高血压肾病早期血尿NGAL 水平的变化及临床意义①

张新明 卢玲玲 涂斐佩 潘晓夫 (瑞安市塘下人民医院，瑞安 325204)

原发性高血压病是临床常见病、多发病，在中国有超过2.6 亿的患者;10%～15%将进展至慢性肾衰竭。高血压肾病排在肾小球肾炎、糖尿病肾病之后居第三位，占老年人慢性肾功能不全发病原因的第一位［1-3］。长期高血压引起的小动脉硬化病变可以遍及全身，但以肾脏最明显。肾小管缺血性的病变导致尿浓缩功能减退，患者夜尿增多;肾小球缺血性病变则出现蛋白尿，早期蛋白尿的程度一般是轻至中度，24 h 定量一般不超过1.5～2 g，一般以小分子蛋白为主。高血压所致的肾脏疾病早期往往无特异性临床症状，发展到后期所致的肾脏损伤几乎不可逆转，因此寻找一个良好的生物学指标来监测高血压患者的肾脏功能进行早期积极的预防和治疗，控制原发病对肾脏的损害刻不容缓。

近年来研究发现，尿NGAL 蛋白在急性肾损伤、慢性肾炎、系统性红斑狼疮肾病、糖尿病肾病所致的早期肾脏损伤过程中检测出明显高于正常对照组［4-7］;缺血或中毒性AKI(急性肾损伤)动物模型中，NGAL 蛋白是最早上调的蛋白之一，肾脏损伤仅3 h，就能检测其血尿水平的成倍升高［8］;有学者通过Luciferase 和mCherry 双荧光报告基因在NGAL启动子和其5'UTR 驱动下的knock in 小鼠模型的实验结果显示在缺血性和细胞毒性肾损伤时NGAL基因表达活性在肾组织中的呈明显的剂量依赖性［9］;这些结果提示监测NGAL 对肾脏早期损伤的监测具有重要的意义。

但目前仍未见有关于NGAL 与高血压肾病的相关研究报道。当肾脏受到损伤，尤其是缺血再灌注损伤时，NGAL 可诱导肾小管上皮细胞再生，促进修复［10］。基于NGAL 与肾脏疾病及原发性高血压的密切关系，本实验拟对各期高血压肾病患者的血、尿NGAL 蛋白进行检测，并追踪随访，以明确NGAL在高血压肾病中的表现，为今后更进一步的研究奠定基础。

1 材料与方法

1.1 实验标本 (高血压肾病患者与正常健康人群的选取):选取2012 年10 月至2014 年5 月在本院住院，高血压病史大于10 年以上的患者，排除原发性肾脏疾病，糖尿病等继发性肾脏疾病，临床确诊为原发性高血压肾病患者90 例(男48 例，45～72岁;女42 例，43～70 岁)按24 h 尿微量白蛋白排泄率分为正常蛋白尿组(A 组，30 例，UAER＜30 mg/24 h)，微量蛋白尿组(B 组，30 例，UAER 介于30～300 mg/24 h)及大量蛋白尿组(C 组，30 例，UAER＞300 mg/24 h);查看所有健康体检人群的电子病历，选取所有检查项目(肝肾血脂、腹部B 超、胸片等均正常，排除高血压、糖尿病、心脏病等疾病)30 例(D组，男18 例，45～60 岁;女12 例，43～60 岁)。收集两组人群的相关信息(住院号，姓名，性别，尿常规，尿肌酐，肾功能等)，并随访一年。采集两组人群的血清标本，晨尿标本离心沉淀取上清液于-80℃冰箱保存备用。

1.2 实验方法 从-80℃冰箱取出上述标本，置室温放置30 min。分别检测两组标本的血肌酐、尿素氮、半胱氨酸蛋白酶抑制剂C、超敏C 反应蛋白、尿转铁蛋白含量以及血、尿NGAL 等指标。NGAL 检测方法为ELISA 法(R＆D 公司)严格按照说明书操作，其余检测项目均在AU2700 全自动生化仪上检测。严格按照检验科标准化检测程序进行检测，采用的方法室内质控为试剂盒内部质控品，标准品为配套标准品。

2 结果

2.1 随访前后高血压肾病组(A、B、C 组)与正常对照组血压变化情况与GFR(ml/min)水平比较 随访各组前后血压变化无统计学差异;高血压肾病组GFR随病情加重显示下降趋势，B 组C 组GFR 水平显著低于A 组(随访前，P＜0.001;随访后，P＜0.001);B 组C 组GFR 水平显著低于对照组D 组(随访前，P ＜0.001;随访后，P＜0.001);D 组与A 组GFR 水平未见统计学差别(P＞0.05)见表1。MDRD GFr=186.3×Scr(mg/dl)-1.154×年龄(岁)-0.203×0.742(女性)×1.233(中国人)。

2.2 各组血尿NGAL 水平比较及随访后的变化 表2 展示了随访前后血尿NGAL 各组水平的变化。结果显示:无论是随访前还是随访后，血NGAL 水平随尿蛋白的排出增多而降低，尿NGAL 水平随尿蛋白的排出增多而增高。尿NGAL 水平为C 组高于B组高于A 组，血NGAL 水平为D 组高于B 组高于C组，血尿NGAL 水平在D 组与A 组无显著差别。且随访后各组血尿变化有显著差别，随访后血NGAL水平高于随访前，尿NGAL 水平低于随访前。

2.3 其他指标随访前后的变化 表3 显示了与高血压肾病病情相关的其他常见临床生化指标。尿素氮(BUN)、尿转铁蛋白(Tf)、血肌酐(Scr)、胱抑素C(CysC)与患者受试过程中的肾功能密切相关;超敏C 反应蛋白(hsCRP)主要与患者体内是否存在炎症与应激情况有关。

表1 随访前后GFR(ml/min/1.73 m2)水平比较Tab.1 Comparison of GFR(ml/min/1.73 m2)at baseline and follow-up

表2 随访前后各组患者血尿NGAL 水平(μg/L)Tab.2 NGAL(μg/L)at baseline and follow-up

表3 其他相关临床指标随访前后比较Tab.3 Comparisons of other clinical parameters at baseline and after follow-up

表4 NGAL 与其他临床指标的相关性比价Tab.4 Correlation between NGAL and other clinical parameters

各指标在随访前后无明显差别。hsCRP 在各组中变化不明显，其余各肾功能相关指标在B、C 组明显高于A、D 组。

2.4 相关分析 表4 显示，尿NGAL 与临床其他肾病指标密切相关，血NGAL 与其他指标相关性较弱，与CsyC 负相关。尿NGAL 与GFR 负相关，与BUN，CysC 正相关。随访前后结果一致。

3 讨论

中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)存在于中性粒细胞中的过氧化物酶阴性颗粒中，在人体组织中(肾脏、胰腺、呼吸道、消化道等)广泛分布。已有相关文献表明，在肾病综合征、急性肾损伤、系统性红斑狼疮肾病、糖尿病肾病患者的早期过程中检测出尿NGAL 蛋白明显高于正常对照组，提示尿NGAL 蛋白的升高对肾脏早期损伤的监测具有重要的意义。

NGAL 除与上诉肾脏疾病关系密切外，本研究发现，在高血压肾病中，血尿NGAL 水平明显变化明显，血NGAL 水平低于正常对照组，尿NGAL 水平高于对照组，且在蛋白尿期表现更为明显，与肾小球滤过率密切相关。尿NGAL 与血NGAL 水平相比，变化更为明显，与临床肾病的其他指标关联性强。与GFR、BUN、CysC 均关系密切。所以我们认为在高血压肾病的早期指标中，尿NGAL 是一个敏感较好的指标。

高血压肾病在发病早期属于可逆性疾病，在随访的一年时间里，病人定期监测血压，血压情况控制良好，有一部分随访前表现为蛋白尿的病人在随访一年后检测为无蛋白尿，属病情好转的情况。也提示在慢性病控制中坚持随访，形成良好的饮食和健康生活方式，严格控制血压的重要性。但是本研究病人例数还有所局限，在进一步的研究中，我们会增加例数，以求得出更为准确的数据信息。

［1］彭贵成，黄 辉，王毅方.高血压非糖尿病人群高血压肾病的流行病学研究［J］.汕头大学医学院学报，2013，26(2):102-105.

［2］卢雅立，徐 湄，李 毅.肾部分切除术后急性肾损伤早期的监测指标［J］.中山大学学报(医学科学版)，2013，34(6):911-916.

［3］苏 苹，赵 凇，刘 婷.同型半胱氨酸与高血压、冠心病的关系研究进展［J］.中国老年保健医学，2013，11(6):59-60.

［4］Merrikhi A，Gheissari A，Mousazadeh H.Urine and serum neutrophil gelatinase-associated lipocalin cut-off point for the prediction of acute kidney injury［J］.Adv Biomed Res，2014，3:66.

［5］Andress DL，Coll B，Pritchett Y，et al.Clinical efficacy of the selective endothelin A receptor antagonist，atrasentan，in patients with diabetes and chronic kidney disease (CKD)［J］.Life Sci，2012，91(13-14):739-742.

［6］Wu JL，Ding Y，Zhu C，et al.Urinary TNF-α and NGAL are correlated with the progression of nephropathy in patients with type 2 diabetes［J］.Exp Ther Med，2013，6(6):1482-1488.

［7］Kiani AN，Wu T，Fang H，et al.Urinary vascular cell adhesion molecule，but not neutrophil gelatinase-associated lipocalin，is associated with lupus nephritis［J］.J Rheumatol，2012，39(6):1231-1237.

［8］Mishra J，Ma Q，Prada A，et al.Identification of neutrophil gelatinase associatedlipocalin as a novel early urinary biomarker for ischemic renal injury ［J］.J Am Soc Nephrol，2003，14(10):2534-2543.

［9］Paragas N，Qiu A，Zhang Q，et al.The Ngal reporter mouse detects the response of thekidney to injury in real time ［J］.Nat Med，2011，17:216-223.

［10］Mori K，Lee HT，Rapoport D，et al.Endocytic delivery of lipocalin-siderophore-iron complex rescues the kidney from ischemia-reperfusion injury［J］.J Clin Invest，2005，115 (3):610-621.