评价8种血清标志物在原发性肝癌诊断中的临床价值

赵运胜，王 猛，崔辰莹，李洪臣，廖 飞

（1.河北省秦皇岛市第一医院检验科 066000；2.重庆医科大学检验医学院 400016）

原发性肝癌（primary hepatic cancer，PHC）是目前世界上致死率最高的恶性肿瘤之一［1］。血清甲胎蛋白（alpha-fetoprotein，AFP）是目前检测PHC最常用的肿瘤标志物，但其灵敏度和特异性都不够满意［2］。血清高尔基体蛋白73（serum Golgi glycoprotein 73，GP73）、甲胎蛋白异质体3（Lectin-reactiveaipha-fetoprotein，AFP-L3）、异常凝血酶原（des-γ-carboxyprothrombin，DCP）、磷脂酰基醇蛋白聚糖-3（glypican-3，GPC-3）有望成为诊断 PHC及预后的新标志物［3－4］。为探讨这些血清标志物对我国肝癌的诊断价值，作者同时检测了50例PHC患者血清中 GP73、AFP-L3、DCP、GPC-3、AFP、CA199、癌胚抗原（carcinoembryonic antigen，CEA）和铁蛋白（ferritin，FER）水平，并分析评价8种标志物的联合检测效能，以提高诊断和早期PHC预警的临床应用价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取河北省秦皇岛市第一医院2011年4～9月的住院、门诊和体检人员共计130例，其中经过病理检验明确的早期PHC患者50例（男38例，女12例），年龄32～81岁，平均57岁；慢性肝炎患者20例（男11例，女9例），年龄36～57岁，平均48岁；肝硬化患者20例（男15例，女5例），年龄41～81岁，平均55岁；其他消化系统恶性肿瘤患者20例（男14例，女6例），年龄47～78岁，平均69岁，未见肝转移；健康对照者20例（男10例，女10例），年龄21～45岁，平均34岁。

1.2 方法

1.2.1 试剂与仪器 GP73、DCP、GPC-3测定试剂盒购自上海瑞奇科技有限公司，AFP-L3分离纯化试剂盒购自北京热景生物技术有限公司，AFP、CA199、CEA、FER测定试剂盒购自上海罗氏诊断产品有限公司，CODA全自动酶标仪和罗氏2010电化学发光仪。

1.2.2 标本采集 受检者均采集空腹静脉血3mL，用促凝管采血后将分离的血清储存于－80℃冰箱待测。

1.2.3 检测方法 GP73、DCP、GPC-3测定采用酶联免疫定量方法检测，按说明书操作。AFP-L3分离采用微量离心柱法，按说明书操作。采用罗氏电化学发光法测定血清CA199、CEA、总AFP和分离洗脱液中AFP-L3浓度，并计算AFP-L3占总AFP的比例。

1.3 统计学处理 利用SPSS13.0统计软件进行统计学分析。检测数据均为偏态分布，采用中位数（四分位数）表示，多组间比较采用 Kruskal-Wallis检验，两组间比较采用 Mann－WhitneyU非参数检验。ROC曲线评价各指标对PHC诊断的敏感度、特异性、准确率，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

图1 8种血清标志物鉴别诊断PHC的ROC曲线分析

2.1 各组8种血清标志物浓度检测结果比较 肝癌组GP73、AFP-L3（%）、AFP 和 CA199 浓 度 明 显 高 于 其 他 组 （P＜0.05）。肝癌组DCP和GPC-3浓度明显高于除肝硬化组外的其他组（P＜0.05）。肝癌组CEA和FRE浓度仅明显高于对照组（P＜0.05），见表1。2.2 ROC曲线分析8种血清标志物对PHC的鉴别诊断效果 8种 标 志 物 ［GP73、AFP-L3（%）、AFP、DCP、GPC-3、CA199、CEA和FER］ROC曲线下面积分别为0.824、0.745、0.668、0.640、0.635、0.732、0.642、0.621，95%可信区间分别为0.735～0.912、0.650～0.841、0.564～0.773、0.533～0.746、0.527～0.743、0.641～0.824、0.543～0.741、0.516～0.725，P＜0.05。通过 ROC曲线分析将 GP73、AFP-L3（%）、AFP、DCP、GPC-3、CA199、CEA和FER鉴别诊断肝癌的临界值分别设定为72.70μg／L、15.0%、108.00μg／L、37.5μg／L、20.7μg／L、67.7U／mL、2.78μg／L、253.00μg／L，见图1。

表1 各组8种血清标志物浓度检测结果比较

表2 8种血清标志物单项及联检对PHC的诊断价值比较

2.3 8种血清标志物单项及其联合检测对PHC的诊断价值单项检测中，GP73的灵敏度和准确率最高，GPC-3的特异性最高。系列实验中GP73与其他一项或几项指标联合的特异性均可达100%，平行实验中8种肿瘤标志物联合检测的灵敏度最高（98.0%），见表2。

3 讨 论

GP73、AFP-L3（%）、DCP和 GPC-3等是新近发现的PHC血清标志物［5－6］。本文结果显示肝癌患者GP73浓度明显高于非肝癌患者，肝硬化和其他消化系统肿瘤患者血清中GP73浓度与对照组和肝炎组相比也有所升高。之前也曾有过文献报道随着肝脏疾病的发展，GP73升高［7］，肝硬化和肝癌患者中GP73水平明显高于肝炎患者和健康人［8］。ROC曲线下面积分析GP73最大，单项检测中其灵敏度为72.0%，明显优于AFP，特异性为95.0%，这与以往的大部分研究结果一致［9－10］。因此，本文结果支持血清GP73浓度对检测肝癌的临床意义。

本文数据表明肝癌组血清中AFP-L3（%）和AFP明显高于其他组。文献曾报道AFP在肝癌、胃癌、肺癌、胰腺癌、胆道肿瘤和睾丸肿瘤等多种临床疾病的患者血清中升高［11］，说明AFP诊断 PHC的特异性不够。AFP-L3（%）灵敏度为60.0%，优于AFP，可作为低浓度AFP的PHC的互补诊断指标［12－13］。另外，结果表明肝癌患者DCP和 GPC-3浓度明显高于除肝硬化外的其他组，说明DCP和GPC-3对于肝癌的鉴别诊断也有相当的临床价值。但其灵敏度分别为44.0%和42.0%，与AFP相比并未体现出优势。CA199的检测灵敏度和AFP相当，它常作为诊断消化系统恶性肿瘤通用标志物之一。CEA和FER单独测定仅可作为一种广谱肿瘤标志物。相应地，其与GP73等其他指标联合检测可提高肝癌检出灵敏度。

本文结果表明，多种肿瘤标志物联合检测可提高诊断PHC的灵敏度和特异性，GP73与其他一项或几项指标联合的特异性均可达100%，可作为确诊PHC的较好标志物组合。平行实验中以8种肿瘤标志物联合检测的灵敏度最高（98.0%），可作为排除肝癌的较好的判断方法。GP73／AFP准确率最高，诊断效果最好。因此，在平时临床工作中，可根据不同的诊断目的选择不同的项目组合。总体而言，本文结果表明血清GP73和AFP-L3单独诊断PHC的灵敏度和特异性都优于单用AFP；其联合其他标志物检测可提高对PHC诊断的可靠性。

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