癌复灵对荷瘤小鼠免疫功能和术后体力恢复的影响

2013-12-23万军梅李红霞武汉职业技术学院生物工程学院湖北武汉430074湖北省肿瘤医院湖北武汉430079

中国医院药学杂志 2013年7期

万军梅，李红霞（.武汉职业技术学院生物工程学院，湖北武汉430074；.湖北省肿瘤医院，湖北武汉430079）

癌症患者在经过手术、放疗、化疗后，在未完全恢复正常生活前，要经历相当漫长的过渡时期，这个时期通常称为康复期，也称“继续治疗期”。康复期必须坚持继续治疗以防复发、转移和扩散。中医药治疗癌症不仅表现在杀灭癌细胞、抑制肿瘤的临床治疗意义上，更体现在防止复发、转移和提高患者生命质量的康复治疗过程中［1］。中医药在癌症康复阶段可起到“既病防变”和“治未病”的独特作用［2］。癌复灵是湖北省肿瘤医院研制的中药复方制剂，具有健脾益气、补血养阴、培元固本的功效，临床上用于癌症放疗、化疗及手术后康复期患者，能增强体质调节免疫，促进手术后机体的恢复，有利于减少肿瘤复发和转移。通过对癌复灵的免疫功能调节和促进体力恢复作用的研究可以为其临床应用提供一定的药效学依据。

1 材料

1.1 药品与试剂癌复灵，灰棕色浸膏（湖北省肿瘤医院药剂科提供，批号20090316），1g浸膏相当于生药材6g，临用前用纯化水稀释至所需浓度；环磷酰胺（CTX，200 mg／瓶，江苏恒瑞医药股份有限公司，批号09061721）；羊抗小鼠IgG 10mg（华美生物工程公司，批号GM6030302E）；绵羊红细胞（SRBC）、豚鼠血清由湖北省实验动物研究中心提供；2－巯基乙醇（2－ME）（100mL／瓶，市售）。

1.2 动物昆明种小鼠，SPF 级，体质量18～20 g，雌雄兼用，由湖北省实验动物研究中心提供，动物合格证号：SCXK（鄂）2008－0005。

1.3 瘤株小鼠肉瘤180（S180），由华中科技大学同济医学院药物研究所提供。

2 方法与结果

2.1 对荷瘤小鼠化疗后血清溶血素含量和脾细胞分泌抗体功能的影响小鼠60只，随机分为6组，每组10只。分组情况如下（括号内为给药方式）：A.正常对照组：纯化水（ig）；B.荷瘤对照组：纯化水（ig）；C.荷瘤＋CTX：CTX 腹腔注射（ip）；D.荷瘤＋CTX＋癌复灵大剂量：CTX（ip），癌复灵4g·kg－1（ig）；E.荷瘤＋CTX＋癌复灵中剂量：CTX（ip），癌复灵2g·kg－1（ig）；F.荷瘤＋CTX＋癌复灵小剂量：CTX（ip），癌复灵1g·kg－1（ig）。实验安排如下：（1）实验周期20d，灌胃给药每天一次，连续20 d；（2）荷瘤：实验第8天，按常规方法［3］给B～F 组小鼠右腋皮下接种S180瘤液0.2mL／只；（3）化疗：瘤株接种后第1、5、10天分别给C～F 组小鼠ip CTX 50mg·kg－1，共3次；（4）免疫：分别于实验第7 天及第14天ip 20%SRBC 0.2mL／只免疫全部小鼠；（5）实验：末次灌胃给药后24h，小鼠摘眼球放血，取血清按文献方法［4］测IgG 及IgM，溶血素含量（hemolysin concentration，HC）分别以HCIgG、HCIgM及HCIg（HCIgG＋HCIgM）表示。同时，取胸腺、脾脏称重，计算脏器指数，并将每组脾脏混合制备脾细胞悬液，按文献法［4］测定抗体分泌细胞的功能。结果见表1、表2。

表1结果显示，小鼠荷瘤后，与正常对照组比较IgG 含量无变化，IgM 含量有所提高，但无明显差异；荷瘤后用CTX 化疗，IgG 及IgM 含量明显下降，与荷瘤对照组比较P＜0.01，而癌复灵4g·kg－1能明显对抗化疗所致的IgM 含量下降，改善化疗小鼠的体液免疫功能，对化疗所致的IgG 含量降低无明显影响。

表1 癌复灵对荷瘤小鼠化疗后血清溶血素含量的影响（±s，n＝10）Tab 1 Effect of Aifuling on the content of serum hemolysin in tumor－bearing mice（±s，n＝10）

注：与荷瘤对照组比较，aP＜0.01；与CTX 组比较，b P＜0.01

表2 癌复灵对荷瘤小鼠化疗后脾细胞分泌抗体功能的影响（±s，n＝10）Tab 2 Effect of Aifuling on spleen antibody－secreting cell function in mice（±s，n＝10）

注：与荷瘤对照组比较，aP＜0.05，b P＜0.01；与CTX 组比较，c P＜0.01

表2结果表明，荷瘤小鼠经CTX 化疗后，脾细胞分泌抗体功能明显减弱，而癌复灵4g·kg－1可明显对抗CTX 的作用，显著增强脾细胞分泌抗体的功能。各剂量组对CTX 所致的免疫器官质量减轻无明显影响。

2.2 对SRBC所致的荷瘤小鼠迟发型足垫肿胀的影响小鼠60 只，随机分为6 组，分组方式同前。小鼠连续ig 14d，第7天同前给B～F 组小鼠接种S180瘤株，荷瘤后第1 天及第5 天给C～F 组小鼠CTX 50mg·kg－1（ip），共2次。给药第10天，所有小鼠ip SRBC 2.0×108个致敏。第14 天末次ig给药后，每鼠右后足垫皮下注射SRBC 2.0×108个攻击，左后足垫皮下注射等量生理盐水作对照。24h后采用盲法用游标卡尺由两个观察者对实验小鼠后足垫厚度进行测量，以左右足垫的厚度差作为足垫肿胀度指标［5］，结果见表3。

表3 癌复灵对SRBC 致荷瘤小鼠迟发型足垫肿胀的影响（±s，n＝10）Tab 3 Effect of Aifuling on the delayed footpad reaction caused by SRBC（±s，n＝10）

注：与荷瘤对照组比较，aP＜0.01；与CTX 组比较，b P＜0.05

表3结果表明，CTX 能明显抑制足垫肿胀度，而癌复灵4g·kg－1能明显对抗CTX 所致的足垫肿胀度降低，改善化疗小鼠的细胞免疫功能。

2.3 对荷瘤小鼠化疗后手术恢复期体力的影响——小鼠游泳试验小鼠50只，按常规方法接种S180瘤株后随机分为5组，分组方式见表4。各组于荷瘤后第4 天、第7 天分别予CTX 80 mg·kg－1（ip），共2次，第8天在无菌条件下摘除腋下肿瘤，同时开始灌胃给药，CTX 组给纯化水，连续8d。末次给药后30 min，按文献［3］法将小鼠放入水槽进行游泳试验，水深25cm，水温（20±0.5）℃，记录自落水开始至鼻孔沉下水面所需时间，结果见表4。

表4 癌复灵对荷瘤小鼠化疗后游泳时间的影响（±s，n＝10）Tab 4 Effect of Aifuling on the swimming time in tumorbearing mice（±s，n＝10）

注：与CTX 组比较，aP＜0.05

表4结果显示，西洋参和癌复灵4g·kg－1均能明显延长小鼠游泳时间，有效改善化疗后手术恢复期体力。

3 讨论

肿瘤患者由于肿瘤的长期侵袭，机体素质明显下降，如再经手术切除、化疗、放疗的持续打击，大多数患者会处于气血两虚，免疫功能低下的状况。康复期的中医药治疗以扶正固本为最基本治则，而改善或促进免疫系统功能是扶正固本治则最重要的药理学基础［6］。

癌复灵由黄芪、党参、白术、茯苓、女贞子、丹参、蛇舌草、夜交藤等15味中药经水煎醇沉浓缩干燥而成，方中黄芪党参补气，白术茯苓健脾，女贞子补益肝肾，丹参夜交藤养血安神，整方兼顾气血阴阳达到扶正固本的功效，临床上用于癌症康复期患者，具有增强免疫，促进体力恢复，预防肿瘤复发转移的作用。现代研究表明，黄芪、茯苓、女贞子及丹参均能增强机体的免疫功能。研究结果显示，中药复方癌复灵能明显对抗CTX 化疗所致的IgM 含量降低；显著增强化疗小鼠脾细胞分泌抗体的功能；能明显对抗CTX 对SRBC所致足垫肿胀的抑制作用；能明显延长化疗后手术恢复期小鼠的游泳时间。说明癌复灵对荷瘤小鼠化疗后的细胞免疫及体液免疫功能均有增强作用，并能有效改善化疗后手术恢复期体力。药理实验结果为该药的临床应用提供了一定的理论依据，关于其免疫调节作用的机制和抗肿瘤转移作用有待进一步研究。

［1］施志明.中医中药抗肿瘤转移研究进展［J］.ITAC 国际中医药肿瘤学术大会，2007：38－42.

［2］张建中.中医药在癌症康复领域大有作为［J］.家庭中医药，2007，4：20.

［3］李仪奎.中药药理实验方法学［M］.2版.上海：上海科学技术出版社，2006：513－515.149.

［4］徐叔云，卞如濂，陈修.药理实验方法学［M］.3版.北京：人民卫生出版社，2002：1230－1231.

［5］ H.G.沃格尔，W.H.沃格尔.药理学实验指南—新药发现和药理学评价［M］.北京：科学出版社，2001：583.

［6］薛文翰，巨玉莲.中医扶正固本在治疗恶性肿瘤中的应用及机理探讨［J］.甘肃医药，2011，30（10）：664－666.