发现对亚胺培南和美罗培南耐药的大肠埃希菌3株和肺炎克雷伯菌2株。铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为17.6%和14.5%。鲍曼不动杆菌对11种抗生素的耐药率均在30%以下。左氧氟沙星和复方新诺明对嗜麦芽窄食单胞菌有较好的抗菌活性(耐药率< 10%)。结论2012年该院分离的细菌主要以革兰氏阴性杆菌为主，临床分离细菌对常用抗菌药物呈不同程度的耐药，未检出对万古霉素耐药的肠球菌和葡萄球菌，肠杆菌科细菌对碳青霉烯类药物呈较低水平耐药状态，应继续做好对该类药物的保护。

细菌；耐药性监测；药敏试验

2012 年是国家开展抗菌药物专项整治活动的第二年，经过一年的管控，抗菌药物的应用逐渐规范。由于我国细菌耐药形势较为严峻，因此各地区和单位及时准确地做好本单位的细菌耐药监测和报告工作，对于指导临床合理使用抗菌药物具有重要意义。现将海口市人民医院2012年细菌耐药性监测结果回顾分析如下：

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 菌株来源收集海南省海口市人民医院2012年1月1日至2012年12月31日临床分离株，剔除同一患者相同部位的重复菌株。所有菌株严格按照临床操作规程进行鉴定。

1.1.2 培养基和药敏纸片培养基购自广州市迪景微生物科技有限公司，肺炎链球菌药敏试验卡为法国生物梅里埃产品，万古霉素E纸片和所有抗菌药物纸片均为英国OXOID公司产品，具体品种见结果表中所列。

1.2 方法

1.2.1 药敏试验按照CLSI推荐的纸片扩散法测定菌株对抗菌药物敏感性[1]；葡萄球菌对万古霉素的敏感性用E试验条测试；肺炎链球菌药敏试验采用梅里埃VITEK 2 compact仪器法检测。质控菌株为大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853、肺炎克雷伯菌ATCC700603、金黄色葡萄球菌ATCC25923、粪肠球菌ATCC29212、肺炎链球菌ATCC49619、流感嗜血杆菌ATCC49247。

1.2.2 ESBLs检测参照CLSI2012[1]推荐的筛选试验和确证试验进行。

1.2.3 MRS检测用头孢西丁测定苯唑西林耐药性,MSSA、MRSA和MSCNS、MRCNS判定标准依据头孢西丁的折点分别为S≥22 mm、R≤21 mm和S≥25 mm、R≤24 mm。

1.2.4 统计学方法采用世界卫生组织(WHO)提供的WHONET 5.6软件进行耐药性统计分析，耐药率比较应用SPSS11.0软件进行χ2检验统计分析，P<0.05或者P<0.01为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 各类细菌的分离情况及其在标本中的分布2012年共分离非重复临床株3 746株，其中革兰氏阴性菌2 950株(78.8%)，革兰氏阳性菌796株(21.2%)。分离自痰液标本1 558株(占41.6%)，尿液标本751株(占20.0%)，血液标本420株(占11.2%)，伤口及脓液标本376株(占10.0%)，胸腹水和脑脊液标本142株(占3.8%)，胆汁标本112株(占3.0%)，其他标本386株(10.3%)。主要菌种分布见表1。

表1 2012年临床分离菌株分布情况

2.2 革兰氏阳性球菌对抗菌药物的敏感性

2.2.1 葡萄球菌属MRSA检出率为35.4%，MRCNS检出率为69.9%，359株葡萄球菌经万古霉素E试验条测试，结果显示其MIC值均≤1 mg/L，未发现对万古霉素和利奈唑胺耐药的葡萄球菌。葡萄球菌属对抗菌药物的敏感性见表2。

2.2.2 肠球菌属屎肠球菌对常规检测药物的耐药率均明显高于粪肠球菌，未发现对万古霉素和利奈唑胺耐药株。肠球菌属对抗菌药物的敏感性见表2。

表2 葡萄球菌属和肠球菌属对抗菌药物的敏感性(%)

2.2.3 链球菌属共分离肺炎链球菌131株，95.4%(125/131)来源于痰液标本，药敏结果显示对青霉素的耐药率为26.7%；未发现利奈唑胺和万古霉素的耐药株。β溶血性链球菌对青霉素仍呈高度敏感，敏感率为92.3%；对红霉素的耐药率较高，为78.8%；未发现对万古霉素耐药株。链球菌属对抗菌药物的敏感性见表3。

表3 肺炎链球菌、β溶血性链球菌和流感嗜血杆菌对抗菌药物的敏感性(%)

2.3 革兰氏阴性菌对抗菌药物的敏感性

2.3.1 肠杆菌科细菌大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中ESBLs阳性率分别为59.0%和35.8%。其中产ESBLs株耐药率(亚胺培南和美罗培南除外)均显著高于非产ESBLs株(P＜0.05)。发现对亚胺培南和美罗培南均耐药的大肠埃希菌3株和肺炎克雷伯菌2株。肠杆菌属细菌对15种抗菌药物中的10种耐药率均在30%以下。柠檬酸杆菌属耐药率低于20%的药物为头孢派酮/舒巴坦、哌拉西林-他唑巴坦、头孢他啶、头孢吡肟、亚胺培南、美罗培南、阿米卡星、妥布霉素和左氧氟沙星。沙雷菌属除对氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸和头孢呋辛耐药率较高外，对其余抗菌药物的耐药率均低于20%。肠杆菌科细菌对碳青霉烯类药物呈较低水平耐药状态，耐药率均低于5%。肠杆菌科细菌对抗菌药物的敏感性见表4、5。

2.3.2 不发酵糖革兰氏阴性杆菌铜绿假单胞菌除对头孢噻肟和复方新诺明耐药率较高外，对所测试其他抗菌药物的耐药率均在30%以下，对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为17.1%和17.6%。鲍曼不动杆菌除对头孢噻肟呈现较高的耐药率外，对其余11种抗菌药物的耐药率均在30%以下，呈现较好的敏感率。左氧氟沙星和复方新诺明对嗜麦芽窄食单胞菌有较好的抗菌活性(耐药率＜10%)。不发酵糖革兰氏阴性杆菌对抗菌药物的敏感性见表6。

2.3.3 嗜血杆菌属流感嗜血杆菌对复方新诺明、氨苄西林和头孢他啶的耐药率分别为41.5%、24.4%和2.4%，对头孢呋辛、左氧氟沙星和阿莫西林/克拉维酸100%敏感，见表3。

表4 肠杆菌科细菌对抗菌药物的敏感性（%）

表5 肠杆菌科细菌对抗菌药物的敏感性（%）

表6 铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌对抗菌药物的敏感性（%）

3 讨论

近三年来，随着抗生素专项治理工作的深入开展，临床医生逐渐认识到病原菌检测对感染性疾病诊断和治疗的重要性，临床微生物培养标本的送检及时、规范，无菌体液标本特别是血培养的送检量明显增加，2012年该院非重复临床分离的3 746株菌中41.6%分离自痰液标本，比2011年的55.0%明显降低[2]，低于其他地区的报道[3]。有11.2%分离自血液标本，比2011年的3.5%明显增加[2]，这与该院自2012年开始血培养实行双瓶双套送检有关，与中国CHINET报道相近[4]。

MRS是导致葡萄球菌多重耐药的主要原因[5]，从结果可见该院MRSA的检出率为35.4%，明显低于黄红宇等[6]报道水平，高于王华丽等[7]的报道。MRCNS的检出率为69.9%，与中国CHINET报道相近[4]，MRS株对抗菌药物的耐药率明显高于MSS株，万古霉素对葡萄球菌的MIC值均≤1 mg/L，低于王钰[6]报道水平，未发现对万古霉素和利奈唑胺耐药的葡萄球菌。肠球菌对万古霉素和利奈唑胺100%敏感，屎肠球菌对其余抗菌药物的耐药率明显高于粪肠球菌，这与其他地区报道相近[8]。对青霉素耐药的肺炎链球菌(PRSP)越来越引起人们的关注，该院PRSP分离率为26.7%，明显高于其他地区[9]，氧氟沙星、左氧氟沙星、莫西沙星、利奈唑胺和万古霉素等对它呈现较强的抗菌活性，敏感率为95.4%～100%。

从结果可见，该院肠杆菌科细菌对碳青霉烯类药物呈较低水平耐药状态，应继续做好对该类药物的保护。产ESBLs仍是大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌对常用抗菌药物耐药的主要机制之一，该院产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌检出率分别为59.0%和35.8%，低于其他地区[10]，比2011年有所下降[2]。产ESBLs株比非产ESBLs株对抗菌药物的耐药率差异性具有统计学意义(P<0.05)。其他肠杆菌科细菌除对氨苄西林和阿莫西林/克拉维酸外耐药率较高外，对其余抗菌药物都呈现较好的敏感性。

据文献报道，铜绿假单胞菌和鲍曼不动杆菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率都呈现较高的耐药水平，该院监测数据显现两种细菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率均低于20%[4]。铜绿假单胞菌除对头孢噻肟和复方新诺明耐药率较高外，对其余抗菌药物的耐药率均低于30%，但已发现有个别全耐的铜绿假单胞菌检出，对于全耐细菌所引起的感染治疗非常困难，大剂量黏菌素或多黏菌素B是可选择的治疗方案[11]，但仍需临床积极探索治疗经验。鲍曼不动杆菌对11种抗生素的耐药率均在30%以下，明显低于其他地区[3,5]。左氧氟沙星和复方新诺明仍对嗜麦芽窄食单胞菌有较好的抗菌活性(耐药率<10%)。

总之，加强对微生物标本的检测和细菌耐药监测工作的重视力度，不断提高抗菌药物的合理使用，这将对有效保护细菌耐药性的产生，延缓抗菌药物的使用寿命等起着非常关键的作用，更好地促进我国医疗资源的健康、有序发展。

[1]Clinicaland Laboratory Standards Institute(CLSI).Performance standards for antimicrobial susceptibility testing[S].2012,M100-S22.

[2]吴多荣,姚敏,黄会,等.2011年度海口市人民医院细菌耐药性监测[J].中国现代医学杂志.2013,23(5):87-92.

[3]李明,周湧,郭文婷,等.2011东莞市太平人民医院细菌耐药性监测[J].中国感染与化疗杂志.2013,13(1):65-71.

[4]朱德妹,汪复,胡会品,等.2010年中国CHINET细菌耐药性监测[J].中国感染与化疗杂志,2011,11(5):321-329.

[5]王钰,陈友华,成祥君,等.耐甲氧西林金黄色葡萄球菌对万古霉素的MIC值的5年监测[J].现代生物医学进展,2012,12(10): 1902-1905.

[6]黄红宇,周帑.金黄色葡萄球菌5年耐药性监测结果分析[J].中国全科医学,2011,14(4C):1302-1304.

[7]王华丽,蒋洪彦,赖富华,等.某院2011～2012年细菌耐药性监测[J].检验医学与临床,2012,9(16):1999-2003.

[8]闫敏.2009～2011年某院临床常见病原菌分布及耐药分析[J].国际检验医学杂志,2012,33(S1):58-60.

[9]王贺,张小江,刘文静,等.2009年北京协和医院细菌耐药性监测[J].中国感染与化疗杂志,2011,11(3):161-167.

[10]李晓峰,童照威,施柏年,等.2008-2010年肠杆菌产超广谱β-内酰胺酶流行病学调查与耐药性监测[J].中国全科医学,20012,15 (5A):1526-1528.

[11]Maltezou HC.Metallo-beta-lactamases in Gram-negative bacteria: introducing the era of pan-resistance?[J].Int J Antimicrob Agents, 2009,33(5):405.

Bacterial resistance surveillance in Haikou People’s Hospital in 2012.

WU Duo-rong,YAO Min,HUANG Hui,HAN Xiao-sheng,ZHANG Dong-xia,ZHOU Wang.Department of Clinical Laboratory,HaiKou People's Hospital,the Affiliated Hospital of Xiangya Medical School of Central South University,Haikou 570208,Hainan,CHINA

ObjectiveTo investigate the resistance of clinical isolates of bacteria in Haikou People's Hospital in 2012.MethodsBacteria were identified by VITEK 2 compact instrument,and antimicrobial susceptibility testing was carried out by Kirby-Bauer(K-B)method,instrument and E-test.Then the data was analyzed by WHONET 5.6 software according to CLSI 2012 breakpoints.ResultsOf the 3 746 clinical isolates collected in 2012,gram-negative bacilli and gram-positive bacilli accounted for 78.8%(2 950/3 746)and 21.2%(796/3746),respectively.The detection rates of the meticillin-resistant Staphylococcus aureus(MRSA)and coagulase-negative Staphylococcus (MRCNS)were 35.4%and 69.9%.Neither vancomycin nor linezolid resistant isolate was found in Staphylococcus. The rate of penicillin-resistant Streptococcus pneumoniae(PRSP)was 26.7%.Beta-hemolytic Streptococcus was found highly sensitive to vancomycin,penicillin,ampicillin and Levofloxacin.ESBLs positive rates of E.coli and K.pneumoniae accounted for 59.0%and 35.8%.Three E.coli strains and 2 K.peumoniae isolates were resistant to imipenem and meropenem.The resistance rate of Pseudomonas aeruginosa to imipenem and meropenem were 17.6%and 14.5%, respectively.The resistance rates of Acinetobacter baumannii to 11 antibiotics were all below 30%.Stenotrophomonas maltophilia was sensitive to levofloxacin medicine and Sulfamethoxazole-trmethoprim(drug-resistant rate<10%). ConclusionGram-negative bacilli are the most common isolates in our hospital in 2012.No Vancomycin-resistant isolates were detected in Enterococci and Staphylococcus.Carbopenems-resistant isolates in Enterobacteriaceae were detected in our surveillance,which should be noted.

Bacteria;Resistance surveillance;Susceptibility testing

R37

A

1003—6350（2014）07—0992—05

10.3969/j.issn.1003-6350.2014.07.0384

2013-08-21)

吴多荣。E-mail：wuduorong@163.com