颈复康颗粒的一板多信息薄层鉴别研究

董占军 韩桂茹 李 桂

(河北省人民医院药学部，河北 石家庄 050051)

制剂与质量控制

颈复康颗粒的一板多信息薄层鉴别研究

董占军 韩桂茹△李 桂

(河北省人民医院药学部，河北 石家庄 050051)

黄柏；葛根；白芍药；丹参；色谱法；薄层；分析

颈复康颗粒为部颁标准收载的品种，由黄芪、党参、丹参、白芍药、生地黄、石决明、威灵仙、葛根、黄柏、川芎、乳香、没药、羌活等21味中药组成。特点是药味多，每味药材的剂量低，而且还是提取制剂，影响了薄层鉴别增订，所以原标准项下仅收载了2味药材的薄层鉴别(黄柏和芍药苷)，无定量测定指标[1]。后被收入《中华人民共和国药典》2010年版一部，薄层鉴别修订为4项(黄柏、黄芪甲苷、芍药苷和丹参素钠)，并收载了葛根素的含量测定[2]。4项鉴别要制备4种供试品溶液，且制备程序繁琐、复杂，用时约12 h，花费对人体有害的溶剂430 mL。鉴别增订率仅19%，81%的药材难以控制投料情况，影响了制剂的可控性。虽查阅到该制剂中小檗碱、芍药苷、葛根素和芍药苷含量测定的文献报道[3-5]，但都未收入质量标准。未查阅到颈复康颗粒中多味药材的快速薄层鉴别研究。针对上述不足，我们对颈复康颗粒进行了一板多信息薄层鉴别研究，获得3块薄层板上鉴别9味药材鉴别结果，且斑点清晰。鉴别增订率提升到42.85%，制剂可控性提高。

1 材料与方法

1.1 药材及试剂 颈复康颗粒(承德颈复康药业集团有限公司，国药准字Z13022204，批号：290695)及处方中21味药材由市场药店购置；黄柏对照药材(批号：121510-200703)，葛根对照药材(批号：121551-200902)，丹参对照药材(批号：120923-200006)，白芍对照药材(批号：120905-200508)，川芎对照药材(批号：120918-200809)，乳香对照药材(批号：1209701-200403)，没药对照药材(批号：121250-200503)，羌活对照药材(批号：120935-200506)，黄芪甲苷对照品(批号：110781-200210)，均购自中国药品生物制品检定所。试验中用到的试剂、试药均为分析纯。

1.2 仪器 超声波震荡仪：KH-100B型超声波清洗器(昆山禾创超声仪器有限公司)；紫外光灯：ZF-2型三用紫外仪(上海市安亭电子仪器厂)。

1.3 方法

1.3.1 黄柏、葛根、白芍药与丹参的薄层鉴别 取本品3 g，研细，加甲醇5 mL，超声处理5 min，滤过，滤液作为供试品溶液。另取黄柏对照药材0.2 g，赤芍药和丹参对照药材各0.5 g，葛根对照药材0.3 g，分别加甲醇4 mL，超声处理10 min，上清液作为各自的对照药材溶液。吸取上述5种溶液各5～6 μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水(12∶2∶1∶0.5)为展开剂，展开，取出，热风吹干，置紫外光灯(365、254 nm)下检视和喷以5%的香草醛硫酸溶液-乙醇(1∶6)的混合溶液，105 ℃加热显色后，日光下检视。

1.3.2 川芎、乳香与没药的薄层鉴别 取本品5 g，研细，加乙醚20 mL，超声处理10 min，滤过，滤液挥干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。另取川芎、乳香与没药对照药材各0.3 g，分别加甲醇4 mL，超声处理10 min，上清液作为对照药材溶液。吸取对照药材溶液各3 μL，供试品溶液5～6 μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以环己烷-醋酸乙酯-甲酸(9∶1.5∶0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365、254 nm)下检视和喷以5%的香草醛硫酸溶液-乙醇(1∶6)的混合溶液，105 ℃加热显色后，日光下检视。

1.3.3 羌活与黄芪甲苷薄层鉴别 取本品5 g，研细，加60%甲醇25 mL，超声处理10 min，滤过，滤液挥去甲醇，残留液加水15 mL，用水饱和的正丁醇25 mL萃取，分取正丁醇层，用0.2%氢氧化钠溶液15 mL洗涤，正丁醇层蒸干，残留物加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。另取黄芪甲苷，加甲醇制成每mL含0.3 mg的溶液，作为对照品溶液。再取羌活对照药材0.5 g，加甲醇4 mL，超声处理10 min，上清液作为对照药材溶液。吸取对照品溶液5 μL、供试品溶液5～8 μL、对照药材溶液3 μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以氯仿-甲醇-水-甲酸(12∶4∶0.5∶0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365 nm)下检视和喷以10%的硫酸乙醇溶液，105 ℃加热显色后，紫外光灯(365 nm)下检视。

2 结 果

2.1 黄柏、葛根、白芍药与丹参的薄层鉴别 置紫外光灯(365 nm)下检视，供试品色谱中，在与黄柏对照药材色谱相应的位置上，显2个相同颜色的荧光主斑点(见封3，图1)；置紫外光灯(254 nm)下检视，供试品色谱中，在与葛根对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色主斑点(见封3，图2)；再喷以5%的香草醛硫酸溶液-乙醇(1∶6)的混合溶液，热风吹至斑点显色清晰，随即观察，供试品色谱中，在与丹参和赤芍药对照药材色谱相应的位置上，分别显相同颜色的主斑点(见封3，图3)。阴性样品无干扰，鉴别专属。

2.2 川芎、乳香与没药的薄层鉴别 置紫外光灯(365 nm)下检视，供试品色谱中，在与川芎对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光主斑点(见封3，图4)；置紫外光灯(254 nm)下检视，在与没药对照药材色谱相应的位置上，显一个相同颜色主斑点(见封3，图5)；再喷以5%的香草醛硫酸溶液-乙醇(1∶6)的混合溶液，热风吹至一个紫红色斑点呈现，供试品色谱中，在与乳香对照药材色谱相应的位置上，显一个相同颜色的斑点(见封3，图6)，继续加热，颜色斑点增多，且紫红色斑点渐变为兰紫色(见封3，图7)。阴性样品无干扰，鉴别专属。

2.3 羌活与黄芪甲苷薄层鉴别 置紫外光灯(365 nm)下检视，供试品色谱中，在与羌活对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光主斑点(见封3，图8)；再喷以10%的硫酸乙醇溶液，105 ℃加热至斑点显色清晰。置紫外光灯(365 nm)下检视，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点(见封3，图9)。阴性样品无干扰，鉴别专属。

3 讨 论

3.1 实现了一板多信息鉴别，所增订的9味药材，在3块薄层板上完成。样品和对照药材的前处理时间约2 h，花费有机试剂110 mL。与原标准相比，在鉴别药味增加125%的情况下，处理时间与试剂反而节约了83.3%和74.4%。简便、快捷、斑点清晰，为薄层鉴别的提速、节资、降低环境污染做出了示范。

3.2 本薄层鉴别的特点是：依据中药化学成分性质，通过薄层展开后，各成分分别被吸附和解吸附在薄层板的不同层次上，在各自的检视条件，呈现各自不同的荧光和颜色信息斑点，分离良好，呈现了一板多层次多种药材信息。如第1块薄层板上，在第1层次上(紫外光365 nm下)检视小檗碱类的黄绿色荧光斑点；在第2层次上(紫外光254 nm下)检视葛根的荧光熄灭斑点；在第3层次上，喷雾香草醛硫酸溶液显色后，日光下检视丹参的粉红色斑点和白芍药的蓝紫色斑点。第2块薄层板上，第1层次上(紫外光365 nm下)检视川芎的亮兰色荧光斑点；在第2层次上(紫外光254 nm下)检视没药的荧光熄灭斑点；在第3层次上，喷雾香草醛硫酸溶液显色后，日光下检视乳香的颜色斑点。在第3块薄层板上，在第1层次上(紫外光365 nm下)检视羌活的纯兰色荧光斑点；喷雾10%硫酸乙醇溶液显色后，在第2层次上(紫外光365 nm下)检视黄芪甲苷的橙色荧光斑点。各层次上的斑点清晰，互不干扰。

3.3 乳香和没药均为橄榄科植物分泌的树脂类，具有类似的理化性质，与香草醛硫酸乙醇溶液反应，都会形成多种不同的颜色斑点，难以将两者区分。本鉴别利用没药在紫外光254 nm下专属的荧光熄灭斑点和乳香与香草醛硫酸乙醇溶液显色后的紫红色斑点，将两者区分，简便、快捷、专属，为首次报道。

3.4 大处方小剂量组方的中药提取制剂，要提升薄层鉴别的增订率，提高制剂的可控性，同时使鉴别速度与机械化生产速度相匹配，就必须突破目前一样、一板、一药材的鉴别模式，实现薄层鉴别的高效率、多信息、多药味。对此，本研究提供了一些初探思路，以供同仁参考。

[1] 中华人民共和国药典委员会.中华人民共和国卫生部药品标准(中药成方制剂)：第 18册[S].北京，1998：322.

[2] 中华人民共和国药典委员会.中华人民共和国药典：2010年版一部[S].北京：中国医药科技出版社，2010：1138.

[3] 李守拙.颈复康冲剂中小檗碱含量测定方法的探讨[J].中草药，1993，24(2)：75-76.

[4] 李云霞.薄层扫描法测定颈复康冲剂中芍药甙含量[J].中国中药杂志，1994，19(11)：674.

[5] 张科卫，李伟，崔小兵，等.HPLC法测定胃康灵胶囊中芍药苷和甘草苷[J].中草药，2006，37(12)：1821-1822.

(本文编辑：董军杰)

董占军(1965—)，男，主任药师，硕士。从事中药检验及质量标准研究。

R282.71；R287

A

1002-2619(2014)01-0107-02

2013-06-03)

△ 通讯作者：河北省食品药品检验院保健食品科，河北 石家庄 050011