流式细胞术在医学检验教学中的实践

李 岩，徐雪松

（1.首都医科大学附属北京友谊医院临床检验中心，北京100050；2.吉林大学中日联谊医院）

流式细胞术在医学检验教学中的实践

李 岩1，徐雪松2

（1.首都医科大学附属北京友谊医院临床检验中心，北京100050；2.吉林大学中日联谊医院）

流式细胞术是以免疫荧光标记技术为基础，集光电检测技术、计算机技术与单克隆抗体等技术为一体的现代检测手段。该技术以其分辨率高、敏感性与特异性强、应用范围广泛、技术密集度高等特点，现已成为临床诊断与科研领域广受好评与不可或缺的一项新技术。

目前，在临床实验教学工作中，对于这项新型的重要实验技术，仍较少被列入高等医学院校的常规教学安排中，本单位针对此现象，对于2009－2010级首都医科大学、北华大学医学部与哈尔滨医科大学的共21名临床检验专业本科生，在其生产实习过程中安排了此项教学实践，现将结果报告如下。

1 课程设计思路

由于流式细胞术是综合了光学、电子学、流体力学、细胞化学、生物学、免疫学以及激光和计算机等多门学科和技术，因此涉及的知识点与基础知识较多，而授课对象则是科研经历与临床知识相对比较薄弱的大学本科学生，因此需要有所取舍、突出重点进行讲解。教学中，既要对相关基础知识与概念进行理论介绍与阐述，同时也应安排相应的实验与见习时间使学生对这项技术手段有更直观了解与切身的体会，从而有助于其对所学理论知识的认识与深化，同时也能在实践中提高学生的动手操作能力与科研意识。因此我们将课程设计为理论课以及实验操作与见习课两部分进行。其中理论课教学以流式细胞术的基本概念、检测原理、应用领域等方面为重点进行讲解。实验操作与见习课则分别安排实验操作部分与实验报告解读部分等内容。目的是通过这些课程设计，帮助学生直观的了解和认识流式细胞术分析的全过程，从而为学生拓展思路、未来从事临床与科研工作奠定基础。

2 课程安排与授课要点

2.1 理论课教学：3学时

内容包括流式细胞术基本概念、检测原理、实验操作、结果分析、应用领域等方面。其中流式细胞术所用仪器的检测机理与应用领域被作为讲述重点。同时针对涉及到的基本概念也需要予以介绍。

流式细胞术所用仪器采用激光与电子技术，以单克隆抗体和荧光标记技术为反应体系，并用计算机系统对单个细胞进行多参数检测并进行数据处理分析，具有检测速度快、测量指标多、采集数据量大、分析全面、方法灵活等特点，具有分析的精确性、特异性和灵敏度高的特点。此仪器结构与技术复杂、先进，且不易掌握。因此，应制作形象直观的仪器的结构图与检测的流程图，结合动画幻灯课件进行讲解，以期使学生对于技术要点得到直观与形象的了解与认识。

流式细胞术可以在短时间内分析数以百万计的大量细胞，因此，如何对于海量数据进行后期分析，以及如何充分的发挥这项技术在临床与科研活动中的价值，则是授课工作中的难点。在授课过程中，应将数据分析时不同细胞群的确认与设门原则作为讲解重点，对于不同细胞群的抗原表型的特点与分化规律，则应抓住重点，避免面面俱到，应以特殊细胞群的最有代表性的抗原特点进行介绍，并密切结合举例、图表加以讲解，重点阐述结果分析时的分析思路与判定原则。从而在有限的时间内将分析的原则与重点传授给学生。

2.2 实验与见习教学：6学时

实验操作：4学时

淋巴细胞亚群检测：包括样本处理、抗体标记、细胞分离、上机检测、细胞群设门、结果确认、报告分析与实验报告撰写等。

本项实验操作安排，以血液标本中的淋巴细胞亚群检查为思路，设计“正常人”标本、免疫缺陷病患者标本与免疫增殖性疾病患者标本各1组，共3组实验，在2009级临床医学检验专业21名学生中进行实验安排，实验3个人为1组，共分7组进行。

本课程在此部分所安排的教学内容具有操作相对简易、技术较为成熟以及代表性强的特点。通过此项实验操作，有助于学生直观的了解和认识流式细胞术的样本制备、免疫标记、仪器检测与结果分析的全过程。

首先，指导教师先向学生系统性讲授相关的知识要点，基本实验技能，讲清操作要点及注意事项，并做必要的操作演示。然后，在教师的指导下，学生根据已经掌握的基础知识，亲自动手进行实验操作。在上机检测并采集数据后，由教师指导学生进行设门，检测目的细胞群，并分析检测结果，从而使学生对淋巴细胞亚群的特点与分析思路有了更直观、全面的认识，进一步加深对所学知识的融会贯通。

病例报告解读：1学时：

解读急性粒细胞性白血病2例，急性淋巴细胞性白血病、慢性粒细胞性白血病、淋巴瘤与多发性骨髓瘤的骨髓标本检测结果各1例，共6例。

在此部分教学，由带教老师根据典型临床病例的检测结果，结合学生所学的临床基础知识进行讲解与分析，突出知识点与诊断要点，将患者标本所表现出的细胞分化抗原的特征行异常变化作为重点，联系临床表现进行阐述。

提问与讨论：1学时。

通过师生互动与交流，诱导学生能够主动联系所学知识，紧跟老师思路，启发学生的学习兴趣并拓展思路，以期取得良好的教学效果。

3 教学考核

3.1 考核内容

理论部分：占40%，包括基本概念、检测原理、结果分析原则、应用领域等。

实验报告：占30%。

病例分析：占30%，内容包括淋巴细胞亚群、急、慢性白血病的检测结果分析原则与结论。

3.2 考核结果

参与考核人数21人，90分以上3人，81－90分10人，71－80分7人，61－70分1人。合格率：100%。

4 讨论

培养学生的科研素质及创新精神、创新能力是深化高等医学教育教学改革根本性的指导思想［1］，在实验医学与检验医学本科生及研究生的教学工作中开设流式细胞术课程，有利于拓宽学生的视野和改善学生的知识结构，提高学生的综合素养、创新能力与科研素质，有利于培养更多的合格人才。同时可以培养学生的自学能力与科研能力，是提高学生综合能力的有效方法。

本次教学工作将流式细胞术检测方法、免疫学中的抗原抗体反应的基本原理、光电检测技术、计算机技术、细胞化学与生物学、病理生理学等多门课程中的知识点联系起来，让学生体会到了知识的协调性、联系性。调动了学生的主观能动性，训练了学生的实验操作技能，同时加深了学生对理论知识的理解和掌握。教学过程中，教师讲理论知识与实践活动密切结合，既考察理论重点、知识点的掌握，也注重指导教学实践活动中的动手能力、理论联系实际的能力、实验习惯、分析与解释试验结果的能力等。通过撰写实验报告，训练学生的逻辑思维能力和归纳总结能力。

本次实验选择的实验项目与临床和科研的关系相对密切，提高了学习的趣味性，增加了学生动手的机会，培养了学生独立思维能力与科研协作能力，帮助学生把多种不同学科的知识有机地融为一体，为未来的科研实验活动打下基础。

［1］王晓楠，吴正升，刘 淼.综合性实验在病原生物学与免疫学实验教学中应用初探［J］.安徽医药，2012，16（6）：865.

2013－08－16）

1007－4287（2014）10－1740－02