氢化物发生-原子荧光光谱法测定鲜黄蘑菇中的硒

胡兰基 杨娜 王洪桂 霍成玉 马文

（1.青海省地质矿产测试应用中心， 青海西宁 810008；2.青海省地质调查局，青海西宁 810001）お

摘要 ［目的］快速、准确地测定鲜黄蘑菇中的硒含量。［方法］采用新鲜黄蘑菇直接打成浆液后经硝酸和高氯酸微波消解，用氢化物发生-原子荧光光谱法测定消解液中硒的含量。［结果］鲜黄蘑菇样品经硝酸和高氯酸微波消解后，所得消解液在6 mol/L盐酸介质中煮沸3~5 min使硒（Ⅵ）完全还原成硒（Ⅳ），用Fe3+盐作为抑制剂，氢化物发生器在还原剂为20 g/L的硼氢化钾（5 g/L KOH介质），载流为5%~10%HCl时进行测定。氢化物发生-原子荧光光谱法测定鲜黄蘑菇中的微量硒，硒的质量浓度在20 μg/L以内与荧光强度呈线性关系，方法检出限（3 s/k)为0.020 μg/L，其相对标准偏差（玭=7)为2.18%。［结论］该测试方法简单、快捷、稳定性较好，可用于测定鲜黄蘑菇中的硒含量。

关键词 氢化物发生-原子荧光光谱法；鲜黄蘑菇；硒

中图分类号 SB646文献标识码

A文章编号 0517-6611（2014）19-06387-01お

HG睞FS Determination of Selenium in Fresh Yellow Mushroom

HU Lan瞛i et al (Qinghai Research Institute of Geological and Mineral, Xining, Qinghai 810008)

Abstract ［Objective］ To rapidly and accurately determine selenium content in fresh yellow mushroom. ［Method］ Sample of fresh yellow mushroom was digested with HNO3 and HClO4, HG睞FS method was used to determine selenium in solution. ［Result］ Sample of fresh yellow mushroom was digested with HNO3 and HClO4. The sample solution kept boiling gently for 3-5 minutes after addition of 6 mol/L HCl to reduce Se(Ⅵ) completely to Se(Ⅳ). The sample solution was taken for the HG睞FS determination addition of Fe3+ for inhibitor. Hydride generation was performed in reducing agent for 20 g/L of KBH4 (5 g/L KOH medium)and current瞔arrying for 5%-10% of HCl. HG睞FS determination of trace selenium in fresh yellow mushroom using the standard curve method. The quality of the selenium concentration within 20 μg/L has a linear relation in fluorescence intensity. Detection limit (3 s/k) was 0.020 μg/L. Values of 玆SD(n=7) was 2.18% for selenium. ［Conclusion］ The method is simple, rapid and stable, which can be used for determination of selenium in fresh yellow mushroom.

Key words HG睞FS; Fresh yellow mushroom; Selenium

お

作者简介 胡兰基（1982- ），女，青海互助人，工程师，从事原子荧光光谱法相关研究。

收稿日期 20140603

黄蘑菇产于青海祁连山、黄南州等半山坡一带无污染地区，海拔2 100~3 800 m。该蘑菇蛋白质中含有异常丰富的氨基酸和铁、钙、硒等微量元素，性味干平，无毒，而其中硒是人体必需的微量元素之一。硒存在于人体的各个器官和血浆中的谷胱甘肽过氧化物酶的组分中，保护其细胞不受损伤，是体内有毒物质砷、汞、镉的有效解毒剂和拮抗剂［1-2］。人体硒含量情况与克山氏病、癌症、心血管病、白内障、糖尿病、大骨节病等疾病的发病率息息相关［3-5］。适量补充硒可有助于身体健康，过量摄入硒可能引起中毒，有害于健康。所以，快速、准确测定硒含量的方法值得探讨。

1 材料与方法

1.1 材料

供试新鲜黄蘑菇，市售。主要仪器：AFS8130型双道原子荧光光度计，MARSXPRESS微波消解仪，PL400打浆机。主要试剂：①硒标准储备溶液。1 000 mg/L，称取高纯硒0.100 0 g 置于150 ml烧杯中，加硝酸2 ml ，加热至完全溶解，移入100ml容量瓶中，蒸馏水定容，摇匀，临用时逐级稀释至200 μg/L硒标准工作溶液。②硼氢化钾溶液。称取硼氢化钾20 g溶于500 ml 10 g/L的氢氧化钾溶液中，定容至1 L,配成20g/L，临用前现配。③三氯化铁溶液。称取 FeCl3·6H2O 50 g溶于100 ml 10%（体积分数）盐酸溶液中，定容至1 L。

1.2 仪器工作条件

AFS条件：光电倍增管负高压260 V，灯电流 60 mA，载气流量为 400ml/min，屏蔽气流量为900 ml/min，原子化器高度 8 mm，原子化温度 800℃，读数时间10 s，延迟时间1.2 s，读数方式为峰面积， 测定方式为标准曲线法。

微波消解程序：功率为800 W；5 min内升温至80 ℃，保温3 min；5 min内升温至120 ℃，保温5 min；5 min内升温至150 ℃，保温8 min，之后仪器自动降温，等待30 min以上，温度低于30 ℃，消解完成。

1.3 试验方法

1.3.1 样品处理。

取新鲜黄蘑菇250 g，经水清洗，晾干表面水分，用打浆机打为浆液。

分别取以上浆液10 ml于7个压力消解罐，加3 ml硝酸和1 ml高氯酸，盖上压力罐盖，拧紧解压阀，置于相配套的消解罐架上，把消解罐架放在微波消解器内进行消解，消解完成后取出消解罐，将溶液转入至干净100 ml烧杯中，置电热板（150 ℃），再继续加热至剩余体积5 ml左右，冒出大量白烟，不可蒸干，冷却，加入6 mol/L盐酸溶液10 ml，冲洗杯壁，再置于电热板上加热并保持微沸3~5 min，使硒（Ⅵ）完全还原成硒（Ⅳ），冷却，蒸馏水吹洗杯壁，转移至25 ml比色管中，加浓盐酸2.0 ml，50 g/L三氯化铁溶液2.0 ml。定容至刻度，摇匀待测，同时做空白试验。

1.3.2 标准曲线的绘制。移取浓度为200 μg/L硒标准工作溶液 0、0.25、0.50、2.50、5.00、7.50、10.00ml于100 ml容量瓶中，用水冲壁，分别加浓盐酸10 ml，50g/L三氯化铁溶液8 ml，以水定容，混匀。配成0、0.5、1.0、5.0、10.0、15.0、20.0 │蘥/L。在仪器工作条件下对系列标准溶液、待测溶液和空白进行测定。

1.3.3 消解温度的选择。

试验用硝酸和高氯酸进行消化，

消化过程中，较高的温度使样品中的硒以硒（Ⅵ）形式存在，而硼氢化钾与硒（Ⅵ）反应生成硒化氢，而硒属于易挥发元素，温度高于150 ℃会有损失［6］，所以，消化温度不宜过高；温度过低则消解不完全。因此，试验最高温度控制在150 ℃，并用6 mol/L盐酸溶液于150 ℃加热3 min，以保证待测样品中硒（Ⅵ）完全还原为（Ⅳ）。

1.3.4 载流酸度和还原剂浓度的选择。

样品测定中，所用的载流为5%~10%（体积分数）盐酸溶液，在此酸性介质条件下荧光强度大而且稳定，酸度的适当增加可以减小基体中过渡金属离子的干扰，所以选择10%盐酸溶液做载流为佳。

硼氢化钾作为氢化物发生器中的还原剂，其浓度直接影响荧光强度，浓度过低反应中产生的硒化氢浓度过低，荧光强度小，方法的灵敏度低。浓度过高，反应产生的氢气过多，对所产生的硒化氢具有稀释作用，引起荧光强度减小，降低了测量精度。经过多次试验，硼氢化钾质量浓度为20g/L 时（5 g/L KOH为介质）荧光强度最大，所以该试验选择硼氢化钾质量浓度为20 g/L 。

1.3.5 干扰物的掩蔽。

由于样品消化后，含有较多的微量金属元素，有些金属离子可使硒的荧光淬灭，所以在待测溶液中加50 g/L 三氯化铁溶液2 ml，Fe3+掩蔽共存金属离子的干扰，以增强荧光强度。加浓盐酸2 ml以保证待测溶液的酸度在10%左右。

2 结果与分析

2.1 样品分析

按试验方法对市售当地鲜黄蘑菇进行样品分析，于25 ml比色管中平行测定7次，结果见表 1。由表1中7次平行测定结果可得到鲜黄蘑菇样品中硒的平均质量分数为0.131 μg/g，相对标准偏差（玭= 7)为2.18% ，检出限为0.020 μg/L 。

2.2 标准曲线和检出限

按仪器的工作条件对硒标准系列进行测定，以硒的荧光强度对其相应的质量浓度绘制标准

お

表1样品分析结果（玭=7）

编号 测定值う蘥/L测定体积ml 质量分数う蘥/g 玆SD%

1 5.09 25.0 0.127 2.18

2 5.15 25.0 0.139

3 5.23 25.0 0.131

4 5.40 25.0 0.135

5 5.37 25.0 0.134

6 5.17 25.0 0.129

7 5.26 25.0 0.132

曲线。试验得出，硒的质量浓度在20 μg/L以内呈线性关系，线性回归方程为獻=17.11×C+2.82,相关系数R为0.999 5。

3 讨论

该试验采用新鲜黄蘑菇直接打成浆液后经硝酸和高氯酸微波消解,省去样品的烘干、粉碎、过筛等冗长的处理过程，降低了在此过程中样品沾污的可能性。用氢化物发生-原子荧光光谱法测定消解液中硒的含量，该测试方法简单、快捷、稳定性较好。依据富硒食品含量分类标准（DB6124.01-2010）食用菌干基硒含量范围0.10~10.00 mg/kg，湿基硒含量范围0.05~5.00 mg/kg，该试验得出鲜黄蘑菇中平均硒含量为0.131 μg/g，在其湿基标准范围之内。

参考文献

［1］ 徐叔云.药理实验方法学［M］.2版.北京：人民卫生出版社,1992:1885-8561.

［2］ 黄敏文.梅州地区几种蔬菜中硒含量的初步调查［J］.广东微量元素科学,2008,15(10):41-43.

［3］ ZIEGLER E E,FILER L J Jr.Prensent knowledge in utrition［M］. Washington, D C:International Life Science Institute,1996:310.

［4］ MOGHADASZADEH B,BEGGS A H.Selenopro瞭eins and their impact on human health through diverse physiological pathways［J］.Physiology(Bethesala),2006,21(5):307-315.

［5］ BARCELOUX D G.Selenium［J］.J Toxicol Clin Toxicol,1999,37(2):145-172.

［6］ 谢华林，微波消解-原子荧光光谱法测定蘑菇中痕量硒的研究［J］.食品科技,2002,23(11):108-110.