大肠癌中Livin 和Survivin 的表达及相关性研究

郑国文

(四川省乐山市中区人民医院病理科，四川 乐山614000)

Livin 是近年新发现的IAP(inhibitor of apoptosis protein)家族中的一种细胞凋亡抑制基因，具有抗凋亡作用，其表达阳性与肿瘤的发生、发展、转移和预后密切相关［1］。Survivin 是IAP 家族的一个新成员，有学者研究也证实Survivin 在肿瘤发病中起重要作用，与凋亡指数呈负相关［2］。本研究应用免疫组织化学SP 法检测40 例大肠癌组织Livin 和Survivin 的表达情况，进一步探讨Livin 和Survivin 的相关性，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2011 年8 月至2012 年8 月就诊于我院的40 例经病理检查证实的大肠癌患者的癌组织及其癌旁组织标本。标本的获取均经患者知情同意，并签署知情同意书。其中高、中分化28例，低分化l2 例;A-B 期16 例，C-D 期24 例;有淋巴结转移25 例，无淋巴结转移15 例。

1.2 方法 采用免疫组化SP 法检测组织中Livin和Survivin 蛋白的表达。SP 试剂盒及兔抗人Livin多克隆抗体、羊抗人Survivin 多克隆抗体购于北京中杉生物技术有限公司。实验过程按照产品说明书进行，以PBS 缓冲液分别代替一抗作为阴性对照。

1.3 结果判定 严格按照试剂盒说明书的诊断标准执行。Livin、Survivin 阳性细胞是指细胞质内出现棕黄(褐)色颗粒。采用半定量积分法判定免疫组化染色结果:细胞无着色或阳性细胞的比例＜5%为阴性(-)，阳性细胞比例5% ～25%为弱阳性(+);阳性细胞比例～50%为中等阳性(++);阳性细胞比例＞50%为强阳性(+++)。由两名富有经验的拥有高级职称的病理医师独立对免疫组化染色结果分别进行评分［3］。

1.4 统计学方法 应用SPSS 12.0 软件进行数据分析。率的比较采用χ2检验。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 Livin 和Survivin 在大肠癌组织及癌旁组织中的表达 大肠癌组织中Livin 蛋白的阳性表达率为75%，Survivin 蛋白的阳性表达率为70%，均高于癌旁组织的阳性表达率(分别为20.0%和2.5%)，差异有统计学意义(P＜0.05)，见图1、图2、表1。

2.2 Livin 和Survivin 在大肠癌组织中的表达及相关性分析 40 例大肠癌组织中，Livin 和Survivin蛋白表达均为阳性共26 例，均为阴性8 例。Livin和Survivin 在大肠癌组织中的表达有关(χ2=15.87，P＜0.05)，见表2。

图1 Livin 蛋白表达(SP×100) a:在大肠癌旁组织中的表达(-);b:在大肠癌组织中的表达(+)

图2 Survivin 表达(SP×100) a:在大肠癌组织中的表达(-);b:在大肠癌组织中的表达(+)

表1 Livin 和Survivin 在大肠癌及癌旁组织中的表达

表2 Livin 和Survivin 在大肠癌组织中的表达及相关性分析

3 讨论

大肠癌是最常见的恶性肿瘤之一，近年来发病率呈逐年上升趋势。对大肠癌的发生、发展分子作用机制的研究将有助于大肠癌的早期诊断、早期治疗及预后判断［4］。大肠癌的发病除了与饮食因素有关外，还与抑癌基因失活、癌基因突变、细胞凋亡周期失控、细胞增殖异常关系密切。

Livin 基因是一种新发现抗凋亡作用最强的凋亡抑制基因，大量的Livin 蛋白出现抑制了细胞的凋亡，延长了肿瘤细胞的生存期，增加了细胞发生基因突变的机会，从而有利于大肠癌的发生［5］。本研究中，大肠癌组织中存在Livin 过度表达(75%)，而正常组织中不表达或低表达(20%)，说明在大肠癌发生过程中Livin 的异常表达可能参与了大肠癌的发生，且对于大肠癌的恶性程度和预后的预测有一定的价值。

研究证实，Survivin 蛋白过表达是大肠癌发生中的一种独立事件［6］。本研究结果显示，Survivin 蛋白在大肠癌中表达的阳性表达率为70%，Survivin在正常组织中的阳性表达率2.5%，Survivin 在大肠癌中的高表达与其发生、发展、分期和转移等相关［9］，这种高表达的差异使它有望成为新的肿瘤标志物和预后因子，其表达水平与治疗的敏感性相关，提示它是一个潜在的治疗靶点［7］。

本研究中表2 结果显示，Livin 和Survivin 蛋白在大肠癌组织的表达呈正相关，说明Livin 和Survivin 在大肠癌中具有协同作用［8］，联合检测Livin及Survivin 蛋白具有重要的临床意义。

［1］Takashima H，Nakajima T，Moriguchi M，et al. In Vivo expression patterns of survivin and its splicing variants in chronic liver disease and hepatoce1lu1ar carcinoma［J］.Liver Int，2005，25(1):77-84.

［2］东星，于波，周卫东. Livin 与Caspase-9 在大肠癌组织中的表达及临床意义［J］. 中国现代普通外科进展，2010，13(12):933-934.

［3］张韶光，郭世洲.Survivin、COX-2 在大肠癌中的表达及意义［J］.中国医药导报，2007，4(18):48-49.

［4］张翔，刘益飞. Livin 和Smac 蛋白在人大肠癌中的表达和意义［J］.交通医学，2009，23(5):476-477.

［5］张晓雨，周建农，高长明. Survivin 与大肠癌关系的研究进展［J］.中华肿瘤防治杂志，2006，13(5):391-392.

［6］牛剑祥，张俊晶，孟兴凯. Survivin 与大肠癌关系研究进展［J］.医学信息，2012，25(3):630-631.

［7］曹俐，吴君辉，李定军.Survivin 在大肠癌组织中的表达及临床意义［J］.中国现代普通外科进展，2006，9(4):247-248.

［8］陆娜娜，尹玉，曹立宇，等. 大肠癌中Livin 和Survivin 的表达及相关性研究［J］.中国组织化学与细胞化学杂志，2012，21(3):250-251.

［9］唐志蓉，刘欣雅，王平. 抗凋亡基因蛋白Survivin 与P53 蛋白在结直肠腺瘤中的表达及意义［J］. 实用医院临床杂志，2009，6(2):61-62.