浙北地区过敏性疾病患者过敏原检测结果分析

黄 佳 胡丽华 华海飞 潘 露 林 峰

·技术与方法·

浙北地区过敏性疾病患者过敏原检测结果分析

黄 佳 胡丽华 华海飞 潘 露 林 峰

目的: 明确浙北地区过敏性疾病患者的过敏原种类。方法: 采用免疫印迹法，对该地区1809例过敏性疾病患者的血清进行吸入性过敏原和食入性过敏原检测。结果: 浙北地区吸入性过敏原和食入性过敏原阳性率分别为87.7%和46.2%。结论: 浙北地区以吸入性过敏原为主。

过敏性疾病； 过敏原； 免疫印迹法

为了解浙北地区过敏性疾病过敏原情况，对1809例于2010年8月至2012年11月来我院就诊的过敏性疾病患者进行过敏原分析，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 1809例过敏性疾病患者，其中女1127例(62.3%)，男682例(37.7%)，年龄1～83岁，平均33.24岁。疾病包括荨麻疹、湿疹、特应性皮炎、过敏性鼻炎、哮喘。所有病例均经临床确诊。除外因压力、日光、寒冷、运动等物理因素和药物所致的荨麻疹，无全身系统性疾病的损害，如结缔组织病、病毒感染、细菌感染等，排除妊娠及哺乳期妇女。所有患者血液标本采集前均停用长效抗组胺药1周以上，短效抗组胺药3天以上，糖皮质激素或免疫抑制剂1个月以上。

1.2 方法 对所有的过敏性疾病患者静脉采血5 mL，离心后取血清进行免疫印迹法检测，试剂采用MEDIWISS Analytic GmbH公司生产的AllergyScreen过敏原诊断试剂。吸入性过敏原包括尘螨(粉尘螨、户尘螨)、草组合(矮豚草、蒿草)、猫狗毛皮屑、蟑螂、霉菌组合(点青霉、交链孢霉、烟曲霉、分枝孢霉)、树组合(柏树、榆树、梧桐、柳树、三角叶杨)、葎草。食入性过敏原包括鸡蛋、牛奶、鱼虾蟹、牛羊肉、坚果(腰果、花生、黄豆)、芒果、小麦。

1.3 操作步骤 严格按照试剂说明书进行操作。(1)将试剂恢复到室温(20～22℃)，用经蒸馏水以1∶25稀释的洗脱液湿润硝酸纤维素膜；(2)弃去洗脱液，在检测板上加入250μL的血清标本，在混匀器上室温孵育45 min；(3)冲洗后加入250μL抗抗体，在混匀器上室温孵育45 min；(4)冲洗后加250μL链霉亲和素标记物，在混匀器上室温孵育20min；(5)冲洗后加入250μL底物，在混匀器上室温孵育20 min，发生颜色反应；(6)流水冲洗终止底物酶反应。

1.4 结果观察 对于每种过敏原，试剂条上颜色的深浅同患者血清中的特异性IgE抗体含量成正比。完全干燥后将试剂条插入Rapidreader阅读仪上读取结果，连接计算机即可进行量化分析。

1.5 结果判断 阳性对照(质控线)均为紫色，呈阳性反应。检测结果分成0～6级:(1)把过敏原特异性IgE＜0.35 IU/m L，定为阴性反应，为0级；(2)＞0.35 IU/mL定为阳性反应，其中0.35～0.69 IU/mL为1级(低)；0.70～3.49 IU/mL为2级(增加)；(3)＞3.5 IU/ mL，定为强阳性反应；3.50～17.49 IU/mL为3级(显著增加)；(4)17.50～49.90 IU/m L为4级(高)；(5) 50～100 IU/mL为5级(较高)；(6)＞100 IU/mL为6级(极高)。

1.6 统计学方法 所有数据经SPSS 21.0统计软件分析，组间差异采用卡方检验，P＜0.05为有统计学意义。

2 结果

2.1 过敏原检测情况 见表1。1809例过敏性疾病患者中过敏原阳性者881例，占48.7%，其中吸入性过敏原阳性474例，占26.2%，食入性过敏原阳性108例，占6.0%，两组均阳性299例，占16.5%。吸入组过敏原阳性率高于食入组，两组比较差异有统计学意义(P＜0.05)。

表1 1809例过敏原检测情况

2.2 吸入性和食入性过敏原检测阳性情况 见表2和表3。在吸入性过敏原中，尘螨(粉尘螨、户尘螨)的阳性率最高，占31.2%，其余依次为蟑螂、草组合(矮豚草、蒿草)、树组合(柏树、榆树、梧桐、柳树、三角叶杨)、葎草、霉菌组合(点青霉、交链孢霉、烟曲霉、分枝孢霉)和猫狗毛皮屑，阳性率依次为13.1%、12.9%、9.7%、9.1%、6.7%和4.5%。在食入性过敏原中，以牛奶、小麦、坚果(腰果、花生、黄豆)、芒果为主，阳性率分别为9.9%、9.6%、9.2%、8.7%，鱼虾蟹、鸡蛋(鸡蛋白、鸡蛋黄)和牛羊肉的阳性率比较低，分别为3.9%、2.6%和1.3%。

2.3 同一患者可多种过敏原同时阳性 过敏性疾病可能是由1种过敏原引起，也可以是由2种或2种以上过敏原引起。同一患者同时多种过敏原阳性情况见表4。881例阳性患者中，对2种及以上过敏原有阳性反应有472例，占53.6%。

表2 吸入性过敏原检测情况

表3 食入性过敏原检测情况

2.4 不同季节过敏原情况 各季节吸入性过敏原的阳性率有区别，见表5。尘螨、草组合、猫狗毛皮屑、蟑螂和霉菌组合在夏秋季阳性率比春冬两季高，树组合和葎草阳性率则在春夏两季较高。

表4 同一患者同时多种过敏原阳性情况

表5 不同季节吸入性过敏原的情况

3 讨论

过敏性疾病病因复杂，发病机制中包括变态反应和非变态反应。IgE水平和细胞因子的变化一直是研究中的重点。通过特异性的IgE抗体检测可帮助寻找过敏原。IgE抗体是亲细胞性抗体，当机体遇到同一抗原时，则在肥大细胞表面发生抗原－抗体反应，引起肥大细胞等脱颗粒反应，释放化学介质，导致各种相应临床表现。

资料显示，浙北地区1809例过敏性疾病患者中过敏原阳性者881例，占48.7%。过敏原阳性者以吸入性过敏原为主，其中排前3位的是尘螨(31.2%)、蟑螂(13.1%)、草组合(12.9%)，与国内报道基本相符。1浙北地区气温适中、雨水充沛、空气湿润，非常适合尘螨的滋生和蟑螂的繁殖。食入性过敏原以牛奶、小麦、坚果为主。小麦的阳性率高于其他地区，与国内报道不一致，2这可能与浙北地区是浙江小麦的主产区有关，对小麦的接触机会比其他地区多。

资料显示，同一患者可同时多种过敏原呈阳性，对3种及以下过敏原呈阳性反应的占75.1%，与当前国内报道基本相符，3提示大多数患者对多种过敏原呈阳性反应。可能是由于存在同时致敏，或者反应过程中许多炎症因子及相关分子表达上调，患者处于高敏状态，增加了新过敏原致敏的可能性；也可能是由于交叉过敏的存在，所以当一种过敏原致敏后，再接触含有相同致敏蛋白质序列的物质也容易发生过敏。因此，患者可同时对多种变应原过敏，这种现象也提示单一变应原脱敏治疗效果不佳的原因。4

资料显示，吸入性植物过敏原中，草组合的阳性率在夏秋季较高，5树组合、葎草的阳性率在春夏季较高，这与其各自的花期有关。草组合中的矮豚草花期在7～9月底、蒿草的花期在春末夏初。树组合中的各树木花期在3～7月，葎草的花期在6～10月。这时期花粉随风飘在空气中，极易诱导过敏者产生过敏反应。

AllergyScreen过敏原检测系统其局限性仍不可避免，不能凭任何一个试验结果作出最终临床诊断。阳性结果并不能完全说明患者对该物质过敏，因为大量植物或动物类过敏原中含有低聚糖侧链的糖蛋白类，由于它们结构的相似性，可引起很强的交叉反应。如草类与小麦、花生、瓜类等有交叉反应，桦树与榛子、苹果、胡萝卜等有交叉反应。同样，本试剂盒中只有几十种过敏原，全部阴性也不能排除对不包括在这试验内的其他过敏原的过敏反应，应积极寻找其他过敏原。因此，应由有经验的医生根据病史和检测特异过敏原的试验来结合分析病情。

引起过敏性疾病的过敏原种类繁多，常因环境、地理位置、生活习惯不同而有所差异，故对其防治应考虑差异性。对于螨虫过敏患者要保持室内通风干燥，经常清洁除尘，勤洗勤晒衣被、床单，定期清洗消毒空调过滤网，对于因尘螨过敏而导致的疾病，目前可采用脱敏疗法，可以减轻症状和疾病的发作。对于花粉过敏者，减少与各种花粉接触，平时尽量减少高蛋白质、高热量的饮食，少食用精加工食物。对于食物过敏患者，应尽量避免食用。准确地查找出过敏原，既可为临床过敏性疾病的诊断和治疗提供依据，又可提示患者在日常生活中避免接触导致自身过敏的致病因素，具有重要的临床意义。

1周海林，胡白，蒋法兴，等.安徽省1062例慢性荨麻疹过敏原检测结果分析.安徽医药，2012，16(11):1615－1617.

2张玲，吴丽华，肖玲，等.广东地区11728例过敏原检测结果分析.检验医学与临床，2012，9(6):657－658，660.

3韦海鹏，钟永军，李晓华，等.变态反应性皮肤病过敏原检测结果分析.右江医学，2013，41(2):240－241.

4张燕，史学娟.808例变态反应性疾病敏筛过敏原检测结果分析.重庆医学，2013，42(10):1142－1145.

5张蕊娜，许颖，段晓涵，等.过敏性皮肤病1774例过敏原检测结果分析.中国皮肤性病学杂志，2012，26(4):317－318，329.

(收稿:2013－09－09 修回:2013－11－24)

Analysis of the in vitro allergen testing of patients w ith allergic diseases in north areas of Zhejiang

HUANG Jia，HU Li-hua，HUAHai-fei，et al.Institute of Dermatology of Zhejiang Province，313200

Objective:To determine the allergens among the patients with allergic diseases in north areas of Zhejiang.Methods:The serum levels of inhaled allergens and food allergens of 1809 patientswith allergic diseaseswere detected by Western blotting.Results:The positivity rates of inhalation allerges and food allerges were 87.7%and 46.2%，respectively.Conclusion:The main allergens were inhalation allergens.in north areas of Zhejiang.

allergic disease；allergen；Western blotting

·经验交流·

浙江省皮肤病防治研究所检验科，德清，313200