不同方法提取川芎挥发油的GC-MS分析

刘晓芬, 连艳，高必兴，兰志琼，卢先明

·炮制制剂·

不同方法提取川芎挥发油的GC-MS分析

刘晓芬, 连艳，高必兴，兰志琼，卢先明

目的：对川芎饮片不同提取方法所得挥发油的化学成分进行比较分析。方法：采用气相色谱-质谱联用仪对提取物进行比较分析。结果：4种方法提取的挥发油有9个化合物相同。其中水蒸气蒸馏法提取的挥发油样品中组分种类最多，主要是烯萜类成分。结论：4种提取方法均能提取出川芎挥发油中的主要成分，主要成分为内酯类，相对含量最高的为反式-藁本内酯。

川芎饮片；挥发油；化学成分；GC-MS

川芎为伞形科植物川芎Ligusticum chuanxiong Hort.的干燥根茎[1]。川芎挥发油为川芎的主要化学成分之一，具有改善微循环，降低血压，增加脑血流量，抗凝血[2]，脑神经保护[3]等作用。水蒸气蒸馏法为挥发油常用的提取方法，2010版中国药典（一部）附录分为甲法，乙法两种。本实验考察了水蒸气蒸馏法（乙法）、石油醚，乙醚，正己烷提取川芎挥发油，通过气相色谱-质谱联用仪对不同提取方法提取的挥发油化学成分进行比较分析。通过分析，对比不同提取方式的结果，探讨不同提取方式得到的挥发油化学成分的不同，研究川芎挥发油的主要成分，为川芎挥发油的提取工艺提供参考，为

1 仪器与试药

1.1 仪器

Agilent Technologies 7890A GC System，Agilent Technologies 5975C inert MSD with Triple-Axis Detector；KQ5200E型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)，BP121S十万分之一电子天平(赛多利斯科学仪器有限公司)。水为乐百氏纯净水，石油醚（分析纯），乙醚（分析纯），正己烷(色谱纯)。

1.2 材料

川芎饮片产自四川省彭州敖平镇兴泉村12组，经成都中医药大学卢先明教授鉴定为伞形科植物川芎Ligusticum chuanxiong Hort.的干燥根茎。样品贮藏于成都中医药大学中药标本馆。

2 方法与结果

2.1 供试品制备

2.1.1 水蒸气蒸馏提取 称取川芎粉末（过二号筛）50 g，参照2010年版中国药典（一部）附录乙法，提取挥发油，所得的产物为淡黄色油状物，按每0.1mL挥发油加入10 mL正己烷，置棕色瓶中，0.22 μm微孔滤膜滤过，作为供试品溶液1。

2.1.2 石油醚提取 精密称取约5 g川芎粉末（过二号筛），于具塞锥形瓶中，精密加入50 mL石油醚（30～60沸程），称定重量，超声提取30 min，放至室温，以石油醚补足减失的重量，摇匀，静置，取上清液，0.22 μm微孔滤膜滤过，作为供试品溶液2。2.1.3 乙醚提取 精密称取约5 g川芎粉末（过二号筛），于具塞锥形瓶中，精密加入50 mL乙醚，称定重量，超声提取30 min，放至室温，以乙醚补足减失的重量，摇匀，静置，取上清液，0.22 μm微孔滤膜滤过，作为供试品溶液3。

2.1.4 正己烷提取 精密称取约5 g川芎粉末（过二号筛），于具塞锥形瓶中，精密加入50 mL乙醚，称定重量，超声提取30 min，放至室温，以正己烷补足减失的重量，摇匀，静置，取上清液，0.22 μm微孔滤膜滤过，作为供试品溶液4。

2.2 GC-MS分析条件

色谱条件：Agilent HP-5MS毛细管柱(30 m×250 μm×0.25 μm)，质谱检测器。进样口温度230 ℃，20︰1分流，进样量：1 μL。程序升温：初始60℃，每分钟3℃升至120℃，每分钟2℃升至180℃，每分钟20℃升至260℃，保持5 min。载气：高纯氦气；载气流速：1.0 mL﹒min-1。

质谱条件：EI离子源，扫描范围50～350 amu。离子源温度：230℃；GC-MS辅助加热温度：260℃；MS四级杆温度：150℃；溶剂延迟：5 min。质谱标准库：NIST库。

2.3 结果

4种方法所得样品经气相色谱-质谱联用仪分析，得总离子流图，见图1-4。经NIST库自动检索，得出挥发油的化学成分，结果见表1。

图1 川芎水蒸气提取挥发油总离子流图

图2 川芎石油醚提取挥发油总离子流图

图3 川芎乙醚提取挥发油总离子流图

图4 川芎正己烷提取挥发油总离子流图

表1 川芎挥发油GC-MS鉴定化合物及相对含量

136.23 C10H16萜品烯 0.22 136.23 C10H16萜品油烯 1.49 0.37 0.36 0.39 136.23 C10H16反式-β-罗勒烯 0.02 136.23 C10H16β-罗勒烯 0.01 136.23 C10H16γ-Pyronene 0.13 0.35 150.17 C9H10O2对乙烯基愈疮木酚 0.85 0.24 154.25 C10H18O 芳樟醇 0.03 154.25 C10H18O 4-萜烯醇 0.88 154.25 C10H18O L-α-松油醇 0.05 156.31 C11H24正十一烷 0.02 162.23 C11H14O 苯戊酮 0.14 164.20 C10H12O2异丁香酚 0.13 184.36 C13H28正十三烷 0.04 0.04 0.04 0.04 196.29 C12H20O2乙酸龙脑酯 0.03 198.39 C14H30正十四烷 0.03 0.02 0.03 0.02 204.35 C15H24(-)-b-榄香烯 0.36 0.15 0.17 0.15 204.36 C15H24β-姜黄烯 0.46 0.46 204.35 C15H24顺式-β-金合欢烯 0.09 204.35 C15H24(E)-β-金合欢烯 0.12 0.05 0.03 204.35 C15H24反式-β-金合欢烯 0.05 204.35 C15H24γ-榄香烯 0.26 0.87 0.88 0.13 204.35 C15H24β-柏木烯 0.12 0.05 204.35 C15H24δ-蛇床烯 0.11 0.05 204.35 C15H24β-古巴烯 0.05 204.35 C15H24(+)-b-蛇床烯 2.81 1.23 1.18 1.22 204.35 C15H24双环吉马烯 0.84 204.35 C15H24γ-衣兰油烯 0.20 0.09 0.09 212.41 C15H32正十五烷 0.04 204.35 C15H24甘香烯 0.09 0.09 220.35 C15H24O 匙桉醇 0.59 0.23 0.21 0.22 188.22 C12H12O2丁烯基苯酞 2.14 1.21 1.27 1.18 204.35 C15H24雪松烯 0.08 204.35 C15H24吉玛烯 0.09 204.35 C15H24香叶烯B 1.95 204.35 C15H24(+)-香橙烯 0.05 204.35 C15H24蛇麻烯 0.04 204.35 C15H24α-愈创木烯 0.16 204.35 C15H24d-荜澄茄烯 0.05 202.34 C15H22l-卡拉烯 0.03 222.37 C15H26O (-)-蓝桉醇 0.11

222.37 C15H26O 胡萝卜醇 0.11 0.02 222.37 C15H26O 雪松醇 0.07 192.25 C12H16O2川芎内酯 9.01 21.17 20.81 20.82 190.24 C12H14O2反式-藁本内酯 61.58 58.31 55.94 57.79 228.41 C15H32O 1-十五醇 0.02 256.47 CH3(CH2)16OH 十七烷醇 0.32 284.52 C19H40O 十九醇 0.03 294.47 C19H34O2亚油酸甲酯 0.11 308.50 C20H36O2亚油酸乙酯 0.04 0.27 0.32 0.32 340.50 C23H32O2抗氧剂2246 0.14 0.32 0.66 0.60 366.71 C26H54二十六烷 0.09 196.37 C14H28环十四烷 0.08 0.11 0.10 284.48 C18H36O2棕榈酸乙酯 0.05 0.05 0.05 312.53 C20H40O2棕榈酸丁酯 0.13 0.09 294.47 C19H34O2(Z,Z)-9,15-十八碳二烯酸甲酯 0.16 0.07 254.49 C18H38正十八烷 0.08

3 讨论

从表1可见，本实验中水蒸气蒸馏提取样品共鉴定出47个化合物，石油醚提取样品共鉴定出27个化合物，乙醚提取样品共鉴定出27个化合物，正己烷提取样品共鉴定出28个化合物，相同的化合物有9个，分别占鉴定化合物的78.76%，84.19%，81.87%，82.88%，主要为内酯类成分。其中抗氧剂2246可能为贮藏或运输过程中包装材料中的成分。4种方法中水蒸气蒸馏法提取的挥发油样品中所含组分种类最多，主要是烯萜类成分。4种提取方法均能提取出川芎挥发油中的主要成分，相对含量最高的为反式-藁本内酯，可将反式-藁本内酯作为川芎挥发油质量评价的指标。

[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典一部[S].北京:中国医药科技出版社,2010:38.

[2] 谢秀琼,詹珂,尹蓉莉,等.川芎挥发油的研究进展[J].时珍国医国药,2007,18(6):1508.

[3] 盛艳梅,孟宪丽,李春雨,等.川芎挥发油对大鼠大脑皮层神经细胞体外存活及脑缺血再灌注损伤的影响[J].时珍国医国药,2012,23(3):536.

(责任编辑：李芸霞)

GC-MS detection of essential oil of Chuanxiong Rhizoma extracted using different methods

LIU Xiao-fen, LIAN yan, GAO Bi-xing, LAN Zhi-qiong, LU Xian-ming//( Pharmacy College, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine; The Ministry of Education Key Laboratory of Standardization of Chinese Herbal Medicine; State Key Laboratory Breeding Base of Systematic Research, Development and Utilization of Chinese Medicine Resources Co-founded by Sichuan Province and MOST, Chengdu 611137, China)

Objective: To compare and analyze essential oil of Chuanxiong Rhizoma extracted using different methods. Method: Samples were analyzed by gas chromatography-mass spectrometer. Result: There were 9 components in the volatile oil extracted by 4 kinds of methods. The steam distillation extracts contained more components than others. The types of constituents in the steam distillation extracts were alkenes and terpenes. Conclusion: Four kinds of extraction methods can extract the main ingredient in Chuanxiong Rhizoma. The main ingredients are lactone. The highest level of ingredients is trans-ligustilide.

Slices of Chuanxiong Rhizoma; essential oil; chemical composition; GC-MS

R 283

A

1674-926X(2014)03-006-03?

成都中医药大学药学院 中药材标准化教育部重点实验室中药资源系统研究与开发利用省部共建国家重点实验室培育基地，四川 成都 611137

刘晓芬，女，在读硕士研究生，从事中药品种、品质与资源开发研究Tel:13980622836 Email:jxjjliuxiaofen@163.com

卢先明，男，教授，从事中药品种、品质与资源开发研究

2014-01-20建立川芎挥发油的质量标准提供依据。