密闭无菌保存可移植脂肪颗粒储存桶的研制与应用

黄海玲 刘宏伟 欧伟光 佘文莉 曹凤 刘晖

（暨南大学附属第一医院整形外科，广东广州510630）

自体细胞辅助脂肪移植技术属于再生医学细胞治疗的范畴，涉及到细胞的分离、提取、和保存等一系列操作程序，在等待对脂肪和液体部分进行分离提取自体脂肪源性干细胞（Adipose－derived stem cells，ADSCs）期间，需对脂肪支架部分进行无菌低温保存，以保持脂肪细胞的活性，提高组织存活率和预防细菌污染的发生。根据密闭、无菌原则，我们设计研制了保存可移植脂肪颗粒储存桶，并应用于自体细胞辅助脂肪移植技术中，取得了良好的效果，现介绍如下。

1 一般资料

2011年6月～2014年1月，在我院行自体细胞辅助脂肪移植技术患者82例，其中，隆乳术68例，面部年轻化治疗加面部脂肪充填13例。患者先行抽脂术，应用自制的获取可移植脂肪颗粒装置获取脂肪。抽吸出来的脂肪分成两部分，一部分作为支架用于移植充填，用注射器装管后存放于储存桶内置于医用恒温冰箱内4℃保存。另一部分脂肪和全部液体部分送细胞处理室富集提取ADSCs。次日行脂肪注射移植术，术前脂肪支架与ADSCs混合，联合注射移植［1］。脂肪支架于医用恒温冰箱内4℃保存15～22h，平均保持19.5h。

2 制作与应用

2.1 制作 （1）选用不锈钢材料，制成直径20cm、高33cm圆柱形储存桶。桶口边缘制一圏直径为1.5cm的平面突出。盖子直径为23cm，盖子边缘设直径为1.2cm的盖帽。盖子中央设一手把；（2）桶内高15cm处设一圈0.4cm支承凸出；一块直径19.5cm圆形平面不锈钢薄板，平面设12个直径为3.2cm的圆形掏空；使用时把有12个掏空的不锈钢圆形活动板放置于储存桶内突出处，此板可活动拿出；（3）平面突出下设四个活动密封扣扣环，盖帽相应位置设四个扣钩；（4）盖子内贴直径23cm密封硅胶板，选用可耐高温灭菌的硅胶材料。硅胶板中央覆盖直径为19cm的不锈钢压板，并用四颗螺丝钉固定；（5）盖上盖子，扣上四个密封扣后，桶内处于密封状态（图1）。

图1 保存可移植脂肪颗粒储存桶示意图

2.2 使用方法 （1）脂肪回收瓶收集脂肪后，用50ml注射器连接内径3.5mm×35cm平头长针头，从脂肪回收瓶盖吸入口处将脂肪回收瓶内液体部分抽出，存放于另一回收瓶内；然后抽吸瓶内脂肪。即脂肪颗粒始终处于密闭中，尽可能不暴露在空气中，根据移植需要量抽取脂肪。抽脂肪的50ml注射器针头端连接塞子；（2）打开已灭菌的储存桶盖子，把2袋100ml的无菌盐水冰块放进桶内，再把有12个掏空的不锈钢活动板放置于储存桶内支承凸出处。装脂肪的注射器放进桶内圆形掏空处，塞子端朝下呈垂直状。桶内放冰块，使桶内脂肪处于低温环境；（3）脂肪需要量收集完毕后，把桶内融化的部分冰水用50ml注射器连接长针头抽吸去掉；（4）盖好盖子，扣好密封钩扣。密封盖一旦盖上，直到取用脂肪时方能开盖，避免中途开盖导致污染；（5）用无菌包布将储存桶无菌打包，再交给巡回护士。巡回护士在储存桶外贴上标签，在1h内放进专门存放无菌脂肪的医用恒温冰箱内4℃保存。桶外标签必须准确，以防不同患者的颗粒脂肪混淆，发生移植错误；（6）移植时取用。巡回护士取出储存罐，核对标签无误后打开无菌包布，带无菌手套后打开密封盖，再由手术人员从罐内拿出装有脂肪颗粒的注射器，排掉注射器底部的液体部分，放置手术台上。

3 结果

随机抽查10份注射移植前脂肪行ADSCs活性检测和细菌培养，结果：所有检测标本显示ADSCs生长良好，细菌培养均为阴性。本组患者术后随访，均未发现移植区感染，患者获得了满意的治疗效果。

4 小结

自制储存桶因不锈钢的传温效果好，桶内的可活动掏空圆板，既可让注射器保持垂直状态，利于脂肪静置，便于将注射器内的颗粒脂肪中的脂肪部分与液体部份离析，液体部份沉降到底部，从而使脂肪移植时能充分排掉液体部分，提高脂肪纯度，同时也方便清洗消毒；储存桶的盖子内装有密封硅胶板及四个密封扣，加强了桶内的密闭性，避免与空气接触及污染，符合无菌要求；硅胶板可耐高温，便于灭菌消毒。我们自制的保存可移植脂肪颗粒储存桶具有便于临床操作、容易清洁消毒、可重复使用、制造成本低等优点，解决了支架材料的短期低温保存问题。

［1］ 黄海玲，何金爱，刘宏伟，等.自体细胞辅助脂肪注射隆乳的手术配合［J］.护士进修杂志，2013，28（8）：742－744.