不同加工方法对泸州山银花挥发油含量的影响

2013-12-23刘艳熊伟李春红田吉何兵泸州医学院药物与功能性食品中心四川泸州646000泸州医学院公共卫生学院四川泸州646000

中国医院药学杂志 2013年23期

刘艳，熊伟，李春红，田吉，何兵（.泸州医学院药物与功能性食品中心，四川泸州646000；.泸州医学院公共卫生学院，四川泸州646000）

山银花为忍冬科植物红腺忍冬L.hypoglauca M、灰毡毛忍冬L.macranthoides H－M、华南忍冬L.confusa DC［1］的干燥花蕾或带初开的花，具有清热解毒、消痈散肿、凉血止痢之功效，主治痈肿、喉痹、丹毒、热毒血痢、风热感冒、温病发热等症。泸州古蔺山银花主要为灰毡毛忍冬L.macranthoides H－M，具有资源优势，但其成品颜色暗淡，香气较淡，价格偏低［2］。适时分批采摘金银花，控制好各加工干制方法的操作要点，是保证质量的重要技术环节。关于传统方法和现代干燥技术对泸州山银花挥发油的影响鲜有报道［3］。本研究以大白期泸州古蔺山银花为材料，采用阴干、晒干、真空干燥、远红外干燥、微波干燥、烘干6种方法加工山银花，对外观性状进行描述，采用气相色谱法测定山银花挥发油中芳樟醇的含量［4］，为提高和控制泸州山银花药材质量提供理论与技术依据。

1 材料

SDZF－6021真空干燥箱；远红外干燥箱；HX.BV－7型医用培养箱；Agilent 7890A 气相色谱仪（美国Agilent 公司），7693B自动进样器，氢火焰离子化检测器（FID）；玻璃挥发油提取器；Precisa电子天平（XR205SM－DR）。

泸州山银花药材，2011年5月采自泸州市古蔺县山银花栽培基地（经泸州医学院生药教研室税丕先教授鉴定为泸州山银花L.macranthoides H－M）。芳樟醇对照品（含量97%，美国Aldrich公司，批号01816HI）。乙醚为分析纯。

2 方法与结果

2.1 干燥方法及对山银花外观品相的影响

2.1.1 干燥方法将鲜花采回后，拣选大小均匀的花蕾，选择以下6种方法干燥：晒干，选择多日晴好天气，松散的薄摊于竹帘上暴晒。阴干，薄摊于竹帘上，置于阴凉处晾干。真空干燥，薄摊于真空干燥箱中，置于40 ℃（0.1 MPa）下烘干。烘干，薄摊于烘箱中，置于40 ℃下恒温烘干。远红外干燥，薄摊于远红外干燥箱中，置于40 ℃下恒温干燥。微波干燥，薄摊于微波炉中，三段式干燥，微波干燥2 min，取出发汗，放置至室温后，再微波干燥2 min，放置至室温后再干燥至全干。

2.1.2 干燥品外观检查结果从外观颜色、质地评价，真空干燥样品最好，烘干样品次之，阴干≥晒干＞远红外干燥＞微波干燥；从香气和油润度评价，阴干最好，微波干燥最差，其他4种方法差别不大。见表1。

2.2 GC测定方法及结果

2.2.1 溶液的制备

（1）对照品溶液：取芳樟醇对照品37.46 mg，精密称定，置10 mL量瓶中，以乙醚溶解并定容，从中取1 mL置10 mL量瓶中，加乙醚稀释至刻度，摇匀，即得0.374 6 mg·mL－1。

（2）供试品溶液：取山银花药材50 g，精密称定，置圆底烧瓶中，加水500 mL，自测定器上端加水使充满刻度部分，再加乙醚3 mL，连接挥发油测定器［5］，连接回流冷凝管，加热蒸馏4 h，分取乙醚层，加适量无水硫酸钠脱水，定容为10 mL，即得。

表1 不同干燥方法加工的山银花外观品相Tab 1 The appearance of L.macranthoides H－M with different drying methods

2.2.2 色谱条件及专属性试验 HP－5石英毛细管柱（30.0 m×320μm×0.25μm）；FID 检测器，进样口温度：235 ℃，检测口温度245 ℃；载气：高纯氮气，流量：1 mL·min－1；补充气：氮气40 mL·min－1，分流1∶20；氢气，40 mL·min－1；空气，500 mL·min－1；程序升温，初始温度为90 ℃，以4 ℃·min－1速率升温至200 ℃，再以40 ℃·min－1速率升温至240 ℃，保持10 min；进样量：1μL。取对照品溶液、供试品溶液和溶剂（乙醚）各1μL，按上述色谱条件测定，结果显示溶剂和山银花挥发油中其他成分对测定结果无干扰，色谱见图1。

图1 芳樟醇对照品（A）、泸州山银花药材（B）和溶剂（乙醚）（C）的GCFig 1 GC chromatograms of linalool（A），L.macranthoides H－M（B）and solvent（ethylether）（C）

2.2.3 线性关系考察精密称取芳樟醇对照品50.075 mg，置25 mL量瓶中，用乙醚溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品储备液（芳樟醇质量浓度2.003 1 mg·mL－1），分别吸取对照品储备液1，2，4，5，6.0mL，置10 mL量瓶中，用乙醚稀释至刻度，摇匀，制成系列质量浓度的溶液。分别取1μL 注入气相色谱仪，记录色谱图。以峰面积（Y）为纵坐标，对照品进样量（X，μg）为横坐标，绘制标准曲线。结果芳樟醇在0.200 3～1.201 8 μg 线性关系良好，回归方程为：Y ＝518.01 X－90.758，r＝0.999 9。

2.2.4 精密度试验精密吸取“2.2.1”项下对照品溶液1 μL，按上述色谱条件连续进样6次，测得芳樟醇峰面积RSD为0.97%（n＝6），表明仪器精密度良好。

2.2.5 稳定性试验取“2.2.1”项下供试品溶液，室温下放置，于制备后0，2，4，6，8，12 h进样测定。结果芳樟醇峰面积RSD 为1.53%（n＝6），表明供试品溶液在12 h内稳定。

2.2.6 重复性试验取同一批药材（真空干燥样品），按“2.2.1”项下方法分别制得6份供试品溶液，进样测定，结果芳樟醇平均含量为0.014 9%，0.014 6%（n＝6），RSD 均为1.35%，表明上述方法重复性良好。

2.2.7 加样回收试验精密称取已知含量的山银花药材9份，每份25 g，分成3组，每组3份，分别按相当于供试品中芳樟醇80%，100%，120%的量加入对照品（不同加入量各3份），制备供试品溶液，依法测定。结果芳樟醇平均回收率为98.16%，RSD 为1.98%。实验结果表明，本法具有良好的回收率。

2.2.8 样品测定分别精密吸取对照品溶液和各供试品溶液1μL，照“2.2.2”项下色谱条件测定，记录芳樟醇的峰面积，并用外标法计算含量。

以挥发油中芳樟醇含量评价，真空干燥样品均高于其他方法，烘干、晒干、阴干3种方法差别不大，远红外干燥、微波干燥样品含量较低。结果见表2。