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匙吻鲟苗种繁育技术

2013-12-01成定北李寒松李志安雷海宁武光芳南杰轩洪晓强

家畜生态学报 2013年2期
关键词:亲本苗种水产

刘 超,成定北,李寒松,李志安,雷海宁,武光芳,南杰轩,洪晓强

(1.西北农林科技大学 动物科技学院,陕西 杨凌 712100;2.西北农林科技大学 安康水产试验示范站,陕西 安康 725000;3. 安康市水产工作站, 陕西 安康 725000;4. 安康市鱼种场,陕西 安康 725000)

匙吻鲟(PolyodonspathulaWalbaaum)原产美国密西西比河,属鲟形目,匙吻鲟白鲟科,鲟鱼种,大型淡水经济鱼类[1]。20世纪60年代,美国成功进行了人工繁殖[2]。经长期选育,人工养殖匙吻鲟渐失洄游性和自繁能力,主行人工繁育[3-5]。1990年,我国湖北省首次引入美国授精卵人工孵化培育,建立了繁殖群,其后以湖北(1990)→北京(1993)→福建(1998)→广东(2003)→四川、重庆、辽宁(2004)→安徽(2005)→陕西、湖南(2008)→山东(2009)→台湾、香港、宁夏(2010)的行动路线图得到推广[6],2003年后国内所用苗种,多为国产亲本所繁[7]。

1 匙吻鲟的生物学习性

1.1 形态特征

匙吻鲟属软骨鱼类,具扁平发达长吻。躯干呈流线,尾部扁,鳞片退化,体表光滑。口大眼小,前额高于口部,口不能伸缩。鳃耙密而细长,鳃盖骨大而向后延伸。胸鳍较小,背鳍起点在腹鳍之后,尾鳍叉形不对称,上叶尖长,下叶宽短。匙吻鲟背部灰黑色,常有斑点镶嵌,体侧向腹部渐浅,腹白色[8]。

1.2 生长与寿命

匙吻鲟生长快,出膜仔鱼经25~30 d培育,平均体全长达5 cm。1岁龄全长45~50 cm,体重0.8~1.5 kg;5岁龄鱼全长101.3~135.9 cm,体重3.5~11.4 kg;10岁龄鱼全长129.5~166.4 cm,体重10.3~19.6 kg,最大体重65 kg,寿命30年以上。

1.3 生活习性

匙吻鲟适应性强,常生活于内陆江河湖泊、水库及池塘,多栖息在河流中水流较为缓慢、支干流交汇处等饵料生物丰富区域。对河流水位及流速流量敏感,水温1 ℃~37 ℃水体能生存,一般要求pH6.5~8,水中溶氧≥5 mg/L[9]。

1.4 食性

匙吻鲟为滤食性鱼类,是唯一以浮游动物为食的鲟科鱼类。仔鱼开口喜食小型枝角类,也食蛋黄,吞食摄食,鳃耙发育完全、体长≥13 cm始行滤食,可食配合饲料[10]。

1.5 繁殖习性

匙吻鲟行春繁,每年3月下旬至6月上旬,水温≥16 ℃亲本溯河洄游,寻适繁场所,喜砾石等固着基质上产卵,卵黏性,卵径2.0~2.5 mm,灰黑色;怀卵量14.8~50.7万粒/尾,体重平均3 500 粒/kg,卵巢重占体重15%~25%;雄鱼连年繁殖,雌鱼3~5年产卵1次。水温≥16 ℃、累积积温≥156 ℃(6~7 d)授精卵孵出仔鱼[11](水花)。

2 匙吻鲟人工繁殖技术

2.1 激素催情

匙吻鲟原行体外授精,一般15~20龄、体重≥15 kg自繁。人工培育可提前(雄鱼9~10龄、雌鱼体重≥10 kg),但需催情排卵精,以黄体生成素类似物(LRH-A)催情,绒毛膜促性腺激素HCG+LRH-A联合使用效果更好,纯用LRH-A,2次注射第2针加入VB2激素效应可延长至20 h。人工培育催产前1月,注射催熟剂(鲤鱼垂体浸出液等)能刺激卵子发育[12-13]。西北农林科技大学安康水产试验站采用的催情药物见表1,其中垂体+LRH-A组合效果较好。

表1 匙吻鲟亲本鱼催情药物及用量Table 1 The Aphrodisiac drugs and consumptions in parents fish of Paddlefish

2.2 人工采卵

2.2.1 挤压法 适于个体较小、成熟度高亲本。用手先从雌鲟腹后部向前推压,再由前向后推压,重复这一动作,将体腔后部游离卵粒尽可能挤入喇叭口,经输卵管排出。该法对亲本伤害小、采卵后成活率在90%以上[14],故人工养殖或低龄鱼常用,缺点是不能全部把成熟卵挤出。

2.2.2 手术法 该法包括剖腹产和体内微创口术2种。剖腹产的程序是:催产后雌鲟转到担架上,用塑料管以10~25 L/min速度向亲鲟口送水,供给足量溶解氧,碘酊或70%酒精消毒臀鳍前腹后切7~9 cm小口,用不锈钢或塑料匙将卵取出;也可注适量生理盐水于腹内轻轻晃动,倾游离卵子于体外容器,再用6×26号弧形针和可吸收缝和线缝合切口并消毒处理,30 d后伤口可愈合。体内微创口术是在输卵管后脊部位切1~3 cm小口,使鱼卵绕过输卵管直接从体腔流入生殖孔倾出。该法取卵迅速、操作简单,无需缝合。

2.3 采精

2.3.1 挤压法 将鱼抬出水池,挤压肛门前方腹部两侧,精液流出,用消毒容器盛接备用。

2.3.2 吸管法 将鱼在水中翻转,把肛门露出水面,边挤边用吸管或注射器从生殖孔吸取精液备用。

2.3.3 精液保存 原精液加入保存液稀释摇匀后,密封于试管冷藏备用。保存温度1 ℃~5 ℃,原精/保存液1/5。常用保存液是葡萄糖-柠檬酸钠保存液,配方是:蒸馏水100 mL,葡萄糖2.97 g,柠檬酸纳1 g,碳酸氢钠0.2 g,氯化钾0.03 g,磺胺0.3 g;还可用氯化钠4.68 g,氯化钾7.93 g,氯化钙0.555 g,氯化镁0.406 g[15];也有用碳酸氢钠4.2 g,葡萄糖1.8 g,纯净水1 000 mL,制成溶液[16]。

2.4 授精卵准备及人工授精

采出卵子精子后立即将精子倾入卵子容器中,用鸡毛搅动授精。匙吻鲟为多精入卵、单精受孕。匙吻鲟人工授精常用干法授精、半干法授精、湿法授精三种。无论哪种授精方式,先将所采卵置于内壁光滑容器中,加入适量精液搅拌均匀,随机加人少量清水续搅3~5 min,倒去表层水再加新鲜水即获授精卵。采精授精过程要轻快、准确,否则易造成亲鱼受伤、人工授精失败并引起产后亲鱼死亡。鲟鱼对光线有较强趋避性,在授精、产卵孵化过程中,用遮阴网挡住阳光,避免阳光直射授精卵。

2.4.1 干法授精 将处在发情高潮或预期产卵亲鱼捕起,一人抱住鱼,头向上尾向下并用手按住生殖孔(以免卵流入水中),另一人用手握尾柄并用毛巾将鱼体腹部擦干。随后用手柔和挤压腹部(先后部、后前部),把鱼卵挤于盆中,后将精液挤于鱼卵上,用羽毛或手均匀搅动1 min,再加入少量清水拌合,静置2~3 min,慢慢加入半盆清水,继续搅动,使精卵子充分结合,然后倒去浑浊水,再用清水洗卵3~4次,当看到卵膜吸水膨胀后便可移入孵器中孵化。若用5%生理盐水稀释,可延长精子寿命,提高授精率[17]。

2.4.2 半干法授精 用少量水把精液稀释(精液与水比例1/100),立即将稀释后的精液与卵子混合,最后加水搅动约3~5 min即可。

2.4.3 湿法授精 在脸盆内装少量清水,每人(或数人)各握一尾雌鱼或雄鱼,分别同时将卵子和精液挤入盆内,并用羽毛轻轻搅动,使精卵充分混匀,然后加水搅动,3~5 min即可。

2.4.4 授精卵脱粘 鲟鱼授精卵粘性很强,加水15~20 min后,卵粘性达到最大,在孵化密度不高情况下,脱粘不脱粘卵孵化率差别不大,但在孵化密度较高情况下,脱粘孵化率更高。脱粘方法是:将授精卵静置片刻后,用水将授精卵清洗干净,再将脱粘剂慢慢加入鱼卵中,边到边轻轻搅拌,当全部卵粒呈分散颗粒状,静置不结块,冲洗干净授精卵即可孵化。常用脱粘剂有滑石粉和黄泥两种,实际生产中常用滑石粉+食盐的脱粘剂,食盐遇水后成生理盐水,可以保护授精卵免受伤害。授精第2 d到出膜前1 d,每天用2%食盐水消毒1次,每次约5 min,并及时清除死卵。

滑石粉脱粘配方:滑石粉200 g,食盐50 g,水10 kg,同时搅拌,显乳白色液体即可[18];黄泥脱粘配方:黄泥1 kg+水5 kg,同时搅拌,滤去渣滓即可使用[19]。

2.5 授精卵孵化

2.5.1 鲜卵孵化 漂洗干净的授精卵,按600~800粒/L的密度移入孵化器中,控制水流10 L/min,水温18 ℃~20 ℃,溶氧7~8 mg/L,pH 6.5~7.5,孵化6~8 d。期间避免授精卵聚集,防止水霉发生,统计授精率、孵化率。授精第2 d至出膜前1 d,2次/d 2%盐水消毒,5 min/次,及时清除死卵。

2.5.2 漂卵孵化 是指将匙吻鲟的授精卵移入引种地等异地进行孵化,使水花鱼苗出膜后即适应新环境。漂卵孵化首先确定出苗时间,一般出苗时间定在引入地气温与种源地气温接近(温差≤1 ℃)时出苗。引入授精卵可应用冻胚技术保存,孵化前解冻孵化。解冻后授精卵孵化与常规授精卵(鲜胚)孵化技术相同。如用自制木箱池塘孵化,木箱网振荡频率不低于1次/2 h[20]。

3 匙吻鲟苗种培育

3.1 技术要点

生产中常将刚出膜鱼类苗种叫做乌子头,稍大一点叫做黄瓜籽,当体长达到0.5~5 cm时期叫做水花苗种,5~10 cm叫做夏花,10~200 g叫做鱼种。苗种培育技术要点是“三水一饵”,控制水温、调节水量、培养水质是提高苗种成活率的必须条件,供给干净卫生、高蛋白高能量活饵是提高成活率的关键措施[21],同时注重疾病防治,控制小瓜虫、水霉病等的发生,才能保障苗种培育的成功。

3.2 水花苗种培育

引入水花苗种时,从起运到入塘时限一般不超过10 h,将苗种袋放入池塘平衡水温,袋内水温与池塘水温相差小于1 ℃时方可放苗出袋。引入苗种入塘前应用5%食盐水消毒,可直接在袋内加入少许食盐浸泡运输。

水花苗种培育所需水体溶氧量≥5 mg/L,水温≥18 ℃,日控温差≤2 ℃,按1 cm体长拥有5 000 cm3水计算苗种池培育密度[22]。

苗种开口饵料以高蛋高能微生物为主,多为枝角类,密度≥1粒/cm3,≤2粒/cm3,防止枝角类竞争水体溶解氧致缺氧。植物性饵料应以玉米豆粕日粮为主,定时限量饲喂。我站运用该技术水花培育成活率77.24%。

水花池塘培育期间严控鸟类啄食和小瓜虫侵害,浮性料为好,流水培育效果最好,池塘勤换水,脱管体重≥100~150 g/尾或体长≥15 cm。

3.3 夏花苗种培育

该期生长发育最快,应供足饵料外,增加流动水量、保持基础水量平衡。夏花引种路途运输≤6 h。

夏花期苗种对水温适应范围逐渐变宽,日温差在5 ℃以上也能适应,但对水质氨氮及硫化氢等有害物质敏感,投饵应少给勤添,减少残饵水体留存,谨防水质污染,经常交换更新水体。

夏花期防病除小瓜虫、水霉病外,该期皮肤水疱病易发,多由环境高温引起,水体热能积聚,导致苗种皮肤灼伤,严重的引起皮肤溃烂感染、器官衰竭死亡,并常引起整塘发病。采取遮阳网、通风换气等措施防暑降温,可减少发病。

3.4 鱼种养殖

鱼种到成鱼阶段应采用大水体、流动水、连体网箱养殖效果最好,采用不投饵、夜间人工补光诱捕昆虫以补充水体浮游生物,作为饵料来源,减少饲料开支,可提高养殖经济效益,并可减少水体污染。池塘养殖应采用高能高蛋浮性饲料,选择日气温较低时段定时定量定点投食,水质能见度≥35 cm,高肥水易致猝死[23],疾病防治以小瓜虫、水霉病为主。

4 亲本鱼选留及培育

4.1 亲本鱼选育

赵兴娜等[24]证实,经4代选育,匙吻鲟亲本基因位点得以固定,可稳定遗传。生产中常专业培育亲本,一般场家购置5龄以上雌雄个体,经过4~5年培育用于授精卵生产。后备亲本选择基本要求是个体大、生长速度快、第二性征明显,雄鱼追星明显、雌鱼腹部大可留种。

后备亲本鱼一般应单塘培育,单养或套养密度依生产条件确定。繁殖前一年(9~10龄),投饲饵料以动物性蛋白饲料为主,人工配合饲料粗蛋白质含量≥42%,VA≥2 200 IU/kg,保持膘度适中(肥满度0.38~0.40),第二性征发育明显,体重达到10~20 kg即可繁殖[25]。池塘进排水方便,配备增氧机,水质肥度适当(能见度≥25 cm),人工增殖浮游动物,动态更新池水,适当投喂浮性配合饵料,勤巡塘,适时增氧,定期用生石灰、二氧化氯等药物全池泼洒,带鱼消毒。春季水泵冲水,促进池塘水体循环,刺激性腺发育。

在注重秋后培育,强化春季培育的同时,冬季做好锚头蚤病防治,月换水2~3次,依池中浮游动物量适时施生物肥,保障饵料供给。产前1月冲水2 h/d,促进性腺成熟。

培育过程注意施调节水质:(1)定期交换池塘水,保持水体适当肥度,保证水体的肥、活、嫩、爽;(2)定期使用药物对水体消毒防病,重点防治锚头蚤等常见病;(3)开春后到繁殖前,常加新水,晴天中午原池水泵冲水1~2 h。

可用微生物调水剂调整水质,既调水又促进生物饵料繁殖[26];还可施用磷酸钙、尿素等有机肥培肥水体,促饵料生物生长;依水体中生物丰缺和亲鱼摄食情况投喂浮性饵料。注意调节匙吻鲟后备亲本鱼放养密度(表2),保证亲本足够水体活动空间和饵料供给。

4.2 繁殖亲本选择

匙吻鲟繁殖亲本鱼须品种特征及性征明显,健壮无伤,体况中等(肥满度0.34~0.38)[27],并有先期发情症状。

达到繁殖年龄并已经成熟亲本雌鱼,腹部膨胀,柔软且有弹性,泄殖孔肿胀、充血,生殖孔红润松驰。同水体培育的同龄鱼,雌鱼个体大于雄鱼,全身无珠星,皮肤光滑,体色较雄鱼浅,挖卵观察,当卵已发育到第4期末,可用作人工繁殖亲本。外观行为上,雌鱼频频摆头甩尾,是排卵先期征兆。

雄鱼个体较小,头部具有较多突起,并附粗骨纹,轻压腹部有精液流出。繁殖季节,雄鱼头部多凹凸,上颚鳃盖有细小珠星(追星),腹部扁平,体态瘦长,泄殖孔可挤出精液。镜检精子活力强、密度大的作繁殖亲本雄鱼。外观行为上,性欲旺盛,不时游出水面,追逐雌鱼[28]。

表2 匙吻鲟后备种鱼培育体长与养殖密度Table 2 Paddlefish muscle quality comparison of pond and cage rearing methods 尾/hm2

注:西北农林科技大学安康水产试验示范站养殖密度。

Note:Stocking density in Ankang Fisheries Experimental and Demonstration Station of Northwest A&F University.

表3 池塘养殖与网箱养殖匙吻鲟的肌肉品质比较Table 3 Comparison of pond and cage rearing methods paddlefish muscle quality

注:∑MUFA:不饱和脂肪酸总量;∑SFA:饱和脂肪酸总量;∑PUFA:多不饱和脂肪酸总量;∑n-3PUFAs/∑n-6PUFA:n-3多不饱和脂肪酸/n-6不饱和脂肪酸;EPA+DHA:22碳6烯酸+20碳5烯酸。

Notes: ∑MUFA is total unsaturated fatty acid;∑SFA is total saturated fatty acid;∑PUFA is total polyunsaturated fatty acid;∑n-3PUFAs/∑n-6PUFA is n-3 polyunsaturated fatty acid/n-6 polyunsaturated fatty acid;EPA+DHA is 22 carbon 6 olefine acid+20 carbon 5 olefine acid.

5 匙吻鲟养殖前景展望

5.1 多用途

匙吻鲟集观赏肉食药用一体,幼鱼因长吻、形奇特,摄食腹上翻具观赏价值;成鱼肉多刺少,质细味鲜,属高蛋低脂类,卵加工鱼籽酱誉为“黑色金块”;软骨中含抗癌因子(硫酸软骨素)。鲟肉另具延年益寿、滋阴壮阳、益脑明目、清热解毒和治疗腰痛、胃痛、脱发等防治疾病兼保健功能[29]。

5.2 健康食品

我站研究表明,池塘养殖和网箱养殖匙吻鲟,肉质EAA构成符合FAO/WHO标准,且赖氨酸含量高。在养殖模中,FAA(∑n-3PUFAs)中n-3多与n-6多比值、22碳6烯酸与20碳5烯酸之和(EPA+DHA)网养高于池养(P<0.05),网养比池养(表3)更符合人体健康要求[30]。

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