川芎、白芷、益母草在化妆品中的应用

严子军，韦寿莲，汪洪武，黄美容

（肇庆学院 化学化工学院，广东 肇庆 526061）

0 前言

随着人民生活水平的不断提高及科学技术日新月异的发展，人们对化妆品的需求开始从过去的单一护理型向现代功能型转化.近年来，人们的生活、工作节奏不断加快，由于污染而引起的环境和臭氧层的破坏，使得人体黑色素形成酶的代谢紊乱加重，从而导致患有各种黑色斑的人群日益增多.据统计，约有70%的被调查者认为美容的最大障碍之一是面部雀斑、黄褐斑、老年斑的形成[1-3].研制美白祛斑型化妆品成为近年来化妆品研究领域的热门课题.由于人们对化妆品功效的要求越来越高，对返朴归真的天然化妆品日渐向往，以及人们环保意识的提高，人们开始期待无毒、无污染化妆品的出现.研制以中草药为原料的功能性化妆品是化妆品业未来的必然发展趋势，此类新产品有着巨大的经济发展空间.据此,笔者选择了具有抑制酪氨酸酶活性的3种中草药（川芎、白芷、益母草）[3]，以其为原料制成美白祛斑霜，用于涂擦患部以达到祛斑、美白和美容之功效.目前在化妆品中添加的皮肤美白剂，不但要具有美白效果，而且要无副作用，故而一般取自天然植物提取物.迄今为止，已有许多在化妆品中添加有特殊疗效中草药的研究成果，但尚未见将川芎、白芷、益母草三者应用于化妆品的研究报道.

1 实验部分

1.1 实验材料和实验仪器

实验所用材料如下：川芎、白芷、益母草(购于肇庆)；无水乙醇、甘油(A.R,天津市广成化学试剂有限公司)；pH值=6.86的磷酸钠缓冲溶液(上海雷磁·创益仪器仪表有限公司)；L-酪氨酸(上海实验试剂有限公司)；酪氨酸酶(自制)；硬脂酸、三乙醇胺(A.R,天津市博迪化工有限公司)；棕榈酸异丙酯(工业级,肇庆华达化工厂)；羊毛酯(C.P,广州化学试剂分公司分装)；橄榄油(C.P,上海卫辉化学试剂厂)；土温-80(C.P,天津市元立化工有限公司).

实验所用仪器如下：干燥箱(202-2型，上海市实验仪器总厂)；可控硅恒温水浴锅(上海锦屏仪器仪表有限公司)；SHZ-CB型循环水式多用真空泵(河南巩义市英峪予华仪器厂)；22PC可见分光光度计；CJJ78-1磁力搅拌器(江苏金坛市中大仪器厂)；AE240电子分析天平；800型离心沉淀器(广东省佛山市医疗机械厂)；沙松雪尔冰柜(荆沙市雪尔冷机有限公司).

1.2 实验方法

实验采用化学评价法(又称酶法)，即将酪氨酸酶加入酪氨酸中，在此体系中分别加入和不加入川芎、白芷、益母草提取液；然后利用可见分光光度计在390 nm波长下分别测定其吸光度，计算出中草药提取液对酪氨酸酶活性的抑制率.抑制率越高则黑色素就越难形成，美白祛斑效果也就越好[4-5].

1.2.1 川芎、白芷、益母草有效成分的提取

川芎、白芷、益母草经干燥粉碎后，分别称取25 g置于1 000mL三颈烧瓶中，加体积分数为50%的乙醇250mL，在室温下放置浸泡24 h后，在60～65℃恒温回流提取3 h，冷却后减压抽滤；滤渣加适量乙醇继续回流3 h，过滤后合并滤液，在恒温减压下蒸发浓缩，得膏状提取物.

1.2.2 酪氨酸酶的制备

在预冷的研钵中放入12.5 g冰冻的碎土豆，加入冰冷的25mL磷酸钠缓冲溶液(pH值=6.86)，研磨挤压约1min，用4层纱布过滤，将滤液立即离心分离(4 000 r/min,5min).倾出上层清液保存于冰浴或冰箱中(4℃以下保存，由于酪氨酸酶的稳定性不好，因此必须在临用前配制).

1.2.3 酪氨酸酶抑制率的测定

在4支试管中，按表1所列项目准确吸取第1～4组反应液，混匀.

表1 待测液的组成

将上述混合物放在37℃的水浴中恒温静置10min，再分别加入0.5mL的酪氨酸酶溶液，混匀反应约1min后，迅速转移至3mL比色皿中，测吸光度A，每组平行测定2次，按公式(1)计算其对酪氨酸酶活性的抑制率:

川芎、白芷、益母草及其三者的混合提取物的质量分数分别为0.1%，0.2%，0.5%，0.8%，1.0%和1.5%.

1.3 川芎、白芷、益母草美白祛斑霜的配制

1.3.1 参考配方

油相:硬脂酸(4%～5%),棕榈酸异丙酯(5%～6%),羊毛脂(1%～1.5%),橄榄油(0.5%～1%)；水相：甘油(6%～7%),三乙醇胺(0.2%～0.3%),吐温-80(2%～3%)，川芎、白芷、益母草浸膏(1.0%～2.0%),水(余量),香精(适量),防腐剂(适量).

1.3.2 配制方法

按上述配方将油相和水相分别置于烧杯中，于磁力加热搅拌器搅拌下加热至85℃，在呈现均相后控制搅拌速率，同时缓慢地将油相加入水相中[6]，温度保持在85℃反应20min.停止加热后继续搅拌，在温度缓慢降至50℃时加入适量香精和防腐剂，继续降温使温度达到室温，即得目标产物.

2 结果与讨论

2.1 川芎、白芷、益母草提取物的质量分数与酪氨酸酶活性抑制率的关系

按照川芎、白芷、益母草及其三者混合提取物的不同质量分数分别配制测试液，混合提取物中川芎、白芷、益母草的比例为2：2：1.从表2可知，川芎与白芷都具有较高的酪氨酸酶活性抑制率，而益母草则相对较低；川芎、白芷和益母草三者混合也具有较高的抑制率，这表明三者无论是单一还是混合都具有良好的美白祛斑效果.3种添加物对酪氨酸酶抑制率的影响情况如下：川芎、白芷、益母草三者混合＞川芎＞白芷＞益母草，且抑制率随着川芎、白芷和益母草提取物质量分数的增大而增高.川芎、白芷、益母草的混合提取物对酪氨酸酶的抑制率比三者中任何单体都高，这可能是由于川芎、白芷、益母草三者协同具有增效作用，因此，配制美白祛斑霜最终确定选用川芎、白芷、益母草三者的混合提取物.从其对酪氨酸酶的抑制率来看，加入3种物质的质量分数越大，抑制率就越高，美白祛斑的效果也越好；但药物添加过多会导致霜体颜色过深，这会影响其“卖相”.经过综合考虑，我们认为添加物的质量分数定为1.3%比较合适，此时川芎、白芷、益母草三者提取物对络氨酸酶的抑制率达到80.53%，霜体的颜色为微淡褐色.

表2 川芎、白芷、益母草提取物质量分数与酪氨酸酶活性抑制率的关系

2.2 川芎、白芷、益母草美白祛斑霜的性能评价

2.2.1 川芎、白芷、益母草美白祛斑霜的质量评价

依照QB/T1857—1993标准[7]对川芎、白芷、益母草美白祛斑霜的质量进行检测，结果见表3.本实验研制的川芎、白芷、益母草美白祛斑霜，在感官及理化指标方面均符合国家有关标准要求.

表3 川芎、白芷、益母草美白祛斑霜的感官指标及理化检测结果

2.2.2 产品功能检验

随机抽取20位女性试用者，分别进行1个月的美白祛斑霜成品试用.试用期间观察效果，并收集试用者的意见及对产品的看法，结果见表4.

表4 产品功能检验结果

3 结论

川芎、白芷、益母草及三者的混合提取物对酪氨酸酶的抑制作用较强，抑制率随着提取物质量分数的增大而增高，其中川芎、白芷、益母草三者混合提取物对酪氨酸酶的抑制率最高.用川芎、白芷、益母草三者混合提取物作为天然添加剂配制的美白祛斑霜具有润肤、美白祛斑的作用，符合国标的质量要求.

[1]张秀芳,贺文英,常彦景,等.几种中草药美白护肤化妆品的研制[J].内蒙古农牧学院学报,1997,18(4):58-59.

[2]张宝元,张玉珍,徐艳.天然中草药美白祛斑化妆品[J].日用化学品科学,2004,27(2):31-33.

[3]王福兴,陈前进.具抑制酪氨酸酶活性祛斑增白药物[J].中国医院药学杂志,1999,18(8):479.

[4]王培义.化妆品——原理·配方·生产工艺[M].北京:化学工业出版社,2004:14.

[5]张秀芳,贺文英,常彦景，等.几种中草药美白护肤化妆品的研制[J].内蒙古农牧学院学报,1997,18(4):58-59.

[6]赵会科,姜艳.甘草美白日霜的研制[J].精细石油化工进展,2007,8(6):31-33.

[7]王慎敏,唐冬雁.日用化学品化学——日用化学品化学配方设计及生产工艺[M].哈尔滨:哈尔滨工业大学出版社,2001:346-347.