羚羊清肺颗粒中冰片的含量测定

李本俊 才凤 赵华 初正云

1.辽宁卫生职业技术学院药学系，辽宁沈阳110101；2.辽宁中医药大学药学院，辽宁大连116600

羚羊清肺颗粒中冰片的含量测定

李本俊1才凤2赵华1初正云2

1.辽宁卫生职业技术学院药学系，辽宁沈阳110101；2.辽宁中医药大学药学院，辽宁大连116600

目的制订羚羊清肺颗粒中冰片的含量测定方法。方法采用《中国药典》2010年版一部附录ⅥE规定的气相色谱测定方法：色谱柱：HP20M（30 m×0.32 mm×1.0 μm）（PEG20M）；柱温：140℃；气化温度：280℃；检测器温度：300℃；载气：氮气（色谱纯）；流速：35.5 mL/min；分流比：40∶1；进样量：1 μL。结果羚羊清肺颗粒中冰片称样量在1.85～11.13 mg范围内呈良好的线性关系，平均回收率在97.71%～101.24%之间，RSD为1.35%（n=6），符合《中国药典》2010年版一部规定，其他方法学考查均符合《中国药典》2010年版一部规定。结论本研究所采用的气相色谱法操作快速、简便、易行，精密度、重复性、稳定性好，可用于羚羊清肺颗粒中冰片的含量测定。

羚羊清肺颗粒；冰片；气相色谱法；含量测定

羚羊清肺颗粒是在原散剂的基础上将其改变成颗粒，属中药新药第9类，具有清热泻火、凉血解毒、化痰息风等功能，用于温热病、高热神昏、烦躁口渴、惊厥抽搐及小儿肺热咳嗽等［1］。本品由羚羊角、金银花、冰片等十八味中药组成，由于方中药味较多，所含成分复杂，对本品的质量控制带来诸多不便。由于冰片为方中主要药物，所含标志性成分为右旋龙脑，其含量常被作为冰片的主要质量控制指标［2］，并在制剂中视为冰片含量。右旋龙脑分子式为C10H18O，具有挥发性［3］，故采用气相色谱法对冰片进行限量测定［4-6］，以控制本品质量，保证临床用药的安全、准确和有效。

1 仪器与试药

H5890气相色谱仪检测器：FID。

对照品：冰片，由中国药品生物制品检定所提供，批号：110743-201303，纯度含量＞98.5%，；样品：羚羊清肺颗粒（沈阳天益堂中药厂）；正十五烷（色谱纯）；其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：HP20M（30m×0.32mm×1.0 μm）（PEG20M）；柱温：140℃；气化温度：280℃；检测器温度：300℃；载气：氮气（色谱纯）；流速：35.5 mL/min；分流比：40∶1；进样量：1 μL。

2.2 测定指标与测定方法的确立

本品由羚羊角、冰片、芦根、栀子、连翘、甘草、金银花、知母等十八味中药加工制成，冰片在方中用量为62 g，含量较高，所以选用冰片为含量测定指标，采用气相色谱法，以正十五烷为内标，对本品进行含量测定。

2.3 溶液的制备

2.3.1 内标溶液的制备参考《中国药典》2010年版一部［7］冠心苏合丸含量测定项下内标物的制备方法，取正十五烷适量，用醋酸乙酯溶解并制成每毫升含5.004 mg的溶液，作为内标溶液。

2.3.2 供试品溶液的制备确定取本品适量，精密称取适量，置具塞试管中，精密加入内标溶液1 mL与醋酸乙酯4 mL，密塞，振摇使冰片溶解，静置，取上清液为供试品溶液［8］。

2.3.3 阴性溶液的制备取除去冰片以外的其他药材，按供试品制备方法制成阴性溶液。

2.4 系统适用性试验考察

参考《中国药典》2010年版一部［7］冠心苏合丸项下的含量测定方法进行试验。色谱条件为色谱柱：HP20M（30 m×0.32 mm×1.0 μm）（PEG20M）；柱温：140℃；气化温度：280℃；检测器温度：300℃；载气：氮气（色谱纯）；流速：35.5 mL/min；分流比：40∶1；进样量：1 μL，并以正十五烷为内标，可满足气相色谱测定的要求，理论塔板数按正十五烷计算应不低于1200。

2.5 线性关系的考察

精密称取冰片对照品1.85、3.23、5.94、8.57、11.13 mg，置5 mL量瓶中，按“2.4”项下含量测定方法加入正十五烷内标物，分别精密量取1 μL注入气相色谱仪［9］，进行测定，以进样量为横坐标，冰片峰面积与内标峰面积之比为纵坐标，绘制标准曲线[10］，计算回归方程，回归方程为：Y＝0.205 152X+0.001 75（r＝0.9999）。测定结果显示，冰片称样量在1.85～11.13 mg范围内呈良好的线性关系。

2.6 校正因子的测定

取上述测定标准曲线不同浓度的供试品溶液，照《中国药典》2010年版一部附录ⅥD内标法测定校正因子，按“2.4”项下含量测定方法加正十五烷内标物[11]，分别精密量取1 μL注入气相色谱仪，进行测定，F的平均值为0.9759，RSD为0.37%（n=5）。

2.7 稳定性试验

取本品1 g，倾出内容物，研细，按“2.3.2”项下方法制备供试液，精密取同一供试液，按0、3、6、9、12 h时间间隔，分别进样分析［12］，测定冰片的含量的RSD为0.84%（n＝5），表明供试液在12 h内性质稳定。

2.8 精密度试验

取本品l g，倾出内容物，研细，按“2.3.2”项下方法制备供试品溶液。分别精密吸取1 μL，连续进样5次，测定其冰片的含量［13］。计算其冰片和内标物RSD分别为0.52%（n=5）和1.76%（n=5）。

2.9 重现性试验

取5份（批号130805）样品各lg，倾出内容物，研细[8]，按“2.5”项下方法分别测定，测定其冰片含量的RSD为0.54%（n=5）。

2.10 回收率试验

精密称取已知含量的6份，分别加入内标溶液1 mL和冰片对照品溶液4 mL（浓度为0.625 16 mg/mL），按“2.4”项下含量测定方法测定［14］，结果显示其样品回收率在97.71%～101.24%之间，RSD为1.35%（n=6）。见表1。

表1 加样回收率试验结果（n=6）

2.11 阴性干扰试验

精密吸取供试品溶液、阴性液、对照品溶液各1 μL，分别注入气相色谱仪中，绘制气相色谱图，由色谱图提示，在对照品色谱相应的位置上，供试品溶液具有相同保留时间的色谱峰，阴性液在此峰位无吸收，对本品中冰片的含量测定无干扰，方法专属性良好，气相色谱图见图1～3，气相色谱测定结果见表2、3、4。

图1 冰片对照品气相色谱图

表2 对照品气相色谱测定结果

3 讨论

图2 供试品气相色谱图

表3 供试品气相色谱测定结果

图3 阴性干扰气相色谱图

表4 阴性干扰气相色谱测定结果

冰片是羚羊清肺颗粒的重要有效成分之一，先采用高效液相色谱法测定时干扰较大，又因冰片具有挥发性，因此选用气相色谱法测定冰片含量，在本实验拟定色谱条件下异龙脑与龙脑可达到完全分离。本法简便、灵敏、快速、准确，可作为羚羊清肺颗粒中冰片的质量控制方法。

中成药成分复杂，组分比较多，在测定过程中易污染色谱柱，影响仪器的稳定性和灵敏度，实验发现在每次测定完后将柱温适当升高，避免由于杂质峰污染柱子所带来的干扰，且样品测定数据稳定，重现性好。

［1］苗明三.现代实用中药质量控制技术［M］.北京：人民卫生出版社，2000：454-460.

［2］陈东鸿.GC法测定赛霉安痔疮栓中龙脑的含量［J］.海峡药学，2012，24（6）：39-40.

［3］汪汝沛，戚进，余伯阳.冰片含量测定方法研究进展［J］.药学进展，2010，34（8）：359-364.

［4］包小红，杨超，周娟.气相色谱法测定牛黄解毒片中冰片的含量［J］.中药与临床，2010，1（4）：34-36.

［5］张彤，李兴，孙辉.GC法测定牛黄千金散中冰片的含量［J］.中国实用医药，2012，7（9）：254-255.

［6］陈艳红，冯玉林.冰片的研究进展［J］.中国社区医师，2013，15（6）：10-11.

［7］国家药典委员会.中国药典［S］.一部.北京：中国医药科技出版社，2010：967-968，附录38.

［8］彭善贵，文永盛.气相色谱法测定甘桔冰梅片中冰片含量［J］.中国药师，2012，4（15）：578-579.

［9］黄捷，吴桂凡.气相色谱法测定复方丹参片中冰片的含量及含量均匀度［J］.中成药，2011，33（5）：184-186.

［10］李杰，欧余航，陈强.GC法测定复方九节茶乳膏中冰片的含量［J］.福建中医药大学学报，2012，6（22）：39-40.

［11］来国防，张元杰，程宾.气相色谱法测定肿痛气雾剂中薄荷脑和龙脑的含量［J］.中国药师，2013，2（16）：227-229.

［12］汪剑飞.GC法测定喉疾灵片中冰片含量的方法研究［J］.安徽医药，2011，15（11）：33-34.

［13］钟彩金.小儿珍贝散制备工艺的改进及质量标准研究［J］.中国当代医药，2013，20（30）：143-145.

［14］张仲敏，黄国鑫，易宇阳，等.GC法测定蛇脂膏中冰片（龙脑）的含量［J］.中药新药与临床药理，2013，2（24）：191-193.

Content determination of borneol in Lingyang Qingfei Granules

LI Benjun1CAI Feng2ZHAO Hua1CHU Zhengyun2
1.Department of Pharmacy,Liaoning College of Health Vocational Technology,Liaoning Province,Shenyang110101, China;2.School of Pharmacy,Liaoning University of Traditional Chinese Medicine,Liaoning Province,Dalian 116600, China

Objective To establish a method for determination of the borneol content of Lingyang Qingfei Granules. Methods Gas chromatography in AppendixⅥE of Chinese Pharmacopeia(2010 edition,1 volume)determination was used as follow:chromatographic column:HP20M(30 m×0.32 mm×1.0 μm)(PEG20M);column temperature:140℃; gasification temperature:280℃;detector temperature:300℃;carrier gas:Nitrogen(chromatographic purity);flow rate: 35.5 mL/min,the split ratio:40:1;sample size:1 μL.Results Borneol of Lingyang Qingfei Granules in the sample weight in the range of 1.85-11.13 mg showed a good linear relationship,the average rate of recovery was 97.71%-101.24%,RSD was 1.35%(n=6),in accordance with the relevant provisions,other methods of study were in conformity with the relevant provisions.Conclusion This method of GC is rapid,simple,and convenient to operate,its precision,repeatability and stability are all good,it can be used for the content determination of borneol of Lingyang Qingfei Granules.

Lingyang Qingfei Granules;Borneol;Gas chromatography;Content determination

R284.1

A

1673-7210（2014）09（b）-0081-03

2014-03-17本文编辑：卫轲）

李本俊（1957-），男，副教授；研究方向：中药炮制及高职教育研究。