系统性红斑狼疮患者尿液相关细胞因子的检测及临床意义探讨

庹艳红 卢金金 马特安

系统性红斑狼疮(systemiclupus erythematosus，SLE)是一种表现为多器官多系统损害的慢性系统性自身性免疫性疾病，临床表现多样。SLE发病机制复杂，常为遗传、感染、内分泌、药物等因素相互作用的结果，这种相互作用激活T细胞，活化的T细胞进一步激活B细胞，导致过多的自身抗体产生，被自身抗体损伤的组织细胞所产生的自身抗原进一步致使T细胞活化。SLE临床危害大，能够早期治疗多数患者可获得疾病缓解，因此及时的治疗非常重要，因此临床上早期对SLE患者各系统损害诊断具有重要意义。本研究联合检测和比较有肾脏表现的和无肾脏表现的SLE患者的尿液细胞因子TNF-α、TGF-β1、IL-6、MCP-1 水平，以探讨其与狼疮疾病活动的相关性。现将结果报告如下。

资料与方法

1．一般资料:选择笔者医院2011年1月～2012年12月门诊就诊或住院诊断明确的系统性红斑狼疮患者86例，其中女性79例，男性7例，年龄14～49岁，平均年龄23．2±9．8岁，SLE的诊断按第7版《内科学》诊断标准［1］。所有患者按照系统性红斑狼疮病变活动指数［2］(systemic lupus erythematosus disease activity index，SLEDAI)分为疾病活动组(SLEDAI≥10分，C组)和疾病非活动组(SLEDAI＜10分，B组);另外30健康成年志愿者作为正常对照组(A组)。C组患者52例，男性4例，女性48例，平均年龄22．9±10．7岁;B组患者34例，男性3例，女性31例，平均年龄23．5±9．6岁，A组志愿者男性2例，女性28例，平均年龄24．1±12．0岁。3组受试者两两比较，年龄、性别构成比无统计学差异，具有可比性。

2．标本采集及检测方法:收集各组受检者晨尿，离心后除去细胞及沉淀，置于-80℃冰箱保存，所有标本同一时间由专人按照试剂盒说明书操作检测。TNF-α、TGF-β1、IL-6、MCP-1检测试剂盒购自美国Biosource公司，采用免疫散射比浊法检测。其中C组患者经糖皮质激素和(或)联合免疫抑制剂治疗后达到临床缓解期后，再次SLEDAI评分，并再次检测以上4种细胞因子水平。

3．疗效判断标准:患者经糖皮质激素联合免疫抑制剂(环磷酰胺、或霉酚酸酯、或他克莫司等)治疗后，病情得到控制，临床上蛋白尿明显减轻或转阴，自身抗体转阴，浆膜炎好转，判定为完全缓解;若患者表现为轻度蛋白尿或低补体血症，判定为部分缓解。

4．统计学方法:采用SPSS 18．0统计软件进行统计学分析，计量资料用均数±标准差(±s)表示，组内比较采用t检验，组间比较采用单因素方差分析。相关分析采用直线相关分析，以P＜0．05为差异有统计学意义。

结 果

1．各组患者 SLEDAI评分及尿液 TNF-α、TGF-β1、IL-6、MCP-1水平:C 组患者临床上完全缓解，个别患者部分缓解。SLE患者(B组、治疗前后C组)尿液细胞因子 TNF-α、TGF-β1、IL-6、MCP-1水平均明显高于A组正常志愿者(P＜0．05)，且疾病活动期患者(C组治疗前)尿液细胞因子TNF-α、TGF-β1、IL-6、MCP-1水平均明显高于 B组狼疮疾病非活动者(P＜0．05)，而C组患者经药物治疗后，疾病活动得到控制，其尿液细胞因子水平较治疗前亦明显下降(P＜0．05)。

表1 各组受试者SLEDAI评分及尿液TNF-α、TGF-β1、IL-6、MCP-1水平比较

2．相关性分析:B组、治疗前后C组患者尿液TNF-α水平与疾病活动指数SLEDAI评分呈正相关(r值分别为 0．602、0．599、0．784，P 均 ＜ 0．05);B组、治疗前后C组患者尿液TGF-β1水平与疾病活动指数SLEDAI评分呈正相关(r值分别为0．629、0．741、0．683，P 均 ＜0．05);B 组、治疗前后 C 组患者尿液IL-6水平与疾病活动指数SLEDAI评分呈正相关(r值分别为0．596、0．637、0．810，P 均 ＜0．05);B组、治疗前后C组患者尿液MCP-1水平与疾病活动指数SLEDAI评分呈正相关(r值分别为0．633、0．667、0．824，P 均 ＜0．05，表2)。

表2 各组患者尿液TNF-α、TGF-β1、IL-6、MCP-1水平与SLEDAI评分相关性

讨 论

SLE临床表现多样化，多系统受累，如狼疮肾炎(lupus nephritis，LN)是SLE最常见且严重的临床表现之一，25%的SLE患者以肾脏受累为首发症状，经肾活检证实超过90%的SLE患者均存在不同程度的肾脏损害，肾脏受累和进行性肾功能损害仍是SLE患者死亡的主要原因，尤其是活动性狼疮，临床预后凶险［3］。肾活检是狼疮性肾炎或狼疮确诊的重要检查手段，但是部分患者因病情过重不能行肾活检检查，或者部分患者肾活检检查明确病理诊断并激素治疗后需要再次评估病情或判断预后，需要一些无创的检测方法，因此如果能通过尿液无创性检测一些生物标志物为患者疾病活动性以及预后判断，将会给患者临床药物治疗提供有益的参考。

疾病的活动程度与病程进展、疾病治疗效果、疾病预后密切相关。SLE疾病活动指数(SLEDAI)常用来作为临床上患者疾病活动的定量评价标准，其评分可较好地反映疾病活动程度，患者治疗后疾病处于稳定期评分较低［4，5］。SLE 发病机制复杂，免疫调节异常为其主要发病机制。近年来SLE患者尿液标志物检测成为研究热点。TGF-β1由树突状细胞、巨噬细胞、T细胞和NK细胞合成，具有多种效能，是一种强效的免疫抑制因子，有抗炎作用。De Muro等［6］研究发现尿液TGF-β1水平和肾活检结果相关检测显示，其与多种肾脏病理改变，如新月体形成、免疫复合物的沉积和血管增生程度显著相关，Jin等［7］研究发现SLE患者血液TGF-β1水平也与肾脏病变严重性明显相关。但是尿TGF-β1与SLE患者疾病活动是否也具有相关性，尚未见报道。本研究结果显示，SLE患者尿液TGF-β1水平较正常者明显升高，且活动性SLE患者其水平较稳定期患者明显升高。同时活动性狼疮患者经药物治疗后，病情得到控制，其活动性评分下降，同时尿液TGF-β1水平也下降，且SLE患者尿液TGF-β1水平与疾病活动指数SLEDAI评分呈正相关。由此推测尿液细胞因子检测可能成为判断疾病是否活动的标志以及间接判断药物治疗效果。

为了提高尿液细胞因子的检测对疾病的活动程度价值，本研究还同时观察了其他几种细胞因子的变化。IL-6是由单核细胞、T细胞、B细胞、内皮细胞、纤维母细胞和血管间皮细胞产生的细胞因子，它能促进机体产生抗体。Brugos等［8］研究显示血、尿IL-6水平与SLE患者或狼疮性肾炎患者疾病严重程度明显相关，如狼疮性肾炎患者尿IL-6水平明显高于SLE不伴肾损害患者的水平，推测其可作为预测SLE患者早期肾损害的指标。本研究结果显示，SLE患者尿IL-6水平与SLEDAI评分呈正相关，提示SLE患者尿液IL-6水平的检测也可能成为判断狼疮疾病是否活动的标志以及间接判断药物治疗效果。

MCP-1是单核-吞噬细胞趋化因子，主要由浸润的单核-吞噬细胞、血管平滑肌细胞，以及肾小球系膜细胞、内皮细胞、间质纤维母细胞、足突细胞、肾小管上皮细胞等在各种细胞因子、理化作用下合成和分泌，是肾脏表达最广泛的趋化因子。Singh等［9］研究发现狼疮性肾炎患者尿液MCP-1水平较SLE非肾综损害患者水平明显升高，进而推测尿液MCP-1可以作为一种无创性检查判断SLE患者肾脏损害严重程度。TNF-α是一种单核因子，主要由单核细胞和巨噬细胞产生，脂多糖是较强的刺激剂。中性粒细胞、星状细胞、内皮细胞、平滑肌细胞亦可产生TNF-α。国外多项研究也发现LN患者尿TNF-α水平明显高于SLE不伴肾损害患者的水平［8，10］。本研究同时发现，SLE患者尿液TGF-β1、IL-6水平较正常者明显升高外，其他细胞因子MCP-1、TNF-α也具有与TGF-β1相同的变化趋势，且SLE患者尿液MCP-1、TNF-α水平与SLEDAI评分均呈正相关。因此推测联合检测以上尿液细胞因子的水平可进一步提高其判断狼疮活动性的价值。

综上所述，尿液细胞因子检测是一种无创性检查，系统性红斑狼疮患者尿液相关细胞因子TNF-α、TGF-β1、IL-6、MCP-1 水平与患者疾病活动明显相关，可作为判断狼疮是否活动的指标，值得临床大规模实验进一步证实。

1 陆再英，钟南山．内科学［M］．7版．北京:人民卫生出版社，2008:856-866

2 Touma Z，Gladman DD，Ibañez D，et al．SLEDAI-2K Responder Index 50 captures 50%improvement in disease activity over 10 years［J］．Lupus，2012，21(12):1305-1311

3 Schwartz MM，Korbet SM，Katz RS，et al．Evidence of concurrent immunopathological mechanisms determining the pathology of severe lupus nephritis［J］．Lupus，2009，18(2):149-158

4 Stojan G，Fang H，Magder L，et al．Erythrocyte sedimentation rate is a predictor of renal and overall SLE disease activity［J］．Lupus，2013，22(8):827-934

5 Petri MA，van Vollenhoven RF，Buyon J，et al．Baseline predictors of systemic lupus erythematosus flares:data from the combined placebo groups in the phase Ⅲ belimumab trials［J］．Arthritis Rheum，2013，65(8):2143-2153

6 De Muro P，Faedda R，Fresu P，et al．Urinary transforming growth factor-beta 1 in various types of nephropathy［J］．Pharmacol Res，2004，49(3):293-298

7 Jin T，Almehed K，Carlsten H，et al．Decreased serum levels of TGF-β1 are associated with renal damage in female patients with systemic lupus erythematosus［J］．Lupus，2012，21(3):310-318

8 Brugos B，Vincze Z，Sipka S，et al．Serum and urinary cytokine levels of SLE patients［J］．Pharmazie，2012，67(5):411-413

9 Singh RG，Usha，Rathore SS，et al．Urinary MCP-1 as diagnostic and prognostic marker in patients with lupus nephritis flare［J］．Lupus，2012，21(11):1214-1218

10 Farid TM，Abd El Baky AM，Khalefa ES，et al．Association of tumor necrosis factor-alpha gene polymorphisms with juvenile systemic lupus erythematosus nephritis in a cohort of egyptian patients［J］．Iran J Kidney Dis，2011，5(6):392-397