锦州地区奶牛子宫内膜炎病原菌分离鉴定与耐药性分析

陈 强，徐 阳，王立成，费东亮，苏禹刚

子宫内膜炎（endometritis）是在母牛分娩时或产后由于微生物感染所引起的，是奶牛不孕的常见原因之一［1］。目前在我国兽医临床统计，由子宫内膜炎引起的奶牛不孕占成牛母牛不孕症的17%以上［2］，严重影响了我国养牛业的发展。

由于奶牛子宫内膜炎在不同地区感染病原菌的种类有所不同［3］，而且锦州地区奶牛子宫内膜炎发病情况及主要致病菌的相关研究资料报道甚少，因此，本研究对锦州地区部分奶牛场患子宫内膜炎的奶牛子宫分泌液中主要病原菌进行了分离和鉴定，并通过对常用抗菌药物的耐药性分析，为该地区有效防治奶牛子宫内膜炎提供参考资料和数据。

1 材料与方法

1.1 供试牛

锦州地区奶牛场55头子宫内膜炎患牛。

1.2 病料采集

选择55头子宫内膜炎患牛。将奶牛阴户区进行常规的清洗、消毒，向子宫内注入20mL灭菌生理盐水，再抽取子宫分泌物2～3mL注入到已灭菌的肉汤培养基中，尽快放在37℃温箱中培养。

1.3 细菌分离鉴定

1.3.1 细菌分离 挑取少量用肉汤培养基培养了24h的菌液，在普通琼脂培养基上划线分离，置于37℃温箱中培养24h，再挑取单菌落在普通琼脂培养基上划线分离、培养。

1.3.2 细菌鉴定 挑起普通营养肉汤中菌液，涂片，进行革兰染色，镜检。根据菌落形态特征等将各分离纯化的细菌分类并将其分别接种于鲜血琼脂斜面，37℃培养24h后供生化试验用。

1.4 药敏试验

采用Kirby－Barer法。所选的药物有：红霉素、阿米卡星、菌必治、先锋必、青霉素、氨苄青霉素、链霉素、卡那霉素和环丙沙星。

2 结果与分析

2.1 细菌分离鉴定结果

55份病料中有47份中分离到细菌，细菌检出率为85.5%，其中单独感染占91.3%，混合感染占8.7%。47份病料中有细菌52株，分别为链球菌（56.4%，31／55）、葡萄球菌（27.3%，15／55）和大肠杆菌（16.3%，6／55）。

2.2 药敏试验结果

试验结果见表1，抗菌药物中对主要病原菌链球菌抑菌作用最强的为菌必治、先锋必和链霉素，其次为红霉素、青霉素和卡那霉素，耐药率分别为12.9%、9.7%、29.0%，而对阿米卡星、氨苄青霉素、环丙沙星不敏感，耐药率分别为58.1%、90.3%、54.8%；对主要病原菌葡萄球菌抑菌作用最强的为菌必治、先锋必和链霉素，耐药率为0，其次为青霉素，耐药率为26.7%，对氨苄青霉素和卡那霉素不敏感，耐药率为73.3%、86.7%；对主要病原菌大肠杆菌抑菌作用最强的为阿米卡星、菌必治、先锋必和环丙沙星，耐药率为0，其次为链霉素，耐药率为16.7%，对红霉素、氨苄青霉素、卡那霉素不敏感，耐药率为83.3%、83.3%、50%。

表1 子宫内膜炎病原菌对常用抗菌药物的药敏试验

3 讨论

通过对55份样品分析，从47分样品中共得到52个菌株。其中链球菌感染率最高，占56.4%，葡萄球菌占27.3%，大肠杆菌占16.3%。结果表明，引起锦州地区奶牛子宫内膜炎的主要致病菌为链球菌和葡萄球菌，这与 Williams E J的研究报道一致［4］。

药敏试验结果表明，多数病原菌对菌必治、先锋必和链霉素敏感性较高，而对其他药物敏感性较差或不敏感，为什么会出现这种现象呢？究其原因发现，主要与这些奶牛场平时治疗过程中抗菌药物用药不合理息息相关［5］。

4 结论

1）锦州地区奶牛子宫内膜炎的主要致病菌是链球菌、葡萄球菌、大肠杆菌，并且多数都是单一感染。

2）链球菌和葡萄球菌对菌必治、先锋必和链霉素敏感；大肠杆菌对阿米卡星、菌必治、先锋必和环丙沙星敏感。

［1］林 羲.家畜病理学［M］.第三版.北京：中国农业出版社，2001：184－185.

［2］麻延峰，王宏艳，黄利权，等.金华地区奶牛子宫内膜炎病原菌的分离鉴定及药敏试验［J］.中国预防兽医学报，2007，29（8）：641－644.

［3］王 爽，和狮翼，刘 文，等.黑龙江地区奶牛子宫内膜炎病原菌的分离鉴定与药物敏感性试验［J］.中国兽药杂志，2008，42（5）：33－35.

［4］Williams E J，Fischer D P，Noakes D E，etal.The relationship between uterine pathogen growth density and ovarianfunction in the postpartum dairy COWS［J］.TheriogenoIogy，2007，67（4）：51－51.

［5］陈 星，胡松华，张克春.奶牛子宫内膜炎病原茵的分离鉴定及药敏试验［J］.中国兽医杂，2010，46（1）：43－44.