肠癌患者外周血T淋巴细胞亚群数量及临床意义

王嘉，曲秀娟，张敬东，温倜，罗颖，刘云鹏

（中国医科大学附属第一医院肿瘤内科，沈阳110001）

·论著·

肠癌患者外周血T淋巴细胞亚群数量及临床意义

王嘉，曲秀娟，张敬东，温倜，罗颖，刘云鹏

（中国医科大学附属第一医院肿瘤内科，沈阳110001）

目的检测结直肠癌患者外周血淋巴细胞各亚群绝对值及比率以评估肠癌患者的免疫状态，并进一步分析其与肠癌患者临床特征的关系。方法收集167例肿瘤内科初次就诊的肠癌患者外周血，其中112例为根治术后患者，44例为晚期一线肠癌患者。同时收集166例体检中心健康人群的外周血，应用流式细胞术进行淋巴细胞亚群的检测。应用t检验及χ2检验进行统计分析。结果肠癌患者外周血CD4+T细胞绝对值较正常人显著下降；晚期肠癌患者CD4+T及CD8+T细胞绝对值较正常人显著下降，且相对根治术后患者，CD8+T细胞有下降趋势。此外，＜49岁的晚期患者CD4+T细胞下降更明显。结论术后和晚期结直肠癌患者均存在免疫功能下降，为进一步了解肠癌患者的免疫状态和免疫治疗提供依据。

肠癌；T细胞亚群；临床意义

免疫系统具有重要的抗肿瘤作用，而免疫抑制可促进肿瘤发生、发展。机体抗肿瘤作用以T淋巴细胞介导的细胞免疫为主。T淋巴细胞主要包括CD3+CD4+和CD3+CD8+T细胞。抗肿瘤作用的实现依赖于这些细胞功能的正常发挥［1，2］。目前，对人外周血淋巴细胞的检测已经用于衡量肿瘤患者的免疫状态，既往报道显示恶性肿瘤患者机体免疫状态常表现为CD3+T细胞、CD4+T细胞下降，CD4+/CD8+比值下降或倒置［3～4］。但各亚群在肠癌患者中的表达规律仍无统一的结论。因此，本研究拟以健康人群为对照，探讨术后、晚期肠癌患者T淋巴细胞亚群的数量及其与临床特征之间的关系，本研究结果将为临床治疗及肠癌免疫研究提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 临床资料

纳入2012年3月1日至2013年9月1日中国医科大学附属第一医院肿瘤内科初次就诊的167例结直肠癌患者（均经术后或肠镜病理确诊）。其中男84例，女82例。年龄21～80岁，中位年龄49岁。112例患者均为根治术后1～3个月入我科；44例为晚期一线结直肠癌患者，其中未手术19例，术后进展12例，姑息术后24例。健康对照组为166名在中国医科大学附属第一医院体检中心进行体检的健康人群，体检结果均提示为健康者，无慢性肝肾疾病，无风湿科疾病等。

1.2 检测方法

抽取167例结直肠癌患者及166名健康者外周血，应用流式细胞仪技术，测定外周血液中CD4+T细胞，CD8+T细胞及CD4+/CD8+，CD3+T细胞绝对值及比率等。体力评分按照卡式（KPS）评分法。

1.3 统计学分析

2 结果

2.1 结直肠癌患者外周血T细胞亚群与健康人群对照比较

术后结直肠癌患者外周血CD3+T细胞和CD4+T细胞分别为1 168.66±306.34/μL和683.02±247.61/μ L，显著低于健康对照组1 476.94±467.27/μL和800.48±279.39/μL，CD8+T细胞也有降低的趋势；晚期肠癌患者外周血CD3+T细胞为1 144.22±418.17/μ L，CD4+T细胞为668.64±246.27/μL，CD8+T细胞为463.02±266.68/μL，均显著低于健康对照组1 476.94± 467.27/μL，800.48±279.39/μL，607.20±273.32/μL。CD4+/CD8+比值无显著性差异。上述结果提示肠癌患者存在普遍的免疫能力降低，见表1。

表1 肠癌患者与健康对照人群中T细胞亚群值的对比Tab.1 T cell subgroup value in colorectal cancer patients and healthy controls

2.2 术后结直肠癌患者外周血淋巴细胞亚群与晚期结直肠癌患者对比

无论术后还是晚期的患者都存在T细胞免疫状态的显著下降，但是两者之间是否有差异尚不清楚。我们对术后和晚期患者的T细胞亚群数值情况也进行了比较分析，结果显示，CD4+T细胞为684.24±247.91/μL对比690.24±236.94/μL，无显著性差异。CD8+T细胞为448.42±306.26/μL对比466.47± 264.13/μL，晚期患者有下降趋势。CD4+/CD8+分别为1.49±0.74对比1.77±0.86，晚期肠癌患者显著升高，差别有统计学意义。上述结果提示晚期肠癌患者的免疫状态进一步降低，见表2。

表2 晚期结直肠癌与术后结直肠癌患者外周血淋巴细胞亚群对比Tab.2 T cell subgroup value in postoperative colorectal cancer patients and advanced colorectal cancer patients

2.3 术后结直肠癌患者外周血淋巴细胞亚群与其自身临床特征的关系

术后肠癌患者中，按照性别、体力评分、年龄、分期及淋巴结转移情况分别进行分组，比较外周血T淋巴细胞亚群数值的差异。结果提示T淋巴细胞亚群中CD4+T细胞，CD8+T细胞，CD4+/CD8+及CD3+T细胞数值与上述临床特征无显著性相关，见表3。

2.4 晚期结直肠癌患者外周血淋巴细胞亚群与其自身临床特征的关系

晚期肠癌患者中，按照性别、体力评分、年龄、是否做过手术及是否肝转移等情况分别进行分组，其中CD4+T细胞按照年龄进行分组，＜49岁组为494.12±204.46/μL，49岁以上组为749.28±274.60/μL，49岁以下组显著降低；CD8+T细胞按照是否经历过手术进行分组，分别为378.79±169.76/μL对比412.74±294.01/μL，在未经历过手术患者中显著降低，见表4。

表3 术后结直肠癌临床特征与T淋巴细胞亚群数量的关系Tab.3 Relationship between the clinical features of postoperative colorectal cancer and T cell subgroup value

表4 晚期结直肠癌临床特征与T淋巴细胞亚群数量的关系Tab.4 Relationship between the clinical features of advanced colorectal cancer and T cell subgroup value

3 讨论

在机体抗肿瘤免疫效应中，细胞免疫起着重要的作用。而细胞免疫又以T淋巴细胞亚群起主导作用。检测外周血T淋巴细胞亚群目前是观察免疫水平的重要方法之一。T淋巴细胞亚群中CD4+T细胞及CD8+T细胞在抗肿瘤效应中起作用［4～6］。

CD3+T细胞的数量代表了机体总的细胞免疫状态，CD4+T细胞为辅助性T细胞，辅助机体完成抗肿瘤免疫，CD8+T细胞既往认为是抑制性T细胞，而目前普遍认为是细胞毒性T细胞。CD4+/CD8+比值保持动态平衡，以维持机体细胞的免疫功能稳定。既往报道各种恶性肿瘤外周血CD4+T细胞计数在各种恶性肿瘤中下降，CD8+T细胞与健康对照组无显著差异或者较健康对照组升高。本研究也证实术后结直肠癌患者外周血中CD4+T、CD3+T细胞较健康对照组显著下降，CD8+T细胞无显著变化。主要原因可能是许多类型的肿瘤都能产生转化生长因子2β（TGF2β）在体外能强烈抑制CD4+T细胞应答和活性细胞毒性T细胞的产生［7］。CD4+T细胞的减少符合肿瘤的免疫逃避机制，肿瘤细胞通过Fas/Fas L途径改变宿主的免疫系统产生免疫抑制［8］。既往多数报道CD8+T细胞在恶性肿瘤中无明显变化或者升高，而本研究中晚期结直肠癌患者外周血CD4+T及CD8+T细胞均较健康对照组显著下降。且对比早期患者CD4+/CD8+数值显著升高，提示CD8+T细胞在晚期患者中有进一步下降趋势，需要进一步通过扩大样本量得到证实。CD8+T细胞显著下降原因可能在于多项研究证实肿瘤组织中CD8+T细胞的浸润参与了控制肿瘤生长及转移的作用［9］，晚期肝转移肠癌组织中CD8+T细胞的浸润明显减少，晚期的肠癌患者外周血有较低的CD8+T细胞比率［10，11］。因此，本研究表明结直肠癌患者机体的细胞免疫功能较健康对照明显降低，晚期肠癌患者的细胞免疫紊乱进一步加重。提示消化道肿瘤患者在进行化疗时，杀伤肿瘤细胞与保护机体免疫功能具有同等重要意义。

本研究中纳入根治术后1～2个月的肠癌患者112例，研究其外周血CD4+T、CD8+T、CD4+/CD8+及CD3+T数值与分期、性别、年龄、体力评分及淋巴结转移等无显著相关。纳入55例晚期一线结直肠癌患者，其外周血中CD4+T细胞在59岁以下患者中显著降低，2组中男女比例，是否手术，体力评分等因素分布均衡。既往有动物实验报道年龄与T淋巴细胞数值相关，CD4+T细胞在年长小鼠中升高［12］。而本研究结果中CD4在年轻患者中显著下降，不除外本身年龄差别起作用，也可能提示晚期肠癌中年龄小于59岁患者免疫功能抑制更为强烈。以往相关报道较少。同时如前所述，晚期肠癌患者CD4+T细胞及CD8+T细胞均较健康对照显著下降，晚期患者中未手术者CD8+T细胞显著降低。提示晚期肠癌患者的免疫失调进一步加重。

本研究证实了术后和晚期结直肠癌患者外周血CD4+T细胞均显著下降，而晚期结直肠癌患者更伴有CD8+T细胞的显著下降。本研究结果为进一步了解肠癌患者的免疫状态提供数据，也为结直肠癌患者的辅助免疫治疗提供进一步的科学依据。

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（编辑 裘孝琦）

The Peripheral Blood Lymphocyte Subsetsin Colorectal Cancer Patients and Its Clinical Significance

WANGJia，QU Xiu-juan，ZHANGJing-dong，WENTi，LUOYing，LIUYun-peng
（Department of Internal Oncology，The First Hospital，China Medical University，Shenyang 110001，China）

ObjectiveTo evaluate the immune status of colorectal cancerpatients through detecting the absolute value of lymphocyte subsets in the peripheral blood，and further analysis the relationship between the immune status variation and the patients’clinical features.MethodsPeripheral blood of167 patients thatbeing treated in the FirstAffiliated HospitalofChina MedicalUniversity were collected，including 112 cases with postoperative bowelcancerand 44 cases offirstline advanced bowelcancer.A totalof167 healthy individuals admitted to medicalcenters were also recruited as control.Flow cytometry was used to detectthe lymphocyte subgroups.ResultsCD4+T in the peripheralblood ofcolorectalcancerpatientswassignificantly decreased comparing with the normalcontrols.CD4+T and CD8+Tin the peripheralblood ofadvanced colorectalcancerpatients were significantly decreased compared with the normal controls.There was no significantly difference of the absolute value of CD4+T cells between advanced colorectal cancer patients and postoperative cancer patients.CD8+T cells have a downward trend.In addition，those advanced colorectal cancer patients with age less than 49 patients showed more obvious decreased CD4+T cells.ConclusionThere are drawbacks of immune function in colorectalcancerpatients，which can be applied as supporting data forauxiliary immunotherapy.

colorectal cancer；lymphocyte subsets；clinical significance

R73

A

0248-4646（2014）04-0289-04

国家自然科学基金（31300743）

王嘉（1984-），女，医师，本科.

刘云鹏，E-mail：cmuliuyunpeng@hotmail.com

2014-01-14

网络出版时间：