青海省牦牛、藏羊莱姆病血清流行病学调查

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（1.青海省动物疫病预防控制中心，青海西宁 810001；2.四川农业大学动物科技学院，四川雅安 625014）

青海省牦牛、藏羊莱姆病血清流行病学调查

马睿麟1，王毅2，王晓润1，蔡金山1，沈艳丽1，王谢忠1，张茂华1

（1.青海省动物疫病预防控制中心，青海西宁 810001；2.四川农业大学动物科技学院，四川雅安 625014）

为了解青海省牛羊莱姆病感染情况，在2013年5月至10月间，我们对青海省27个县（市、区）种畜场进行了莱姆病抗体情况调查。共采集血清样品1375份，其中牛血清样品804份，藏系绵羊血清样品571份，采用间接免疫荧光法检测上述样品中的莱姆病抗体，采用χ2检验比较不同县（市、区）阳性率之间的差异。结果显示，牛血清阳性样品为97份，阳性率12.06%；羊血清阳性样品为57份，阳性率9.98%。各县（市、区）之间阳性率存在差异，部分县（市、区）阳性率差异显著。部分地区牛羊抗体阳性率均较高，显示了青海省可能存在莱姆病的自然疫源地。

莱姆病；间接免疫荧光试验；血清学调查；牦牛；藏羊

莱姆病是一种蜱传染自然疫源性疾病，其具有分布广、传播快、发病率高和致残率高的特点；自1977年美国STERE博士首次报道后，现已证实莱姆病是一种全球分布性疾病。牛羊被携带病原体的蜱叮咬而感染，可引起一系列临床症状，如关节肿胀，跛行、母畜产奶降低或停止，出现繁殖障碍，影响动物的生长和生产，严重危害畜牧业的生产。同时，畜类也是病原携带体，该病感染途径除通过蜱叮咬传染外，也可通过感染动物的尿、血、乳或未杀死螺旋体感染动物的肉及内脏时，人也会接触感染，根据张哲夫、林涛[1]（中国莱姆病螺旋体生物媒介的初步调查）报道，此病人和动物中都可垂直传播。

病原学研究证实有17个省（市、自治区）存在莱姆病的自然疫源地。在朱琦[2]等对新疆兵团农八师150团的641只绵羊用IFA检测，平均阳性率高达47%，对326头牛用IFA检测，平均阳性率达13.8%。特别是刘增加[3]等研究报告指出，在甘肃西部森林草原地带，家畜（牦牛）莱姆病自然感染率高达70%、旱獭50%和野兔25%，报道指出受到莱姆病感染的家畜临床表现不尽相同，表现各式各样。这些提示说明，在新疆、甘肃、宁夏和陕西地区不仅广泛存在人畜共患莱姆病，而且莱姆病病原—伯氏疏螺旋体可能存在不同的基因型别。

青海省位于我国西北，青藏高原的东北部，地形复杂，地貌多样，全省海拔平均3000m，总面积72万km2，人口530余万，有汉、藏、回、土、撒拉、蒙古等民族。现辖西宁、海东、海西、海北、海南、黄南果洛、玉树8个州（地、市）和47个县（区、市）。境内野生动物主要有藏羚羊、野牦牛、藏野驴、白唇鹿、普氏原羚和黑颈鹤等青藏高原特有品种和其他动物品种共233种。全省可利用草场面积达57.8万亩。除西宁、海东市外，其他6州在生产经营上以放牧为主，在全省农牧业经济中占有很大的比例。

青海省人间感染莱姆病的报道近期也不断出现，如刘光润[4]等（青海省三县林区莱姆病血清流行病学调查），姜双应[5]等（青海省同德县莱姆病血清流行病学调查分析），岳建宁[6]等（青海省部分林区莱姆病流行病学调查），孙毅[7]等（中华硬蜱、越原血蜱和青海血蜱经期传播莱姆病螺旋体的实验研究）说明，此病至少存在蜱与人、蜱与家畜牛羊存在水平传播。同时，省内亦栖息众多的小型啮齿动物和蜱类昆虫可能是莱姆病（伯氏疏螺旋体）的自然循环宿主，综上所述，青海省具备莱姆病的生态学和生物学基础。

为了解省内牛羊莱姆病感染状况，2013年5—10月，笔者选择了在省内27个生产方式以牧为主和农牧各半的县（区、市、种畜场）进行采样，共采集牦牛血清804份，藏系绵羊血清571份，以了解采样地区牛、羊莱姆病的自然感染情况。

1 材料

1.1 采集省内27个县（区、市、种畜场）牦牛，藏系绵羊静脉血5mL，5ml离心管，移液器，离心机等。

2 方法

2.1 样品采集和处理

对所采牛、羊血静置后离心，分离出血清、血球后置4 ºC冰箱待检。对其进行编号待检。

2.2 样品检测方法与结果判定

检测方法：血清抗体检测采用间接免疫荧光法，其中莱姆病抗原片及阳性血清均购自军事医学科学院微生物流行病研究所。间接免疫荧光法操作程序：将血清用PBS从1∶16 开始稀释，取稀释好的血清滴加于抗原片孔中，37 ºC孵育45 min，取出用PBS及蒸馏水冲洗晾干，点上FITC标记的荧光二抗，37 ºC孵育45 min，冲洗晾干后，置荧光显微镜下观察。

应用χ2检验比较不同县（区、种畜场）阳性率的差异，统计处理应用SPSS（10.0）软件。

3 结果与分析

3.1 牛羊血清中莱姆病抗体检测结果

此次共采集27个县（是、区、种畜场）牛血804份，检测到97份标本阳性，藏系绵羊血清571份，检测到57份标本阳性，基本涵盖了省内放牧地区，牛羊总阳性率为11.2%。阳性结果见图1。

图1莱姆病血清抗体检测结果

3.2 不同县（市、区、场）抗体阳性率的χ2分析

此次检测的27个县中，有森林地貌的湟中县、大通种牛场、民和县、互助县、循化县、门源县、治多县阳性率为高，达到10%以上，这与上述地区广泛分布青海血蜱有一定的联系；而以草原及荒漠草原地貌的德令哈市、都兰县、天峻县、三角城种羊场、同德县、曲麻莱县有草原革蜱大量分布，有极强的关联性，上述各县阳性率明显高于其他县（p＜0.05），不同地区血清阳性率分布情况具体见表1。

4 讨论

莱姆病是一种通过蜱传染的自然疫源性人畜共患疾病，主要传播媒介昆虫是蜱，其他传播主要通过动物和人类、人类之间传播。由于青海省位于青藏高原东麓，地貌千变万化，既有适应青海血蜱生长的森林地带，也有适应草原革蜱生长的高原草场、荒漠草场；况且牛羊全为放牧饲养，蜱虫接触机会多，叮咬牛羊，给莱姆病的传播提供了有利的条件，综合本次调查结果，在省内放牧地区牛羊感染率均较高，如何防控家畜莱姆病是我们必须重视的课题，如何避开蜱虫放牧，在牲畜圈舍搞好灭蜱措施，对发病严重的家畜治疗等，都是今后要做的工作。

表1不同地区血清阳性率分布情况

笔者在青海省内从宿主动物（啮齿动物）、传播媒介（各类蜱虫）和易感家畜（牛羊）三个流行环节进行系统的分子流行病学调查后，获得自然疫源地的本底资料，意在阐明青海省内是否存在新的伯氏疏螺旋体基因型，是否存在与国内其他地区不同的媒介蜱种，以便根据已知菌株与测定菌株间的差异来鉴定未知菌株，准确地判定自然发生的疾病流行和人为的生物袭击，为病原体快速识别和来源追踪奠定基础。

[1] 张哲夫，林涛.中国莱姆病螺旋体生物媒介的初步调查[J].中华流行病学杂志，1992，1（5）：42.

[2] 朱琦，王东.新疆兵团农八师150团牛羊莱姆病的血清流行病学调查[J].石河子大学学报，2006，8（6）：457-459.

[3] 刘增加，华满堂，石淑珍.西北部分地区莱姆病与人、家养动物、啮齿动物关系的研究[J].医学动物防制；2000，16（6）：298-301.

[4] 刘光润，马秀兰.青海省三县林区莱姆病血清流行病学调查[J].中国公共卫生学报，1995，4（6）：202.

[5] 姜双应，易虎.青海省同德县莱姆病血清流行病学调查分析[J].青海医药杂志，2001，12（31）：51-52.

[6] 岳建宁，石燕.青海省部分林区莱姆病流行病学调查[J].中国媒介生物学及控制杂志，2009，4（4）：358.

[7] 孙毅，许荣满，刘增加，等.中华硬蜱、越原血蜱和青海血蜱经期传播莱姆病螺旋体的实验研究[J].昆虫学报，2003，46（6）：667-673.

Seroepidemiological Investigation of Lyme Disease in Yak and Sheep in Qinghai province

Ma Ruilin1，Wang Yi2，Wang Xiaorun1，Cai Jingshan1，Sheng Yanli1，Wang Xiezhong1，Zhang Maohu1
（1.Qinghai Center for Animal Disease Control and Prevention，Xining，Qinghai 810001；2.College of Animal Sciences and Technology，Sichuan Agricultural University，Ya’an，Sichuan 625014）

In order to understand the infection status of Lyme disease in yak and tibetan sheep in Qinghai province，from May to October，2013，1375 serum samples were collected，including 804 yak serum samples and 571 Tibetan sheep serum samples for investigation of Lyme disease antibodies in the breeding animal farms in the province’s 27 counties（city or district）by indirect immunofuorescence assay，χ2was used to compare differences of the positive rates among different counties（city or district）. The results showed，yak serum positive samples was 97，with a positive rate of 12.06%；Tibetan sheep serum positive samples was 57，with a positive rate of 9.98%. The positive rates were different among the investigated counties（city， district），The positive rates in yak and Tibetan sheep in some counties were higher in the province， suggesting that there may be a natural focus of Lyme disease in Qinghai province.

Lyme disesae；IFA；seroepidemiology；yak；Tibetan sheep

S813.6

：B

：1005-944X（2014）06-0062-03