青海省部分地区猪饲料中霉菌毒素污染情况调查分析

谢云发, 汪生贵,韩廷义

(1.青海省西宁市湟中县农牧和扶贫开发局田家寨畜牧兽医工作站, 青海 湟中 811600;2. 青海省湟中县总寨镇兽医站,青海 湟中 811600)

饲料中霉菌毒素污染是指饲料在生产、加工、运输、贮存等过程中，饲料发生霉变而产生霉菌毒素等具有危害性的成分，其可导致畜禽的生产性能下降、免疫抑制、引起动物致病，畜禽体内残留的霉菌毒素通过食物链对人类健康产生潜在危害[1]。饲料中霉菌毒素的污染严重威胁着饲料、畜禽、人类健康的安全，给饲料生产企业、畜禽养殖业、食品安全均带来巨大的危害[2-3]。现已知的霉菌毒素约有200种，饲料中常污染的、对畜禽具毒性的霉菌毒素约有20余种，其中以赭曲霉毒素A(Ochratoxin A，OTA)、黄曲霉毒素B1(AflatoxinB1，AFB1)、呕吐毒素(vomitoxin)又称脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol，DON)、玉米赤霉烯酮(Zearalenone，ZON)等较为严重[4]。饲料中赭曲霉毒素含量达200 μg/kg畜禽就会出现肾脏形态学损伤；黄曲霉毒素含量达200 μg/kg畜禽就会出现生长受阻、免疫抑制，达400 μg/kg以上就会出现肝脏形态学损伤[5]。由于畜禽摄取饲料的连续性，极其微量的霉菌毒素通过在体内沉淀蓄积，也可达到致病量[6]。为准确评估青海省猪饲料中的霉菌毒素污染现状，本研究对2012年采集的205份猪饲料样品中OTA、AFB1、DON、ZON含量进行了检测与分析，以期为青海省猪饲料的评价、调查和安全应用奠定基础。

1 材料与方法

1.1 材 料

1.1.1 饲料样品 2012年3月至10月，采集青海省部分地区21个养猪场不同时期、饲喂不同生产阶段猪群的饲料样品共计205份，其中含仔猪商品化饲料35份，自制饲料2份；保育猪商品化饲料52份，自制饲料24份；育肥猪商品化饲料54份，自制饲料21份；后备母猪商品化饲料12份，自制饲料2份；生产公母猪商品化饲料3份，自制饲料0份；共计商品化饲料156份，自制饲料49份，每种饲料均选取500 g左右，运至青海省动物疫病预防控制中心实验室后随即进行检测。

1.1.2 试 剂 赭曲霉毒素A(OTA)、黄曲霉毒素B1(AFB1)、呕吐毒素(DON)、玉米赤霉烯酮(ZON)ELISA检测试剂盒均为德国拜发 R-Biopharm公司产品；氯化钠、甲醇等均为国产分析纯试剂。

1.2 方 法

1.2.1 毒素的提取与检测 分别参照赭曲霉毒素A(OTA)、黄曲霉毒素B1(AFB1)、呕吐毒素(DON)、玉米赤霉烯酮(ZON)ELISA检测试剂盒使用说明书的操作步骤与操作方法进行赭OTA、AFB1、DON、ZON的提取与ELISA检测。

1.2.2 结果判定 参照美国FDA对饲料霉菌毒素限量标准、我国饲料中霉菌毒素限量规定、百奥明饲料添加剂有限公司的内控标准[7-9]，本研究规定各种毒素的阳性限值：OTA为2 μg/kg、AFB1为1 μg/kg、DON为50 μg/kg、ZON为32 μg/kg。检测样品的检测数值等于或超过以上设定的限值，即判为阳性样品。

2 结果与分析

2.1 样品的检测结果

应用ELISA检测试剂盒对收集于青海省部分县市的156份商品化饲料、49份自制饲料进行检测，结果见表1、表2所示，在156份商品化饲料中，OTA阳性11份，阳性率为7.05%，AFB1阳性25份，阳性率为16.03%，DON阳性130份，阳性率为83.33%，ZON阳性109份，阳性率为69.87%，而完全没有检测到4种霉菌毒素污染的样品仅14份，占总样品数的8.97%；在49份自制饲料中，OTA阳性3份，阳性率为6.12%，AFB1阳性14份，阳性率为28.57%，DON阳性42份，阳性率为85.71%，ZON阳性36份，阳性率为73.47%，自制饲料中无完全没有检测到4种霉菌毒素的样品。总计的205份饲料样品共进行了820项检测，其中有370项呈阳性，总阳性率为45.12 %。OTA阳性14份，阳性率为6.83%，AFB1阳性39份，阳性率为19.02%，DON阳性172份，阳性率为83.90%，ZON阳性145份，阳性率为70.73%，而完全没有检测到4种霉菌毒素的样品仅14份，占总样品数的8.97%。该结果表明青海省部分地区饲料中存在霉菌毒素的污染，且以DON和ZON的污染最为突出。同时，从检测结果明显显示出，霉菌毒素含量的高值都出现在保育猪和育肥猪饲料中，当然这一结果与这2种猪饲料的检测样品较多有一定关系，但经对猪场的回访与调查发现，AFB1、DON和ZON含量较高的几个猪场，猪群已明显表现出厌食、生长缓慢等不适现象，与本次检测结果存在一定的相关性。

表1 商品化饲料检测结果Table 1 Results of commercial feed detection

表2 自制饲料检测结果Table 2 Results of self-made feed detection

2.2 污染情况的统计结果

对156份商品化饲料、49份自制饲料的检测结果进行污染情况的统计与分析，结果如表3和表4所示，在156份商品化饲料中，只检测到1种霉菌毒素的样品18份，占总样品数的11.54 %，检测到2种和2种以上霉菌毒素的样品共计124份，占总样品数的79.49%，其中同时检测到4种霉菌毒素的样品13份，占总样品数的8.33%。在49份自制饲料中，只检测到1种霉菌毒素的样品4份，占总样品数的8.16%，检测到2种和2种以上霉菌毒素的样品共计45份，占总样品数的91.84%，其中同时检测到4种霉菌毒素的样品5份，占总样品数的10.02%。总计的205份饲料样品中单一霉菌毒素污染样品共计22份，总单污率为10.73%，2种和2种以上霉菌毒素混合污染样品共计169份，总混污率为82.44%，其中同时检测到4种霉菌毒素的样品18份，占总样品数的8.78%。该结果表明青海省部分地区饲料中存在霉菌毒素的单独污染和混合污染，且总混污率远远大于总单污率，混合污染程度较深，且存在4种霉菌毒素的同时污染，混合污染情况非常严重。

表3 商品化饲料污染种类的统计结果Table 3 Statistical results of pollution variety for commercial feed

表4 自制饲料污染种类的统计结果Table 4 Statistical results of pollution variety for self-made feed

2.3 商品化饲料和自制饲料的比较分析

统计分析商品化饲料和自制饲料中OTA、AFB1、DON、ZON的污染情况，在OTA、AFB1、DON、ZON污染的阳性率方面，结果如图1所示，商品化饲料中OTA的阳性率高于自制饲料，而AFB1、DON、ZON的阳性率均显著低于自制饲料，表明在OTA方面商品化饲料的污染情况比自制饲料严重，而在AFB1、DON、ZON方面自制饲料的污染情况比商品化饲料严重；在饲料的污染种类方面，结果如图2所示，商品化饲料中1种霉菌毒素的污染率高于自制饲料，而2种和2种以上霉菌毒素、4种霉菌毒素的污染率均低于自制饲料，表明在污染的种类方面，自制饲料的混合污染现象要比商品化饲料严重。同时商品化饲料存在8.97 %的无OTA、AFB1、DON、ZON污染饲料，而自制饲料中不存在无OTA、AFB1、DON、ZON污染饲料。

图1 商品化饲料、自制饲料中各种霉菌毒素的阳性检出率Fig.1 The positive rate of various mycotoxins in commercialfeed and self-made feed

图2 商品化饲料、自制饲料中各种霉菌毒素的单污率和混污率Fig.2 Single pollution rate and mixing pollution rate of variousmycotoxins in commercial feed and self-made feed

3 讨 论

本研究通过对采集于青海省部分养殖场的156份商品化饲料和49份自制饲料进行OTA、AFB1、DON、ZON含量的检测与分析，发现青海省部分地区猪饲料严重存在OTA、AFB1、DON、ZON的污染情况，且以ZON和DON较为严重，这与张丞等[7-8]对2008年、2009年中国饲料和原料中霉菌毒素污染情况的调查、王金勇等[9]对2012年中国饲料和原料霉菌毒素检测的结果存在高度的一致性。同时本研究发现，目前青海省部分地区猪饲料中霉菌毒素的混合污染(同时含2种或2种以上霉菌毒素)现象严重，且4种霉菌毒素同时污染的样品达8.78%，通过对猪场的回访与调查发现含量高的猪群曾经表现出生长缓慢存在一定的关联性，究其原因可能是当多种霉菌毒素同时存在时，他们之间的协同效应会对动物产生更大的影响与危害[10]。本研究还通过对商品化饲料与自制饲料的比较分析发现，商品化饲料在AFB1、DON、ZON的阳性检出率方面，以及混合污染方面都明显好于自制饲料，且商品化饲料中存在8.97 %的无OTA、AFB1、DON、ZON污染饲料，而自制饲料中不存在无OTA、AFB1、DON、ZON污染的饲料，究其原因可能是自制饲料在原料的选择、饲料生产、加工过程中，因工作环境与条件有限，饲料加工厂即无控湿装置，又无防霉污染设施，致使成品饲料霉变，产生大量霉菌毒素。综合本次调查结果，笔者认为目前青海省部分地区猪饲料中存在霉菌毒素污染现象，为保障该地区的饲料安全，笔者建议坚强对饲料生产企业及饲料加工厂的科学管理，加强对饲料原料的控制，同时加强对饲料运输、保存条件的管理，定期对饲喂的饲料进行监测，及时淘汰霉变饲料。

参考文献:

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[7] 张 丞, 刘颖莉. 2008年中国饲料和原料中霉菌毒素污染情况调查总结报告[J].饲料广角,2009(5):18-20.

[8] 张 丞, 刘颖莉. 2009年中国饲料和原料中霉菌毒素污染情况调查总结报告[J].饲料广角,2010(4):24-26.

[9] 王金勇,刘颖莉,关 舒. 2012年中国饲料和原料霉菌毒素检测报告[J].中国畜牧杂志, 2013,49(4):29-34.

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