蜂王浆对小白鼠睡眠作用的影响
2014-03-18李春莉李芳玲张天桥山东省齐河县畜牧兽医局251100
李春莉 李芳玲 张天桥 (山东省齐河县畜牧兽医局 251100)
蜂王浆是由5-15日龄的工蜂上颚腺所分泌的乳白色或淡黄色乳状液体。鲜王浆中水分占62.5%~70.0%,干物质占30.0%~37.5%。干物质中蛋白占36.0%~55.0%,氨基酸约占王浆干重的0.8%,包含10-羟基癸烯酸等在内的脂类物质占7.5%~15%。此外,蜂王浆中还含有磷脂质以及丰富的维生素,其中以B族维生素最丰富[1-3]。蜂王浆有改善睡眠的作用,不但可提高入眠速度,还能提高睡眠质量,无任何毒副作用。本文就其改善睡眠的作用进行了研究及探讨。
1 材料与方法
1.1 材料
戊巴比妥钠(进口瓶装)、昆明种小白鼠(福建吴氏实验动物研究中心提供)生产许可证号:SCXK(闽)2004-0002、AE200S型电子分析天平(mettler-Toledo Instr.Ltd shang hai)、一次性无菌注射器(1ml,江西洪达医疗器械集团有限公司生产)。蜂王浆溶液:取蜂王浆(福建神蜂科技开发有限公司提供)4.165、6.250、8.333、10.417g溶于20ml蒸馏水配制成0.208、0.313、0.417、0.521g/ml的溶液分别用于2组、3组、4组、5组的实验动物。
1.2 方法
1.2.1 分组 正常成年人每次服用3g左右的蜂王浆就可以产生睡眠作用[4],即3g/60kg。按此50倍[5]的剂量将雄性小白鼠(每只约25g)随机分为5组,即对照组(1组)、2g/60kg(2组)、3g/60kg(3组)、4g/60kg(4组)、5g/60kg(5组),每组10只,以此找出蜂王浆改善睡眠的低、中、高 3个剂量。动物试验前均在实验室适应性喂养3d,然后在自然光照,自由饮食和自由进水的条件下,喂养28d。第30天起,每天早上8:00-10:00灌喂不同浓度的王浆0.2ml。
1.2.2 戊巴比妥钠用量 为了确定100%的小白鼠进入睡眠的戊巴比妥钠的最小剂量和其阈下睡眠剂量,即80%~90%的小白鼠翻正反射不消失的戊巴比妥钠最大阈下睡眠剂量。小白鼠随机分为6组,每组10只,各组动物腹腔注射戊巴比妥钠不同剂量,记录30min内入睡的动物数[6]。
1.2.3 小白鼠的睡眠潜伏期 早上8:00-10:00之间,上述5组小白鼠连续灌胃25d,第26天灌胃15min 后,腹腔注射戊巴比妥钠溶液;从注射完成到小白鼠翻正反射消失的时间段为睡眠潜伏期。戊巴比妥钠所用剂量是根据预实验确定使100%的小白鼠进入睡眠的戊巴比妥钠的量,即50mg/kg。根据所用浓度,将0.25g戊巴比妥钠溶于20ml蒸馏水中,0.1ml/只。
1.2.4 延长戊巴比妥钠睡眠时间 早上8:00-10:00之间,将5组小白鼠连续灌胃25d,第26天灌胃15min后,腹腔注射戊巴比妥钠溶液;从小白鼠翻正反射消失到小白鼠翻正反射恢复的时间段为睡眠时间。溶液配制和注射处理同睡眠潜伏期试验一样。
1.2.5 戊巴比妥钠阈下睡眠剂量 在前面预试验中,已经知道使10%~20%的小白鼠睡眠的戊巴比妥钠的阈下睡眠剂量为40mg/kg。配制0.4%的戊巴比妥钠溶液,以100g/ml的剂量来注射。同上述试验一样灌胃15min后腹腔注射戊巴比妥钠溶液,观察30 min内小白鼠的入睡数。
2 结果与分析
2.1 戊巴比妥钠用量试验结果与分析
表1 戊巴比妥钠不同剂量对小鼠睡眠的影响 (mg/kg、%)
表1说明,100%的小白鼠进入睡眠的戊巴比妥钠最小剂量为50mg/kg;而戊巴比妥钠阈下睡眠剂量为40mg/kg。
2.2 小白鼠的睡眠潜伏期试验结果与分析
表2 戊巴比妥钠对小鼠睡眠潜伏期的影响 (mg/kg、min)
结果表明,1~5组小白鼠在给药后的翻正反射均消失,且2~5 组比1 组分别缩短了33.64%、38.63%、42.37%、4.36%,说明蜂王浆与戊巴比妥钠可产生协同作用,促进小白鼠入睡,缩短进入睡眠状态的时间。1组和5组之间差异不显著,表明蜂王浆缩短小白鼠入睡时间的剂量并不是越大效果就越好。
2.3 延长戊巴比妥钠睡眠时间的试验结果与分析
表3 戊巴比妥钠对小鼠睡眠时间的影响 (min)
表3表明,小白鼠在给药后翻正反射均消失的时间2~ 5 组比1 组分别延长了27.21%、58.50%、69.06%、10.28%,说明蜂王浆与戊巴比妥钠可产生协同作用,改善小白鼠的睡眠,延长小白鼠的睡眠时间。1组和5组差异不显著(P>0.05),2组和3组、2组和4组、2组和5组差异极显著(P<0.01),3组和4组差异不显著(P>0.05),说明蜂王浆延长小白鼠的戊巴比妥钠睡眠时间的效果与剂量有关,即在一定的范围内,蜂王浆剂量越大效果就越好,但是当剂量达到一定程度后,效果就不是很明显了。
2.4 戊巴比妥钠阈下睡眠剂量试验结果与分析
表4 戊巴比妥钠对小鼠阈下睡眠剂量作用的影响 (mg/kg、%)
由表4 可知,与对照组相比,2g/60kg 组提高了16.7%、3g/60kg 组提高了22.3%,4g/60kg 组提高了46.7%、5g/60kg组提高了4.2%。可见蜂王浆可以提高30 min内小白鼠的入睡率。
3 讨论
蜂王浆对促进入睡、延长睡眠时间有极显著效果。在延长睡眠时间方面,蜂王浆3g/60kg组与4g/60kg组效果显著,而5g/60kg效果不显著,说明王浆改善睡眠的效果与剂量有关,不是剂量越大效果越好,其合适的剂量为3g/60kg左右。蜂王浆是理想的天然保健品,对人体无慢性危害。因此具有极大的开发价值和广泛的应用前景。但是蜂王浆不宜保存,值得人们进一步的研究。
4 结论
蜂王浆是纯天然绿色保健品,资料显示蜂王浆中的10-羟基癸烯酸是镇静催眠的重要成分,此外王浆中的乙酰胆碱、牛磺酸、维生素B等也可以明显的改善睡眠,使人睡眠好、精力充沛、身体健壮。但是究竟王浆中的何种成分起作用,还不十分明确,有待于进一步的研究。总之蜂王浆对动物无毒性危害。因此具有极大的开发价值和广泛的应用前景。
[1]苏晔, 敬璞, 丁晓雯等.蜂王浆的化学成分、生理活性及应用[J].蜜蜂杂志, 2000, 9: 23-24.
[2]Tamura T.Royal jelly from the standpoint of clinical pharmacology[J].Honeybee Sci, 1985, 6(1): 117-124.
[3]Fujii A.Pharmacological effect of royal jelly[J].Honeybee Sci, 1995, 16(1): 97-104.
[4]郭芳彬.蜂王浆与美容[J].养蜂科技, 1998(5): 28-31.
[5]林贵兵.复方酸枣仁改善小鼠睡眠的初步研究[D].四川: 四川师范大学, 2007.12-39..
[6]党毅, 肖颖.中药保健食品研制与开发[m].北京: 人民卫生出版社.2002.307-308.