广西壮族3例肯尼迪病患者的临床特征及基因突变☆

高文 邱小鹰 刘竞丽 陈红 杨明秀 廖书胜

广西壮族3例肯尼迪病患者的临床特征及基因突变☆

高文*邱小鹰*刘竞丽△陈红*杨明秀*廖书胜*

目的 研究广西壮族肯尼迪病患者的基因突变及临床特征。方法收集2个壮族肯尼迪病家系共3例患者的临床表现、生化、神经电生理、病理等临床资料；运用基因分析的方法,明确家系先证者雄激素受体(androgen receptor,AR)基因第1号外显子CAG序列的重复数。结果3例肯尼迪患者均中青年起病，缓慢进展，表现为四肢乏力，无感觉异常、姿势性震颤及乳房发育；2例患者睾酮升高，肌酶中度升高；肌电图呈神经源性损害电生理改变，感觉神经传导均未见异常；2个肯尼迪病家系的AR基因第一号外显子CAG重复数分别为：53、54。结论广西壮族肯尼迪病患者具有明显的临床及遗传异质性，雄激素受体基因检测可以作为肯尼迪病诊断的可靠依据。

肯尼迪病 运动神经元病 肌萎缩 睾酮

肯尼迪病（Kennedy disease）又称脊髓延髓肌肉萎缩症（spinal and bulbarmuscular atrophy），是一种X连锁隐性遗传的神经系统变性疾病，是由于雄激素受体(androgen receptor,AR)基因1号外显子的CAG重复序列的异常扩增所致。1968年由Kennedy等[1]首先报道，并于1991年由La Spada等[2]明确了该病的基因缺陷。肯尼迪病临床特点为成年男性起病，下运动神经元损害为主，伴感觉及内分泌系统改变。欧洲神经科学联合会（European Federation of Neurological societies,EFNS）指南[3]将患者AR基因外显子1的CAG重序列数目≥35次定为诊断肯尼迪病的依据。本文报道壮族肯尼迪病患者，并对其临床特点进行分析。

1 对象与方法

1.1 研究对象3例均为广西壮族患者，分别就诊广西柳州市人民医院及广西医科大学第一附属医院，其中病例Ⅰ与病例Ⅱ来自同一家族，病例Ⅲ为散发病例，病例Ⅰ与病例Ⅲ为住院患者，病例Ⅱ为门诊患者。3例均经过详细的病史询问及体格检查，2例住院患者进行了生化等相关检测及神经电生理检查，病例Ⅲ进行了神经-肌肉活检检查。

1.2 雄激素受体基因第1外显子中的CAG重复次数测定在经过患者同意并签署知情同意书后，用EDTA抗凝管抽取患者外周血4ml，用QIAGEN DNA Blood Min Kit试剂盒提取患者外周血白细胞DNA，在扩增型耐热DNA聚合酶等存在的条件下应用PCR技术扩增雄激素受体基因第1外显子中的CAG重复片段，引物序列为KDF（5＇GCTGTGAAGGTTGCTGTTCCTCAT 3＇）和（5＇TCCAGAATCTGTTCCAGAGCGTGC 3＇），将上游引物5端作FAM标记，所得的PCR产物分别去离子甲酰胺混合，经过变性后用ABI3130测序仪进行毛细血管电泳，然后用ABIGeneMapperID3.0收集片段信息，通过对比推断患者样本的CAG重复数。（此部分在广州金域公司完成）。

2 结果

2.1 临床特征3例患者临床表现为中青年男性起病，缓慢进展，首发症状为四肢乏力，近端明显，逐步出现四肢肌肉萎缩，痛性痉挛，后期出现延髓肌肉萎缩，3例患者均无乳房发育、姿势性震颤及感觉异常。神经系统检查提示：下运动神经元损害表现，伴肌肉萎缩，腱反射减弱或消失，3例患者感觉系统无异常(见表1)。所检两例患者肌酸激酶均中度升高，肌酸激酶同工酶轻度升高，睾酮升高（见表2）。所检两例患者神经电生理检查提示广泛神经源性损害，但感觉神经传导速度未见异常。病例Ⅲ的股四头肌活检提示：肌萎缩改变（见图1）。

2.2 AR第1外显子中的CAG重复次数所检两例患者AR第1号外显子CAG重复数分别为：病例I：54次（图2）；病例Ⅲ53次（图3）。

3 讨论

表1 肯尼迪病患者3例的临床症状及体征

表2 肯尼迪病患者2例生化结果

肯尼迪病的临床特点为：四肢近端肌无力，肌肉萎缩，可伴有痛性痉挛、姿势震颤[4-5]、男性乳房发育和生殖功能下降；颜面，舌肌萎缩、震颤[6]；可有感觉异常[7]；血清肌酶水平升高，尿酸升高及脂代谢异常[8]。肌肉活检表现为神经源性肌萎缩和肌纤维群组化现象[9]，偶见肌源性损害[10]。本研究中的壮族肯尼迪病患者具备部分典型的临床表现，但对比其他民族患者，3例壮族患者的特点在以下方面：①在临床表现方面：针对日本人[4]和巴西人的研究[5]发现姿势震颤是肯尼迪病的一种常见的初始症状，且对酒精及心得安反应良好。一项针对12例[11]法兰西人肯尼迪病患者的研究发现所有均具有乳房发育；针对中国其他民族的肯尼迪病研究报道33.3%的患者有男性乳腺发育。而本研究中三例壮族患者均无震颤及乳房发育，有别于其他民族。②在性激素异常方面，本组研究中所检两例患者睾酮均升高；而国内其他民族相关研究[9]中发现血清睾酮(T)、雌二醇(E)、黄体生成素(LH)和卵泡刺激素(FsH)的水平与健康者均值比较差异无统计学意义；国外尚未见相关报道。③在神经电生理方面：中国其他民族[12-13]等研究发现：肯尼迪病患者肌电图表现为神经源性改变，运动神经传导正常或异常，感觉神经传导存在明显异常；国外Rhodes LE等[14]报道的病例所有的感觉神经动作电位均降低；而本研究中的患者运动神经检测部分异常，但感觉神经传导均未见异常。造成此种差异的原因有待进一步研究，但可能与种族，CAG重复次数有关，此外还可能跟DNA甲基化，转录因子的乙酰化基因修饰以及环境等因素有关。

图1 病例Ⅲ股四头肌活检图见肌纤维萎缩、变性，肌间纤维脂肪组织增生，局部灶性淋巴细胞、嗜酸性粒细胞浸润，符合肌萎缩改变（HE染色100×）

图2 病例I的AR第1外显子CAG重复次数（54次）

图3 病例Ⅲ的AR第1外显子CAG重复次数（53次）

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A

2014-03-20）

（责任编辑:李立）

10.3936/j.issn.1002-0152.2014.11.010

☆ 国家自然科学基金（编号：81260177）

* 广西柳州市人民医院神经内科（柳州545006）△广西医科大学第一附属医院神经内科