卵巢上皮癌患者血浆溶血磷脂酸和组织HER2/neu 检测分析

杨浩昭

卵巢癌发病率位居妇科恶性肿瘤的第三位，由于其位居盆腔，缺乏明显的早期症状和体征，导致确诊较晚，患者死亡率位居妇科恶性肿瘤之首。研究发现，溶血磷脂酸(Lysop hosphatidic，LPA)可刺激卵巢癌细胞的生长和转移，检测血浆LPA 水平在卵巢癌的诊断和预后判断中有重要的意义［1］。人表皮生长因子受体2(Human Epidermal Growth Factor Receptor 2，HER2/neu)与卵巢癌的发生、发展、转移也有密切关系，且能影响卵巢癌对化疗药物、激素治疗药物的敏感性，其表达被认为是卵巢癌预后不良的重要指标［2］。LPA 和HER2/neu 均为细胞信号转导通路中的重要分子，两者可能通过共同的信号转导途径发挥作用，LPA 可能是HER2/neu信号通路的上游分子，也可能影响HER2/neu 的表达［3］。本组总结近年来我科接诊的卵巢上皮癌患者资料，并与同期就诊的卵巢良性肿瘤患者相关资料做比较，分析LPA 和HER2/neu 在卵巢上皮癌中的表达特点，初步探讨两者之间可能的相关性。

1 资料与方法

1.1 研究对象

2008 年1 月～2010 年1 月期间在我院合作医院手术治疗并经术后病理确认的卵巢上皮癌患者50 例，患者年龄39～73 岁，平均52.4 岁。患者病理类型如下:浆液性囊腺癌34 例，黏液性囊腺癌10 例，内膜样癌4 例，其他2 例。FIGO分期如下:Ⅰ期6 例，Ⅱ期12 例，Ⅲ期22 例，Ⅳ期10 例。患者术后残留癌灶最大直径均≤2 cm，术后接受2 ～6 周期的以铂类药物为主的联合化疗治疗，同时在我院接受中医药辅助治疗。

1.2 研究方法

1.2.1 血浆LPA 的测定 患者术后抽取空腹外周血3 ml，以LPA 检测试剂盒抗凝剂抗凝，根据产品操作说明处理样本并加入显色剂后，采用AVE-853 半自动生化分析仪在波长636 nm 处比色。当血浆LPA 浓度＞3.2 umol/L 时定为检测结果阳性，≤3.2 umol/L 时为阴性。

1.2.2 组织HER2/neu 的检测 以免疫组化SP 法检测卵巢上皮癌组织的HER2/neu 蛋白。SP 试剂和HER2 单克隆抗体购自北京中山生物工程公司。制取组织切片后按照试剂说明操作，染色后封片，在光镜下观察。按照PIZER［4］报道的评分标准，分别对染色强度和染色范围判分，将两者相加，总分≥4 分者定为表达阳性，＜4 分者定位表达阴性。

1.3 观察指标

观察血浆LPA 与病理分期的相关性、组织HER2/neu 与病理分期的相关性、LPA 和HER2/neu 两者的相关性。

1.4 数据处理

数据处理采用SPSS 17.0 统计学软件。率的比较采用χ2检验。p ＜0.05 定为差异具有统计学意义的标准。

2 结果

2.1 血浆LPA 与病理分期的相关性分析

50 例患者检出LPA 阳性45 例(90.0%)，其余5 例(10.0%)为阴性，分别为I 期3 例，Ⅱ期2 例。经χ2检验，不同病理分期患者的LPA 阳性率存在统计学差异(χ2=14.815，p ＜0.05)，病理分期越低，LPA 阴性的可能性越高，Ⅲ期、Ⅳ期患者LPA 阳性率可达100%。

2.2 组织HER2/neu 与病理分期的相关性分析

50 例患者组织HER2/neu 检查结果表明，阳性者15 例(30.0%)，阴性者35 例(70.0%)。各病理分期患者HER2/neu 检出情况见表1。χ2检验表明，不同病理分期患者的组织HER2/neu 阳性率无统计学差异(χ2=0.606，p ＞0.05)。

表1 组织HER2/neu 与病理分期的相关性分析 (n)

2.3 LPA 和HER2/neu 两者的相关性分析

在45 例血浆LPA 阳性患者中，检出HER2/neu(+)13例(28.9%)，阴性32 例(71.1%);在5 例血浆LPA 阴性患者中，检出 HER2/neu (+ )2 例(40.0%)，阴性3 例(60.0%)。χ2检验表明，不同血浆LPA 患者间组织HER2/neu 阳性率无统计学差异(χ2=0.265，p ＞0.05)。

表2 LPA 和HER2/neu 两者相关性分析

3 讨论

LPA 属脂类小分子，是多功能的“磷脂信使”，可通过G蛋白介导的多种信号途径发挥生物学效应，在卵巢癌患者的腹水、血浆中常可检测到其高水平表达，其增加的程度与病理分期呈正相关。分析表明，LPA 可能的来源有两方面:一是肿瘤细胞中磷脂酶A2 活力增高，LPA 分泌增加，升高的LPA 浓度作用于卵巢组织，可进一步刺激卵巢组织产生LPA，形成自分泌环;二是来自于活化的血小板，血小板活化后产生多种溶血磷脂如溶血磷脂酰胆碱(LPC)、溶血磷脂酰乙醇胺(LPE)、溶血磷脂酰丝胺酸(LPS)等，最后均可转变为LPA［3］。高水平LPA 可促进卵巢组织的生长、浸润和转化，是卵巢癌不良预后之一。在本研究中，LPA 的阳性率高达90.0%，5 例LPA 阴性的患者均为分期较低的(I 期3 例，Ⅱ期2 例)，Ⅲ期、Ⅳ期患者LPA 阳性率达100%。结果验证了LPA 表达水平与病理分期密切相关的观点。

HER2/neu 属于酪氨酸激酶表皮生长因子受体家族，正常情况下，只在胎儿期表达，成年后只有少数组织中可见到低水平表达。HER2/neu 具有多条信号转导通路，其中以丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen Activated Protein Kinase，MAPK)途径为主。HER2/neu 通过与家族中其他成员形成异源二聚体，从而与配体结合，在发生自身磷酸化后激活下游靶点。在15% ～34%的乳腺癌患者中可见到其高水平表达［5］。在卵巢癌患者中，其检出率各报道不一。MAYR 等［6］报道，在91%的卵巢癌患者中可见HER2/neu 高表达，且其表达水平与卵巢癌大小、淋巴结转移情况等正相关。FELIP 等［7］检测了106 例卵巢癌患者，检出了23 例HER2/neu 高表达患者，检出率为21.7%。卵巢癌组织中HER2/neu 检出率的差异巨大，可能与不同作者的检测方法、患者种族等因素有关。本研究共计检出15 例HER2/neu 阳性者，阳性率为30.0%，分别为I 期2 例，Ⅱ期4 例，Ⅲ期7 例，Ⅳ期2 例，各分期患者HER2/neu 的阳性率无统计学差异。本研究结果与FELIP等［7］的研究结论更为相近。

鉴于LPA 和HER2/neu 信号转导通路的相似性，有作者［3］猜测，LPA 可能与HER2/neu 存在相同的胞内信号转导通路，LPA 可能作为HER2/neu 的上游分子，具有激活HER2/neu 的作用。LPA 也可能影响HER2/neu 的表达。体外细胞培养-免疫沉淀反应证实，LPA 可诱导卵巢癌细胞中HER2/neu 分子的快速磷酸化，但并不能对HER2/neu 的表达产生影响。在本研究中，45 例LPA 阳性组患者检出HER2/neu 阳性13 例(28.9%)，阴性32 例(71.1%);5 例LPA 阴性组患者检出HER2/neu 阳性2 例(40.0%)，阴性3例(60.0%)，两组之间阳性率无统计学差异，说明LPA 不能影响HER2/neu 的表达，与上述外细胞培养-免疫沉淀反应中LPA 不刺激HER2/neu 表达的结论一致。但LPA 能诱导HER2/neu 分子的快速磷酸化，可能加速肿瘤的生长，恶化卵巢上皮癌患者的生存预期。本研究受病例数量较少、随访不严密等因素限制，无法验证此结论。

［1］ 韦德英，汤春生. 溶血磷脂酸与卵巢癌［J］. 现代妇产科进展，2004，13(4):297 -299.

［2］ 吴 冬，王 猛，惠 宁. 卵巢上皮性癌患者血清中HER2/neu 自身抗体的表达及诊断价值［J］. 第二军医大学学报，2010，31(10):1076 -1080.

［3］ 叶 璐，刘 斌，李书华，等. 溶血磷脂酸在卵巢癌细胞内HER2/neuHER2/neu 的激活作用［J］. 临床和实验医学杂志，2013，12(8):570 -571.

［4］ PIZER E S，THUPARI J，HAN W F，et al. Malonyl-coenzyme-A is a potential mediator of cytotoxicity induced by fatty-acid synthase inhibition in human breast cells and xenografts［J］. Cancer Res，2000，60(2):213 -218.

［5］ 唐迪红，施小六，陈主初，等. HER-2/neu 基因表达与卵巢上皮性癌的预后［J］. 医学临床研究，2004，21(6):600 -602.

［6］ MAYR D，KANITZ V，AMANN G，et al. HER -2/neu gene amplification in ovarian tumours:a comprehensive immunohistochemical and FISH analysis on tissue microarrays［J］. Histopathology，2006，48(2):149 -156.

［7］ FELIP E，CAMPO JMD，RUBIO D，et al. Overexpression of c -erbB-2 in epithelial ovarian cancer:prognostic value and relationship with response to chemotherapy ［J］. Cancer，1995，75(8):2147 -2152.