丹皮酚对动脉粥样硬化大鼠抗氧化作用研究

王 惠，骞秀芳，朱 哲，李 灿

（武警北京总队第二医院药剂科，北京 100027）

丹皮酚对动脉粥样硬化大鼠抗氧化作用研究

王 惠，骞秀芳，朱 哲，李 灿

（武警北京总队第二医院药剂科，北京 100027）

目的：研究丹皮酚对动脉粥样硬化（AS）大鼠的抗氧化作用。方法：用高脂饲料喂养和维生素D3腹腔注射的方法建立大鼠AS模型，然后分为正常组、模型组、阳性组（辛伐他汀10 mg/kg）、丹皮酚3个剂量组（20、10、5mg/kg），每组10只。灌胃给药4周后各组取主动脉，在光镜下进行病变分级评分。取血清测定SOD活力和MDA含量。结果：丹皮酚能改善AS大鼠的主动脉病变，高剂量组与模型组比较差异有统计学意义（P＜0．05）。与模型组比较，丹皮酚各剂量组AS大鼠血清SOD活性显著升高（P＜0．01），血清MDA含量降低（P＜0．05或P＜0．01）。结论：丹皮酚治疗AS作用可能与增强SOD活性、减少MDA含量、减轻氧自由基的损伤有关。

丹皮酚；大鼠；动脉粥样硬化；超氧化物歧化酶；丙二醛

丹皮酚（paeonol，PA）是毛茛科植物牡丹的根皮及萝摩科植物徐长卿的根或全草中的活性成分之一，具有改善血流、神经保护、抑制脂质过氧化、抗炎镇痛等作用，临床多用于治疗心脑血管、炎症及免疫系统等疾病［1，2］。有报道证实丹皮酚可用于防治家兔动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）［3，4］。我们建立AS大鼠模型，对丹皮酚抗氧化作用进行了研究，总结如下。

1 材料与方法

1.1 动物和饲料

SD大鼠，雄性，体质量（200±20）g，由河北省实验动物中心提供，合格证号SCXK（冀）2008-1-003。

1.2 药品和试剂

丹皮酚（纯度99%），由Sigma公司提供，用0.5%羧甲基纤维素钠（CMC-Na）配成适当浓度的混悬液。辛伐他汀片由鲁南贝特制药有限公司提供，药片粉碎后以生理盐水配成所需浓度。维生素D3注射液由上海通用药业股份有限公司提供。超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和考马斯亮蓝试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。

1.3 主要仪器

KDC-160HR型高速离心机（中国科大创新股份有限公司生产），CHK-213型光学显微镜（日本奥林巴斯公司生产），AU400型全自动生化分析仪（日本奥林巴斯公司生产），UV-2201型紫外分光光度计（日本岛津公司生产）。

1.4 方 法

建立模型、分组及给药：取大鼠60只，随机分为正常组、模型组、阳性组（辛伐他汀10mg/kg）、PA高剂量组（20mg/kg）、PA中剂量组（10mg/kg）、PA低剂量组（5mg/kg），每组10只。正常组给予普通饲料，其他组均给予高脂饲料喂养，连续8周。给药前除正常组外，其他各组腹腔注射维生素D37×105U/kg，每天1次，连续3天［5］。之后开始灌胃给药，给药体积按20mL/kg，每天1次。正常组和模型组给予等体积的0.5%CMC-Na溶液。连续给药4周，期间继续给予高脂饲料喂养。

指标的检测：末次给药后禁食不禁水12h，腹主动脉采血，3500r/min离心5min分离血清，采用黄嘌呤氧化酶法测定SOD活力，硫代巴比妥酸法测定MDA含量，具体操作按试剂盒说明书进行。

主动脉病变分级：动物处死后，分离主动脉周围的结缔组织，剥离全长动脉，将其固定于4%多聚甲醛液中，常规脱水、石蜡包埋、切片，行HE染色，光镜下观察主动脉病变，并进行分级评分［6］。

2 结 果

丹皮酚对AS大鼠主动脉病变分级的影响见表1。

表1 各组大鼠主动脉病变分级比较 只

各组大鼠SOD活性和MDA含量见表2。

表2 各组大鼠血清SOD活性和MDA含量比较 （±s）

表2 各组大鼠血清SOD活性和MDA含量比较 （±s）

注：与正常组比较，**P＜0.01；与模型组比较，△P＜0.05，△△P＜0.01。

组别 n 剂量（mg/kg） SOD（U/mL） MDA（nmol/mL）正常组 10 - 96.58±12.77 8.05±1.13模型组 10 - 40.92±10.45**19.24±4.00**PA高剂量组 10 20 69.31±18.02△△14.02±3.16△△PA中剂量组 10 10 70.88±19.94△△14.36±2.21△△PA低剂量组 10 5 59.63±13.45△△15.93±2.07△阳性组 10 10 106.26±27.08△△12.89±2.07△△

3 讨 论

AS是引起多种心脑血管疾病的病理生理基础。氧化应激在AS的发生发展中发挥重要作用，通过氧化作用、诱导血管基因表达、促进局部炎症反应和细胞增殖，从多方面参与AS的病理进程［7］。MDA作为氧自由基与生物膜不饱和脂肪酸发生脂质过氧化反应的代谢产物，其含量变化反映了机体内脂质过氧化的程度，从而间接反映机体细胞受自由基攻击的严重程度［8］。SOD是机体内主要的抗氧化酶-超氧自由基清除剂，其活性高低代表了组织清除自由基的能力［9］。

观察显示丹皮酚可减弱脂质过氧化反应，增加氧自由基清除能力，从而能够拮抗AS时产生的氧自由基对机体细胞的损害。此外，丹皮酚能够抑制AS大鼠的主动脉粥样病变。

丹皮酚对大鼠早期AS具有一定的治疗作用，其作用可能与增强SOD活性、减少MDA含量，减轻自由基的损伤、保护血管内皮细胞有关。

［1］ 杨正生，彭振辉，姚青海，等．丹皮酚的药理作用研究进展［J］．中国药物与临床，2011，11（5）：545-547．

［2］ Liu J，Wang S，Feng L，et al．Hypoglycemic and antioxidant activities of paeonol and its beneficial effect on diabetic encephalopathy in streptozotocin-induced diabetic rats ［J］．J Med Food，2013，16（7）：577-586．

［3］ 刘瑾．丹皮酚干预兔实验性动脉粥样硬化的实验研究［D］．济南：山东中医药大学硕士学位论文，2009．

［4］ Li H，Dai M，Jia W．Paeonol attenuates high-fat-dietinduced atherosclerosis in rabbits by anti-inflammatory activity ［J］．Planta Med，2009，75（1）：7-11．

［5］ 周红，吴晓燕，袁艺标，等．三种剂量维生素D3结合高脂饲料建立大鼠动脉粥样硬化模型的比较［J］．中国动脉硬化杂志，2012，20（11）：995-998．

［6］ 王伟，杨滨，王岚，等．丹参山楂药对对大鼠动脉粥样硬化的影响［J］．中国中药杂志，2011，36（6）：784-789．

［7］ Yokoyama M．Oxidant stress and atherosclerosis［J］．Curr Opin Pharmacol，2004，4（2）：110-115．

［8］ Viigimaa M，Abina J，Zemtsovskaya G，et al．Malondialdehyde-modified low-density lipoproteins as biomarker for atherosclerosis［J］．Blood Press，2010，19（3）：164-168．

［9］ Huang TT，Zou Y，Corniola R．Oxidative stress and adult neurogenesis--effects of radiation and superoxide dismutase deficiency［J］．Semin Cell Dev Biol，2012，23（7）：738-744．

Objective：To investigate the anti-oxidative stress effect of paeonol （PA） against atherosclerosis（AS）in rats.Methods：Rats model of AS was established by administration of high-fat diet and vitamin D3（i.p.）.Rats were divided into 6 groups（n = 10）at random，namely normal，model，positive（simvastatin，10 mg/kg）and PA high，medium and low dose groups（20，10 and 5 mg/kg，respectively）. After 4 weeks of oral treatment，the aortic pathologic changes were observed under microscope and graded.The sera of all rats were collected to determine the SOD activities and MDA contents.Results：Administration of PA improved the severity of aortic pathology in AS rats，and the pathologic grade of PA high dose group showed a significant difference compared with that of model group（P＜0.05）.PA （20，10 and 5 mg/kg）significantly increased the SOD activities（P＜0.01）and reduced the MDA contents（P＜0.05 or P＜0.01）in serum of AS rats compared to the model group.Conclusion：Therapeutic effect of PA against AS maybe due to its action on SOD activities and MDA contents.

paeonol；atherosclerosis；SOD；MDA

R255.741.4

B

1004-2814（2014）11-0988-03

2014-07-02

骞秀芳