直肠癌组织中TP表达及其临床意义

胡从兵，谢建平，邓 黎

（长江大学临床医学院）

（荆州市第一人民医院普外科，湖北荆州 434000）

直肠癌是消化道常见恶性肿瘤，中老年患者发病率最高，其发病率逐渐增加。直肠癌患者术后5年生存率约60%左右。患者就诊时已属中晚期是术后5年生存率低的原因之一。在人体正常组织细胞中广泛分布胸苷磷酸化酶 (TP)［1］，但是在直肠癌组织里面其表达要明显高于癌旁组织［2］。该酶具有诱导血管生成的功能［3］，又叫血小板衍生内皮细胞生长因子 (PD-ECGF)［4］。

实体肿瘤生长离不开血管生成。新生血管给肿瘤细胞提供生长所必须的营养，而且新生的毛细血管基底膜不完整，因此肿瘤细胞更容易进入脉管系统然后发生转移［5］。因此，肿瘤组织中TP的表达可能与肿瘤的恶性行为有关。为了解直肠癌组织中TP阳性率并评估TP与临床病理参数之间的联系及其临床意义，我们选择了免疫组化方法检测直肠癌组织中TP表达情况。

1 对象与方法

1.1 对象

选取2010年1月至2013年7月间直肠癌手术病人124例，其中男性79例，女性45例。年龄20～88岁，平均 (55.7±12.2)岁。全部经组织病理学证实为直肠癌。入组标准:根治术或者姑息性手术切除实体肿瘤;术后病理为腺癌:分为高、中、低分化腺癌3组，其中粘液腺癌归为低分化腺癌组。排除标准:未切除实体肿瘤，仅取组织活检，或造瘘手术;组织类型为腺癌以外其他类型，如神经内分泌癌，淋巴瘤，间质瘤等。

1.2 方法

标本经过石蜡包埋，切片，HE染色后，在40×10倍光学显微镜下观察。然后使用免疫组化方法染色:一抗为鼠抗人TP单克隆抗体 (1∶100)，以及通用型二抗。最后在显微镜下观察、拍照并对阳性染色细胞计数。TP免疫染色评估标准:高倍镜下阳性染色细胞计数小于5%为TP阴性;高倍镜下阳性染色细胞计数达到5%为TP阳性［6］。计数直肠癌中TP在不同分组中，如不同年龄段、不同性别、不同浸润深度、不同分化程度、不同淋巴分期、有无远处转移、以及不同解剖学分期各组中阳性情况。癌组织分级采用Dixon标准［7］。直肠癌TNM分期参考2012年直肠癌NCCN指南。

1.3 统计学分析

采用统计软件SPSS17.0，计量资料用独立样本t检验，计数资料用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。

图1 直肠癌组织中TP阳性表达 (HE，×400)

2 结果

2.1 免疫组化结果

本组直肠癌组织中TP阳性率为50%(62/124)，图1中细胞核染蓝色，胞浆中染为黄色颗粒的是胸苷磷酸化酶(TP)。

2.2 直肠癌组织中TP阳性表达与临床病理特征的关系

直肠癌组织中TP阳性表达与肿瘤浸润深度以及解剖学分期相关 (P＜0.05)，与年龄、性别、分化程度、是否有淋巴结转移或远处转移无统计学关联。见表1。

表1 TP表达与临床病理特征的关系

3 讨论

TP又被称为血小板源性内皮细胞生长因子［1］，可以诱导血管生成，它在人体正常组织细胞中广泛分布:膀胱、脾脏、大脑、消化道，胶质细胞、基质细胞、巨噬细胞、上皮细胞等等［1，8-9］。而在直肠癌等肿瘤组织中TP表达高于正常组织［10-121］，TP可能与肿瘤的生物学行为密切相关。本组结果表明，直肠癌组织中TP阳性率50%;直肠癌中TP表达与肿瘤浸润深度以及解剖学分期存在着关联。

在肿瘤浸润深度组中，TP阳性率:T4(62.7%) ＞T3(55.6%)＞T2(38.7%)＞T1(22.2%)，可以看出，肿瘤浸润越深，TP阳性表达率越高;由于肿瘤晚期而不能手术切除肿瘤的患者无法获得标本，因此本研究中仅有1例远处转移的标本，且TP阴性，无法判断TP与肿瘤远处转移的联系，这样对解剖学分期的分析可能也存在误差。尽管如此，我们如果将Ⅲ、Ⅳ期和Ⅰ、Ⅱ期组合起来比较就会发现，直肠癌患者中TP阳性比例:Ⅲ、Ⅳ期 (61.1%)＞Ⅰ、Ⅱ期 (41.4%)，即分期靠后，TP阳性率更高，似乎提示TP表达阳性预示预后不良。

日本学者Yukihiko等研究报道，结直肠癌患者术后预后、肿瘤分期，以及有无淋巴结转移、静脉侵犯与肿瘤组织中TP表达密切相关［13］。Takebayashi等研究的结论则是:TP表达与肿瘤浸润深度、淋巴结侵犯、淋巴结转移、血管侵犯存在联系［14］。这些研究跟我们结果部分吻合。

总之，直肠癌组织中TP阳性率约50%，其表达与肿瘤浸润深度、分期存在关联，且趋势是癌组织侵犯越深，分期越晚，TP阳性率越高。TP阳性可能提示预后不良。

［1］ Fox SB，Moghaddam A，Westwood M，et al.Platelet-derived endothelial cell growth factor/thymidine phosphorylase expression in normal tissues:An immunohistochemical study ［J］ .JPathol，1955，176:183-190.

［2］Nakayama Y，Inoue Y，Nagashima N，et al.Expression levels of thymidine phosphorylase(TP)and dihydropyrimidine dehydrogenase(DPD)in patients with gastrointestinal cancer［J］ .Anticancer Res，2005，25(6A):3755-3761.

［3］Haraguchi M，Miyadera K，Uemura K，et al.Angiogenic activity of enzymes［J］.Nature，1994，368:198.

［4］Furukawa T，Yoshimura A，Sumizawa T.Angiogenic factor［J］ .Nature，1992，356:668.

［5］Maeda K，Chung YS，Ogawa Y，et al.Thymidine phosphorylase/platelet-derived endothelial cell growth factor expression associated with hepatic metastasis in gastric carcinoma ［J］ .Br J Cancer，1996，73(8):884-888.

［6］Kandil MA，El-Wahed MM，Mohamad B，et al.Predictive value of thymidine phosphorylase in gastric carcinoma［J］.JEgypt Natl Canc Inst，2004，16(3):159-167.

［7］Dixon M，Alimentary T，Underwood JCE.In general and systemic pathology［M］.3thed.Toronto:Churchill Livingstom，2000:361-401.

［8］Yoshimura A，Kuwazuru Y，Furukawa T，et al.Purification and tissue distribution of human thymidine phosphorylase;high expression in lymphocytes，reticulocytes and tumors ［J］ .Biochim Biophys Acta，1990，1034:107-113.

［9］Matsukawa K，Moriyama A，Kawai Y，et al.Tissue distribution of human gliostatin/platelet-derived endothelial cell growth factor(PD-ECGF)and its drug-induced expression ［J］ .Biochim Biophys Acta，1996，1314:71-82.

［10］Takebayashi Y，Yamada K，Miyadera K，et al.The activity and expression of thymidine phosphorylase in human solid tumours［J］ .Eur J Cancer，1996，32A:1227-1232.

［11］Takebayashi Y，Miyadera K，Akiyama S，et al.Expression of thymidine phosphorylase in human gastric carcinoma ［J］ .Jpn J Cancer Res，1996，87:288-295.

［12］Moghaddam A，Zhang HT，Fan TP，et al.Thymidine phosphorylase is angiogenic and promotes tumor growth ［J］ .Proc Natl Acad Sci USA，1995，92:998-1002.

［13］Yukihiko T，Hisahiro H，Toshitaka H，et al.Prognostic value of thymidine phosphorylase/platelet-derived endothelial cell growth factor in advanced colorectal cancer after surgery:evaluation with a new monoclona antibody ［J］ .Surgery，2002，131:541-547.

［14］Takebayashi Y，Akiyama S，Akiba S，et al.Clinicopathologic and prognostic significance of an angiogenic factor，thymidine phosphorylase，in human colorectal carcinoma ［J］ .J Natl Cancer Inst，1996，88(16):1110-1117.