金雀花无菌扦插试验初探

史銮章，秦中华

（永胜县农产品质量安全检测中心，云南永胜 674200）

金雀花无菌扦插试验初探

史銮章，秦中华

（永胜县农产品质量安全检测中心，云南永胜 674200）

金雀花是一种很受群众喜爱的无公害保健珍稀野生植物，在永胜县有广泛分布及驯化栽培，开发潜力很大。传统繁殖方法繁殖金雀花繁殖系数低，周期长。而组织培养能短时间内获得大量苗木，且不受季节因素影响，可常年进行，因此进行金雀花的组织培养技术试验。试验表明，选用金雀花当年生幼嫩茎尖和茎段作为外植体都能诱导培养成功，在试验条件下外植体诱导培养以MS+NAA0.1mg/L+6－BA1/mg/L最适宜。

金雀花；组织培养；无菌扦插；试验研究

金雀花，本地名金孔雀花，学名锦鸡儿（Caraganasinica）。植物学分类为豆科，锦鸡儿属，落叶灌木，高可达2m，金雀花花形优美，色彩金黄，艳丽夺目，是一种无公害保健珍稀野生食花蔬菜，其味美清甜，风味独特，深受当地群众的喜爱，近年来还销往周边地区。随着人们生活水平不断提高，对无公害保健食品的需求日益强烈，无公害保健食品的开发和利用受到关注。而大面积种植，需要大量苗木。传统繁殖方法中，有性繁殖方法在永胜县并不适宜。无性繁殖中分株繁殖成活率高，进入开花较早，产生经济效益较快，但繁殖系数过低，不能短时间内培育出大量苗木；扦插繁殖成活也较高，但要2年以上才能开花，产生经济效益较慢，2种方法均受季节影响，也不能短时间培育大量苗木。组织培养技术是在室内进行的植物无性繁殖方法，技术先进，繁殖系数高，不受季节影响，能短时间培育大量苗木[1]。但要求有专门的实验设备、专业人员和相对较高的专业知识水平。

笔者对金雀花的组织培养技术进行了初步探索和研究，主要对其无菌扦插技术进行摸索，为其规模化发展提供技术支持。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验材料选用本地金雀花当年生幼嫩枝条。

1.2 培养基

采用琼脂固体培养基，基本配方为MS+白糖30 g/L，激素按试验设计配比，pH值5.8～6.2。

1.3 接种与培养条件

外植体按组织培养操作规程接种于相应培养基上，贴上标签，分类摆放在培养室的培养架上，定期观察生长情况，发现污染记录后拣出作报废处理。培养室温度23～28℃，光照强度1300lux，光照时间每天8h。

1.4 试验方法

1.4.1 外植体选择试验

在晴天上午采集金雀花当年生幼嫩枝条，要求生长正常、无病虫。采回的枝条剪去叶片，按保留1个腋芽的要求切取茎段和茎尖，将剪切好的金雀花外植体用清水冲洗3min后分别装入无菌瓶中，按组织培养操作规程进入无菌室，在超菌工作台上进行消毒处理。先用75%乙醇浸摇30s，再用无菌水冲洗3次，之后用0.1%的升汞溶液浸泡消毒25min，然后用无菌水冲洗8次，最后分别接入外植体诱导培养基，进行培养，观察其分化情况，确定选用外植体的优劣。培养基为MS+NAA0.1mg/L+6－BA1.0mg/L，每瓶接种1株外植体，茎段200瓶，茎尖100瓶。

1.4.2 诱导培养基选择试验

消毒处理好的茎段分别接种在3种不同激素水平的初代诱导培养基上，1水平：MS+NAA0.5mg/L +6－BA5mg/L；2水平：MS+NAA0.1mg/L+6－BA1 mg/L；3水平：MS+NAA0.05mg/L+6－BA0.5mg/L。每瓶接种1株外植体，每个激素水平接种100瓶，接种后放入培养室培养，观察分化情况，选择适宜的培养基激素配方。

2 结果与分析

2.1 外植体选择试验

由表1可见，茎尖和茎段2种外植体材料，在金雀花无菌快繁初代诱导培养中，诱导分化差异不明显。因此，茎尖和茎段都能诱导培养成功。只是在外植体材料的选用上，茎段材料选取容易，数量较多，消毒处理较茎尖容易，污染较少，污染及死亡率为10.5%，分化率稍低；而茎尖数量少，消毒处理相对难，容易导致死亡，污染及死亡率为18%，原因可能是茎尖幼嫩，处理时消毒药物对其伤害较深，破坏组织细胞，影响其分生能力。但茎尖是植物的生长顶端，内源激素较集中，因此较之茎段生长能力稍强，诱导培养分生能力强。

表1 外植体选择试验

2.2 诱导培养基选择试验

从表2可以看出，金雀花组织培养无菌扦插外植体诱导培养的培养基以MS+NAA0.1mg/L+6－BA1 mg/L较适宜，其次MS+NAA0.05mg/L+6－BA0.5mg/ L外植体分化能力也较强，而MS+NAA0.5mg/L+6－BA5mg/L配方分化率相对低，可能是添加外源激素浓度偏高，反而抑制其分化能力。

表2 诱导培养基选择试验

3 讨论

试验结果表明，金雀花通过组织培养技术进行无菌扦插是能成功的。外植体选用当年生幼嫩茎尖和茎段，均可培养成功；外植体诱导培养以MS+NAA0.1 mg/L+6－BA1mg/L和MS+NAA0.05mg/L+6－BA0.5 mg/L较适宜。本次试验研究范围窄，不全面，要掌握金雀花组织培养整套技术措施，还有许多方面要摸索，如增殖培养，生根培养，以及出瓶种植等。另外，试验仅是组织培养的初级阶段无菌扦插，其繁殖系数还不太高，还可以从愈伤组织的诱导分化、花药诱导等方面进行更加深入的研究。

[1]王连润，杨松光，刘家迅，等.接种与非接种菌根菌条件下蓝莓扦插苗生长差异比较[J].西南农业学报，2012，25（5）：1823－1826.

2013－10－11