五味佛手丸中五味子乙素的HPLC法测定

2013-11-22孙小静牛宇东冯一凡陕西省渭南市第一医院渭南714000

陕西中医 2013年5期

孙小静牛宇东冯一凡李芳陕西省渭南市第一医院（渭南 714000）

五味佛手丸主要是由五味子、佛手等五味药组成，功能补气健脾，养肝益肾。五味子为方中的君药，我们采用HPLC法测定对其进行质量控制，结果表明，此法准确，分离度效果好，精密度和重现性好，回收率高，阴性对照显示制剂中其他成分对五味子乙素的测定无干扰，可作为该制剂的含量测定指标。

1 仪器与试药仪器：高效液相色谱仪（Agilent1200型）；紫外检测器；BP221S赛多利斯电子天平。试药：甲醇为色谱纯，水为重蒸馏水，其他试剂均为分析纯，样品自制，五味子乙素对照品购自中国药品生物制品检定所，批号为0765－20003，供含量测定用。

2 实验方法和结果 2.1 色谱条件色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱（200mm×4.6mm，5μm），流动相：甲醇∶水＝78∶22，检测波长：250nm，柱温：室温，流量：0.8mL／min。在此条件下，五味子乙素与其他组分分离效果良好，达到基线分离，阴性无干扰。

2.2 对照品溶液的制备精密称取五味子乙素对照品适量，加甲醇使溶解制成每1mL含五味子乙素30μg的溶液。

2.3 供试品溶液的制备取本品5袋，除去包衣，研细，混匀，取约5.0g，精密称定，加入氯仿50mL，摇散，超声处理30分钟，滤过，用少量氯仿分次洗涤漏斗，洗液并入滤液中，蒸干，残渣加甲醇溶解转移至5mL量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，用0.45μm的微孔滤膜滤过，即得。

2.4 线性关系考察精密称取五味子乙素对照品10.3mg，置50mL量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至刻度，摇匀，分别精密量取上述对照品溶液（200μg／mL）0.5mL、1.0mL、1.5mL、2.0mL、2.5mL、3.0mL，置10mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，备用。在上述色谱条件下，分别吸取上述溶液各10μL进样，测定峰面积，结果见表1。以峰面积积分值为纵坐标Y，五味子乙素浓度为横坐标X，绘制标准曲线，表明五味子乙素在10.0μgmL～60.0μg／mL范围内线性关系良好。回归方程为 Y ＝471.19＋284.65X r＝0.9997。

2.5 精密度试验分别精密吸取五味子乙素对照品溶液10μL，重复进样6次，测定峰面积积分值，以峰面积计算RSD为1.01%，表明本法精密度良好。

2.6 稳定性试验取供试品溶液，依上述方法每隔2h测定一次，测定峰面积积分值，结果，五味子乙素峰面积的RSD为1.56%，表明供试品溶液在8小时内基本稳定。

2.7 重复性试验取同一批样品，平行精密称取6份，按供试品溶液的制备方法处理，进样测定，计算含量，结果五味子乙素的平均含量为0.0268mg／g，RSD为0.99%，表明本法重复性良好。

2.8 回收率试验采用加样回收法。分别精密称取已知含量的供试品（010801，其五味子乙素含量为0.0268mg／g）6份，加入五味子乙素对照品适量，同重复性试验方法制成供试品溶液，测定五味子乙素含量，计算回收率，结果见表1。

2.9 样品测定同重现性方法对3批产品中的五味子乙素进行测定，结果见表2。