塔里木盆地驴感染圆形亚科线虫种类及种群组成调查

张伟信，王时伟，何良军，杨连升，雷曼红，汪 明

(1.塔里木大学 动物科学学院，新疆 阿拉尔 843300；2.中国农业大学 动物医学院，北京 100193)

线虫病是危害马属动物养殖最大的寄生虫病，通常为多种线虫混合感染，大圆线虫(圆形亚科)和小圆线虫(盅口亚科)是常见和重要的寄生虫。患病动物表现为被毛粗乱，贫血，疝痛和腹泻等症状，幼龄马驹可以感染几千条线虫，表现出严重的临床症状和死亡率[1]。研究表明，不同地区、不同管理方法线虫的流行率不同[2-3]，马属动物内在因素(例如年龄和性别)也会影响线虫感染和虫卵排出[4-5]。在一定的管理条件下和特定的气候环境，彻底调查马属动物线虫流行率有助于设计经济有效的寄生虫防控措施。

塔里木盆地地理及气候特殊，为了解该生态环境下驴感染圆形亚科线虫(Strongylinae)情况，2012年7 月至2013 年5 月，本实验室调查了该盆地绿洲252 头役用驴。依据虫体形态学进行种类鉴定，针对Strongylinae 的种类及流行率做了调查，并首次依据宿主年龄对这些寄生虫的种群组做统计学分析，调查结果为塔里木盆地驴的高效养殖和寄生虫防控提供参考依据。

1 材料和方法

1.1 虫体采集 随机采集新疆喀什地区、和田地区盆地周边绿洲的252 头役用驴，年龄在5 个月～15岁，其中1 岁以下29 头，1 岁以上208 头。包括新疆驴、乌头驴、疆岳驴。采用系统剖检法将小肠、结肠、盲肠和直肠分段结扎，分别取出10 %内容物，检查分离虫体；冲洗肠道后分离粘膜上虫体。

1.2 虫体清洗、固定及保存 采用生理盐水清洗分离虫体，用70 ℃70 %酒精固定，待酒精冷却后将虫体移入75 %酒精中加标签保存。编号，记录宿主来源、年龄、采集时间等信息。

1.3 虫体观察与鉴定 用乳酸苯酚溶液透明化处理虫体，在光学显微镜下观察。参照文献[6]的方法鉴定到种。

1.4 统计学方法 应用生物统计方法处理观察数据，分别统计调查动物年龄，采集线虫的种类和感染率。根据文献[7]依据寄生虫感染率将其划分为优势种、次要种和卫星种(感染率>2/3 为优势种，2/3>感染率>1/3 为次要种，感染率<1/3 为卫星种)。

2 结果

2.1 圆形亚科线虫感染情况 本实验调查发现9 种圆形亚科线虫，以普通圆线虫为优势虫种(86.5 %)，其余8 种均为卫星种(表1)。

2.2 不同年龄阶段感染圆形亚科线虫种类情况 通过年龄对实验驴分组，采用卡方检验分析不同年龄阶段驴圆形亚科虫体感染情况，试验结果见表2。

在不同年龄组中普通圆线虫的感染率均最高，其中≤1 岁组普通圆线虫感染率54.76 %，无齿圆线虫、短尾三齿线虫、马圆线虫、伊氏双齿线虫未见感染；2 岁～3 岁组普通圆线虫感染率90 %，马圆线虫、细颈三齿线虫、伊氏双齿线虫感染率最低(2.5 %)；4 岁～9 岁组普通圆线虫感染率93.19 %，细颈三齿线虫感染率最低(0.68 %)；≥10 岁组普通圆线虫感染率95.65 %，无齿圆线虫、短尾三齿线虫、细颈三齿线虫未见感染率。

实验结果表明1 岁以内的驴普通圆线虫感染率最低(54.76 %)，其他年龄组感染率均在90 %以上，但经卡方检验差异不显著。统计结果显示，无齿圆线虫仅在2 岁～9 岁的驴中分离到，表明该线虫的流行率比较低，较容易感染青年驴和中年驴，10 岁以上和1 岁以下的驴不易感染，组间差异极显著(p<0.01)。

表2 4 个年龄组驴圆形亚科虫体感染情况Table 2 Strongyliae species distribution between four age groups

2.3 圆形亚科线虫种群组成情况 252 头驴均为线虫混合感染，实验结果表明1 头驴最多可以感染6种，最少感染1 种(图1，表3)。

有4 种圆形亚科线虫(普通圆线虫、锯齿状三齿线虫、小三齿线虫和日本三齿线虫)可以感染各种年龄阶段的驴；感染1 岁以下和2 岁～9 岁的驴有5种圆形亚科线虫(普通圆线虫、锯齿状三齿线虫、小三齿线虫、日本三齿线虫和细颈三齿线虫)；感染2岁～9 岁和10 岁以上的驴圆形亚科线虫有6 种(普通圆线虫、锯齿状三齿线虫、小三齿线虫、伊氏双齿线虫、日本三齿线虫、马圆线虫)；感染1 岁以下和10 岁以上的驴圆形亚科线虫有4 种(普通圆线虫、锯齿状三齿线虫、小三齿线虫和日本三齿线虫)。

图1 3 个年龄组圆形亚科线虫虫种分布Fig.1 Strongylinae species distribution among the three age groups

表3 4 个年龄阶段驴感染圆形亚科线虫组成情况Table 3 Strongylinae species distribution between four age groups

统计结果为：df=18，χ2=48.83,χ2(18)>χ20.01(18)，p<0.01，表明4 个年龄组间，感染圆形亚科线虫的种类数量差异极显著。小于1 岁的年龄组中，23.8 %和54.76 %的驴驹分别感染0 种和1 种线虫，在2 岁～3 岁组中，25 %、35 %和30 %的未成年驴分别感染1 种、2 种和3 种线虫；在4 岁～9 岁组中，52.38 %和27.21 %个体分别感染1 种和2 种线虫；在≥10 岁组，43.47 %和26.08 %个体分别感染1 种和2 种线虫。同时感染4 种以上圆形亚科线虫的驴数量较少。

数据显示：小于1 岁的驴感染线虫的种类最少，感染1 种的驴数量最多，其次为未感染的，在调查时观察到该年龄段驴的肠壁内有许多幼虫在肠壁内形成的结节，证明驴驹已被线虫感染，但虫体处于幼虫阶段，还未到达肠腔内寄生；2 岁～3 岁感染线虫的种类迅速升高，在4 个年龄组中，感染2 种(35 %)、3 种(30 %)和4 种(5 %)圆形亚科线虫的比例均是最高的，表明2 岁～3 岁驴体内的圆形亚科线虫的生物多样性是最高的；4 岁～9 岁组和10 岁以上组感染圆形亚科线虫的种类差异不显著，主要为1 种和2 种线虫的感染。

3 讨论

与塔里木盆地生态环境较接近的埃塞俄比亚研究显示线虫感染驴较普遍，调查数据显示其中Strongylinae 有2 属4 种，普通圆线虫(51.8 %)、无齿圆线虫(30.8 %)、马圆线虫(12.3 %)和细颈三齿线虫(29.7 %)[8]。与地理气候情况相似的埃塞俄比亚相比，塔里木盆地驴感染Strongylinae 种类较多(3 属9种)，普通圆线虫的流行率高(86.5 %)，而无齿圆线虫(5.95%)，马圆线虫(1.98%)，细颈三齿线虫(1.19%)流行率较低。国内卜艳珍调查了2006 年～2007 年河南省34 头驴体内寄生圆线虫的感染情况，共鉴定出22 种圆线虫，隶属于2 亚科7 属，其中圆形亚科有4 种：普通圆线虫(88.2 %)、无齿圆线虫(8.8 %)、锯齿状三齿线虫(8.8 %)和日本三齿线虫(8.8 %)，以普通圆线虫的感染率和平均感染强度都很高[9-11]。本次调查结果也显示普通圆线虫是感染塔里木盆地驴的优势虫种。

该调查首次在塔里木盆地根据宿主年龄研究驴感染Strongylinae 的种群组成，其中普通圆线虫、锯齿状三齿线虫、小三齿线虫和日本三齿线虫可感染各种年龄阶段的驴，2 岁～3 岁的驴感染Strongylinae的种类的生物多样性最高。调查结果显示2 岁～3岁是驴容易感染大圆线虫的年龄，应该重视该年龄段驴的驱虫工作。被调查的252 头驴均来自塔里木盆地的周边绿洲农民家庭，几乎未接触过驱虫药，屠宰后通过肠道剖检获得虫体，使本研究获得数据更具有代表性。

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