健脾益胃汤对慢性萎缩性胃炎模型大鼠血清胃泌素和血浆胃动素的影响

2014-04-18王杰盛权朱虹孙峰丁懿

江苏中医药 2014年2期

关键词：胃动素腺体萎缩性

王杰盛权朱虹孙峰丁懿

（扬州大学医学院，江苏扬州 225001）

健脾益胃汤对慢性萎缩性胃炎模型大鼠血清胃泌素和血浆胃动素的影响

王杰盛权朱虹孙峰丁懿

（扬州大学医学院，江苏扬州 225001）

目的：探讨健脾益胃汤对慢性萎缩性胃炎大鼠的治疗机制。方法：将大鼠随机分为正常对照组、模型组、健脾益胃汤低剂量组（JPYW-L）、健脾益胃汤中剂量组（JPYW-M）、健脾益胃汤高剂量组（JPYW-H）和阳性药物（维酶素）对照组。除正常对照组外，其余各组大鼠均采用水杨酸钠法制作慢性萎缩性胃炎模型。造模成功后分别灌服蒸馏水或相应药物，连续8周。观察大鼠胃黏膜的组织病理学改变，酶联免疫吸附法（ELISA）检测血清胃泌素（GAS）和血浆胃动素（MTL）。结果：健脾益胃汤高、中剂量组与模型组相比，大鼠胃黏膜损伤均有不同程度的改善；健脾益胃汤中、低剂量组与模型组相比，血清GAS含量均明显升高，血浆MTL含量均明显降低。结论：健脾益胃汤能改善大鼠胃黏膜的病变，其可能的作用机制为对血清GAS、血浆MTL水平的调整。

慢性萎缩性胃炎健脾益胃汤胃泌素胃动素病理学实验研究

慢性萎缩性胃炎（CAG）是消化系统的常见病、多发病，是胃癌癌前状态之一。运用中医药治疗CAG是延缓或阻断其向胃癌发展的有效手段。因此，探讨运用中医中药预防和治疗慢性萎缩性胃炎，对于CAG癌变的干预阻断和胃癌的一级预防有着重要意义。健脾益胃汤是南京中医药大学王灿晖教授在明确CAG的发病机制和确立CAG的治疗方法基础上，自拟的治疗CAG的基本方，临证运用该方治疗CAG患者，可以明显缓解患者的临床症状，收到了满意的治疗效果。本研究在建立大鼠慢性萎缩性胃炎模型的基础上，观察健脾益胃汤对大鼠血清胃泌素和血浆胃动素水平的影响，以探讨其对CAG的治疗机制。

1 实验材料

1.1 动物健康SPF级SD大鼠55只，雌雄不拘，体重（201.75±41.11）g，上海市西普尔-必凯实验动物有限公司提供，许可证号：SCXK（沪）2008-0016。

1.2 药品及试剂健脾益胃汤，药物组成：太子参15g，淮山药12g，焦白术10g，茯苓12g，石斛12g，川朴花8g，八月札10g，鸡内金10g，白花蛇舌草20g，莪术10g。中药材均由江苏省苏北人民医院中药房提供，口服液由江苏省人畜共患病学重点实验室制剂，药物浓度为每毫升含生药2g，置于250mL盐水瓶中，4℃保存备用。阳性对照药物以蒸馏水溶解维酶素片，备用。GAS试剂盒和MTL试剂盒均购自扬州科能生物技术有限公司。维酶素片由湖北绿金子药业有限责任公司生产，产品批号：130102。

1.3 仪器低速离心机：TDZ4A-WS型，湖南湘仪实验室仪器开发有限公司。酶标仪：ELX808型，美国伯乐公司。

2 实验方法

2.1 动物模型的制备55只大鼠购回后，饲养于室温18～22℃环境中，自由饮水饮食1周。参考文献[1]的方法，以水杨酸钠法制作大鼠慢性萎缩性胃炎模型：将造模组大鼠以2%水杨酸钠溶液3mL/（次·d）灌胃，灌胃前后2h内禁食、禁水，连续6周。前3周自由进食、进水；后3周单日禁食，自由饮水，双日足量喂食，自由饮水。隔日在温水中游泳1次，约15min。6周后完成模型制作。

2.2 分组与给药按随机数字法将大鼠分为正常对照组、模型组、健脾益胃汤低剂量组（JPYW-L）、健脾益胃汤中剂量组（JPYW-M）、健脾益胃汤高剂量组（JPYW-H）、阳性药物（维酶素片）对照组。各治疗组均从实验开始第8周起，每天灌胃给予相应药物：健脾益胃汤低剂量组0.6mL/次，健脾益胃汤中剂量组1.1mL/次，健脾益胃汤高剂量组2.2m L/次，阳性药物对照组1.1mL/次。每日1次，连续8周。正常对照组及模型组均给予等量蒸馏水灌胃，1.1mL/次，每日1次。

2.3 指标检测

2.3.1 取材最后一次给药后，禁食24h，麻醉状态下，颈动脉取血5mL，平均分置于普通试管和EDTA抗凝试管中。各试管常温静置2h后离心，3000r/m in，15min，于-20℃保存待用。处死大鼠，剖腹取出全胃，沿大弯侧切开，生理盐水冲洗，取1.0cm×1.0cm大小组织块，甲醛固定。

2.3.2 血清胃泌素（GAS）、血浆胃动素（MTL）检测血清GAS、血浆MTL均采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测，按试剂盒中提供的操作说明进行。

2.3.3 病理形态学观察常规石蜡包埋切片，HE染色，光镜下观察胃黏膜组织学变化情况。

2.4 统计学方法采用SPSS15.0统计软件进行统计学分析。所有计量资料均用（x±s）表示。多组均数之间比较采用单因素方差分析，两两比较用LSD检验。

3 实验结果

3.1 一般状况正常对照组大鼠的一般状况良好，纳食正常，肌肉丰满。模型组大鼠出现精神萎靡，食欲下降，体重减轻，毛发干枯、失去光泽，大便稀溏等表现。各治疗组大鼠在实验过程中，均出现不同程度的精神好转，食欲转佳，症状均较模型组轻，且体重增加，其中以健脾益胃汤中剂量组改善最为明显。

3.2 大鼠胃黏膜病理变化

3.2.1 肉眼观察正常对照组大鼠胃黏膜呈粉/淡红色，表面沟回明显、平滑光泽，胃肌层丰厚。模型组大鼠胃黏膜呈暗红或灰白色，胃肌层可见显露的血管，表面沟回变浅、失去光泽，偶见大鼠胃黏膜溃疡病灶。各治疗组大鼠胃黏膜表面均较模型组好转。

3.2.2 光镜观察正常对照组大鼠胃黏膜腺体排列整齐紧密，未见胃黏膜坏死、腺体萎缩、肠化生及异常等病变。模型组大鼠胃黏膜腺体大小不一，结构紊乱，腺体萎缩。阳性药物对照组大鼠胃黏膜腺体排列欠规则，胃腺体轻度囊性扩张。健脾益胃汤高剂量组大鼠胃黏膜腺体排列欠规则，出现少量的胃腺体壁变薄、萎缩，胃腺体囊性扩张，偶见胃黏膜坏死。健脾益胃汤中剂量组大鼠胃黏膜腺体排列规则，未见明显胃黏膜坏死，可见个别腺体轻度萎缩。健脾益胃汤低剂量组大鼠胃黏膜腺体排列不规则，有较多的胃腺体壁变薄、萎缩，胃腺体腔囊性扩张。见图1。

图1 各组大鼠光镜下胃黏膜情况（HE，×200）

3.3 药物对CAG模型大鼠血清GAS、血浆MTL的影响见表1。

表1 各组大鼠血清GAS、血浆MTL含量比较（±s）

注：与正常对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与模型组比较，△P＜0.05，△△P＜0.01；与阳性药物对照组比较，#P＜0.05；与健脾益胃汤高剂量组比较，●●P＜0.01；与健脾益胃汤中剂量组比较，○P＜0.05，○○P＜0.01。

4 讨论

CAG是慢性胃炎的一种类型，是指因不同病因引起的呈局限性或广泛性的胃黏膜固有腺体萎缩，数目减少，功能减低，胃黏膜肌层增厚，胃黏膜变薄[2]。胃黏膜中常见有肠上皮化生、假幽门腺化生及不典型增生。自1980年“WHO专家会议”对“胃癌前病变的组织学定义”规定以来，由慢性胃炎→胃黏膜萎缩肠化→异型增生→胃癌这一病变演化模式过程已为国内外众多学者所认同[3]。但对于CAG的治疗，目前仍以对症治疗为主要手段。

GAS是由胃窦部及十二指肠近端黏膜中G细胞分泌的一种胃肠激素，可以促进胃肠道的分泌功能，促进胃窦、胃体收缩，增加胃肠道的运动。GAS还能刺激胃泌酸腺区黏膜和十二指肠黏膜的DNA、RNA和蛋白质合成，从而促进其生长。胃泌素还具有细胞营养作用，胃泌素水平上升可导致上消化道黏膜血流量增加，胃黏膜细胞营养及增殖能力增加[4]。CAG患者由于腺体萎缩，G细胞数量减少，GAS分泌下降，则胃的分泌和胃运动功能都会受到影响。由于GAS分泌减少，胃黏膜进一步萎缩，形成恶性循环。模型组大鼠，由于饥饱失常和水杨酸钠的刺激，导致胃黏膜损伤，G细胞受损，GAS分泌减少。本实验模型组大鼠胃黏膜出现广泛的腺体壁变薄、腺体萎缩，因此血清GAS含量低于正常对照组。而健脾益胃汤组大鼠未见明显胃黏膜坏死，胃黏膜腺体排列规则，胃泌素含量升高，保证了对胃黏膜的营养作用，促进胃黏膜修复，改善黏膜微循环。

MTL是兴奋性胃肠激素，具有兴奋胃肠平滑肌的作用，能促进胃肠运动和胃排空的功能[5]。CAG模型大鼠胃腺体萎缩，组织变薄，从而使消化功能减弱，因而对胃动素的反应减弱，反馈性地引起胃动素的增加，致使血浆胃动素水平上升。健脾益胃汤通过降低CAG模型大鼠的血浆胃动素水平，调整胃肠激素，以产生正常的胃肠蠕动，促进胃的排空，促进食物的消化吸收。

慢性萎缩性胃炎属中医学“胃脘痛”、“痞满”、“嘈杂”等疾病范畴。王灿晖教授认为，外邪内侵，或饮食不洁/不节，或情志不畅，或脾胃虚弱，其单一或综合作用，终致中焦气机不利，升降失常而发为本病。脾虚胃弱、气机郁滞、胃络不和是CAG发生的基本病机，养胃阴、补脾气是治疗CAG的根本大法[6]。健脾益胃汤方中太子参味甘质润，长于益气补脾、生津养胃。山药、白术、茯苓益脾气，养胃阴，助运化；石斛养胃生津，能促进唾液、胃液分泌，助消化，加强肠蠕动。上述药物与太子参合用，其益气养阴、健脾助运之效更佳。川朴花、八月札行气宽中以止痛，厚朴煎液能刺激消化道黏膜引起反射性兴奋；鸡内金消食化积以助运；白花蛇舌草寒凉苦降以泄郁热，具有增强机体免疫功能和促进巨噬细胞活性的作用，能促进黏膜充血、水肿、糜烂的消退、愈合。白花蛇舌草对肿瘤细胞有较强的抑制作用，本方用此旨在预防CAG发生癌变。久病（痛）入络，故配莪术活血去瘀以通络，且具行气消积之功。诸药相伍，甘润平和，补而不滞，润而不腻，理气而不香燥，活血而不破散，可使脾运健而胃气和，郁热清而气阴复，气血畅而胃痛止[7]。

实验结果显示，模型组大鼠血清GAS含量低于正常对照组，血浆MTL含量高于正常对照组。而与模型组比较，健脾益胃汤中、低剂量组血清GAS含量均明显升高，血浆MTL含量均明显降低；健脾益胃汤低剂量组血清GAS含量低于中剂量组，血浆MTL含量高于中剂量组。说明血清GAS和血浆MTL的分泌在CAG的发生、发展中起着重要作用，经健脾益胃汤干预后，GAS含量较模型组显著升高，MTL含量较模型组显著降低，且以健脾益胃汤中剂量治疗效果为最佳。说明健脾益胃汤通过提高大鼠血清GAS含量，降低大鼠血浆MTL水平，达到促进G细胞分泌GAS，改善胃的分泌和运动，营养胃黏膜，促进黏膜修复，促进食物消化吸收的效果。这也可能是健脾益胃汤治疗萎缩性胃炎的作用机制之一，而其更深入的作用机制则有待进一步探讨。

[1]张淑芹，赵林山，郑继奎，等.慢性萎缩性胃炎动物模型的复制.哈尔滨师范大学自然科学学报，2001，17（6）：81

[2]陈灏珠.实用内科学（下册）.11版.北京：人民卫生出版社，2001：1737

[3]萧树东.江绍基胃肠病学.上海：上海科学技术出版社，2001：617

[4]朱方石，王良静，姒健敏，等.云母单体颗粒对萎缩性胃炎大鼠胃泌素、生长抑素及胃窦黏膜G，D细胞的影响.中国中药杂志，2004，29（6）：554

[5]高文强，王益琼，谭桂兰，等．平胃散对湿滞脾胃证大鼠血清胃动素胃泌素分泌的影响．中华中医药学刊，2010，28（7）：1470

[6]朱虹.王灿晖诊治慢性萎缩性胃炎学术思想探讨.江苏中医药，2012，44（7）：12

[7]南淑玲.王灿晖教授治疗慢性萎缩性胃炎思路探析.中国中医药信息杂志，2003，10（4）：74

编辑：吴宁

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