气相色谱法测定恩替卡韦中三氯甲烷残留量

2013-12-09廖宝源李长达孙蔚华方慧琼江西省赣州市食品药品检验所赣州34000江西赣州市第三人民医院赣州34000

江西中医药 2013年1期

★ 廖宝源李长达孙蔚华方慧琼（.江西省赣州市食品药品检验所赣州34000；.江西赣州市第三人民医院赣州34000）

药物中的残留溶剂是指在原料药或赋型剂的生产中，以及在制剂制备过程中使用的，但在工艺过程中未能完全去除的有机溶剂[1]。由于残留溶剂不仅没有疗效，还可能增加药物的毒副作用，而且影响药物的稳定性，故所有的有机溶剂应尽可能除去。为了保护患者免受药物中残留有机溶剂的伤害，需对药品在生产过程中引入的有机溶剂残留量进行测定[2]。恩替卡韦是一种用于治疗乙肝病毒感染的新一代鸟嘌呤核苷类似物口服药[3]，主要用于治疗成人伴有病毒复制活跃和血清转氨酶持续增高，或肝组织学为活动性病变的慢性乙型肝炎，是目前降病毒最快最强、变异几率最低的核苷类似物[4]。由于合成本品过程中使用三氯甲烷等有机溶剂，故有可能会残留在产品中。资料表明，氯仿具有致癌、致畸、致突变作用，长期接触将对人体产生严重影响[5，6]。本文参考中国药典2005 年版二部有关品种三氯甲烷残留量检测方法，建立了气相色谱法，结果表明本法分离度高、灵敏、准确且简便。

1 仪器与试剂

Agilent 7890A气相色谱仪（配有ECD检测器），恩替卡韦原料（厂方提供，批号20090515、20090520、20090526）。三氯甲烷、二甲基亚砜均为色谱纯。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：DB-624 毛细管柱（30m×0.53mm×3.0μm）；柱温：初始60℃，保持6 分钟，再以20℃∕分钟的升温速率升温至200℃，保持4 分钟；检测器：ECD；检测器温度：300℃；进样口温度：200℃；载气：氮气（流量4.5mL∕min）；进样方式：分流进样；分流比：15：1；进样体积：1.0μL。

2.2 对照品溶液的制备

精密称取三氯甲烷12.4mg，迅速加入已装有适量二甲基亚砜溶剂的100mL 量瓶中，定容至刻度，摇匀，精密量取1mL 至50mL 量瓶中，定容至刻度，摇匀，即得三氯甲烷对照溶液。

2.3 供试品溶液的制备

精密称取本品0.2g，置5mL量瓶中，加二甲基亚砜溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

2.4 空白干扰试验

取三氯甲烷对照品溶液、供试品溶液及有机溶剂二甲基亚砜照上述色谱条件分别进样，结果空白溶剂对恩替卡韦的三氯甲烷残留量测定无干扰。见图1。

图1 气相色谱图

2.5 最低检测量

取对照溶液稀释10-9倍得三氯甲烷的检出限溶液，按上述色谱条件测定，结果最低检出量为2.457 54×10-9μg∕mL，相对供试品最低检出量为6×10-14g∕g。

2.6 精密度试验

取上述三氯甲烷对照品溶液，照上述色谱条件进行气相分析，连续进样5次，RSD为0.99%。

2.7 线性关系

精密量取上述三氯甲烷对照溶液1mL、2mL、5mL、8mL、10mL，分别置10mL 量瓶中，分别加入二甲基亚砜稀释至刻度，摇匀，即得浓度分别为10%、20%、50%、80%、100%的溶液，作为线性回归测定溶液。分别照上述色谱条件进样测定，每个浓度测定3 份，取平均值，以浓度为X轴，以峰面积为Y值，计算线性回归方程：Y= 4030.204 1X+380.918 4，r＝1.000 0。结果表明三氯甲烷在0.2457 54-2.457 54 μg∕mL浓度范围内呈良好线性关系。