表面活性剂对丹参酮固体分散体的体外溶出的影响

2013-11-13周焘桂菲菲潘俊杰广州医药研究总院广州5040南昌大学南昌00江西中医学院南昌0004

江西中医药 2013年5期

★ 周焘桂菲菲潘俊杰(.广州医药研究总院广州5040;.南昌大学南昌00;.江西中医学院南昌0004)

丹参脂溶性成分系从唇形科鼠尾草属植物丹参(Salvia miltiorrhiza Bunge)的根中提取纯化得到的二萜醌类化合物，多为共轭醌、酮类化合物，是多种红色物质的混合物。药代动力学研究表明丹参酮类口服吸收差，生物利用度低，其吸收机制是载体介导转运兼有被动扩散，跨膜转运通透性良好，溶出是吸收的限速步骤。表面活性剂不但可以增加药物的溶出，而且也可以促进一些药物的吸收。近年来，固体分散体的研究出现了单一载体或混合载体加表面活性剂的趋势，同时表面活性剂可以促进药物在胃肠道的吸收。相同药物以不同载体或载体比例不同时可以得到不同的粒径和晶型，从而会有不同的溶出速率［1］。因此本文针对表面活性剂对丹参酮固体分散体的体外溶出的影响进行研究。

1 实验材料与仪器

1.1仪器

恒温磁力搅拌器(78HW－1，亿通电子有限公司);超声机(KQ－250VDB型双频数显，昆山超声仪器公司);旋转蒸发仪(OSB－2000，EYELA);数显恒温水浴锅(HH－2，国华电器有限公司);HL－2S恒流泵(上海青浦沪西仪器厂);UV－2102PC紫外可见分光光度计(美国UNICOUV);Angilent1200高效液相色谱仪。

1.2 材料

丹参酮IIA提取物(陕西昂盛生物医药科技有限公司，批号:20070618);聚乙烯吡咯烷酮 K30(PVP－K30)(上海宏远化工有限公司，批号:G43377PTO);聚山梨酯80(Tween－80，温州清明化工有限公司);戊巴比妥钠(中国医药集团的上海化学试剂公司);流动相为色谱甲醇(汉邦);其他的试剂均为分析纯。丹参酮IIA对照品(由中国生物制品检定所提供，批号110766－200417)。

2 方法与结果

2.1 丹参酮固体分散体的研究

2.1.1 制备方法

(1)丹参酮－PVP固体分散体的制备。采用溶剂法按质量比 1∶2、1∶4、1∶6、1∶8精密称量丹参酮提取物和PVP，用适量的乙醇搅拌溶解得澄清溶液，置于旋转蒸发仪上回收乙醇，放置50℃水浴上蒸干，放置真空干燥箱中50℃干燥，24小时后取出粉碎，过5号筛，备用。

(2)丹参酮－PVP物理混合物的制备。按质量比1∶4的比例精密称量丹参酮和PVP(均过5号筛)，按等量递增原则进行混匀，保存备用。

(3)加表面活性剂的丹参酮/PVP固体分散体的制备。采用溶剂法按质量比 1∶6∶0.5、1∶6∶1、1∶6∶1.5、1∶6∶2精密称量丹参酮提取物、PVP、SDS 和吐温－80，用适量的乙醇搅拌溶解得澄清溶液，置于旋转蒸发仪上回收乙醇，放置50℃水浴上蒸干，放置真空干燥箱中50℃干燥，24小时后取出粉碎，过5号筛，即得。

2.1.2 体外溶出的含量测定方法

(1)检测波长的测定。吸取适量丹参酮IIA对照品溶液用0.5%吐温－80溶液稀释一倍，在200－500nm处作全波长扫描，结果其在270nm处有最大吸收。并取相应比例的PVP K30和十二烷基硫酸钠用甲醇－0.5%吐温－80混合溶液溶解，于200－500nm全波长扫描，于270nm处无明显吸收，对丹参酮的测定不产生干扰。

(2)标准曲线的制备。精密称量丹参酮IIA对照品适量，分别配成浓度为 2.12、4.25、6.36、8.48、10.5μg·mL－1丹参酮 IIA 对照品溶液。以甲醇为空白溶液，分别于270nm处测定丹参酮IIA的吸光度，以吸光度(A)对浓度(μg/mL)进行线性回归，回归方程为:A=0.085 8C －0.029 9(r=0.999 5)，由此可见，丹参酮IIA浓度在2.12－10.5μg/mL范围内线性关系良好。

(3)回收率测定。精密吸取丹参酮IIA对照品溶液用0.5%吐温80溶液稀释一倍;精密称量适量PVP K30粉末用甲醇溶解，再用0.5%吐温80溶液稀释一倍，按不同比例配制丹参酮IIA和PVP K30的高、中、低三种浓度的混合溶液(摇匀，模拟溶出操作)平行三次，分别于270nm处测定丹参酮的吸光度，计算丹参酮IIA在不同浓度比的PVP K30溶液中的回收率均在98%以上，RSD为0.90%，说明该含测方法精密度很好。

2.1.3 溶出度的测定精密称量丹参酮提取物及其不同比例的固体分散体(相当于丹参酮34mg)，按《中国药典》2005版附录XC中有关浆法规定进行，转速100 r/分，水浴温度37±0.5℃，溶出介质:0.5%吐温80溶液900mL，自药物接触溶出介质时，分别于 2，5，8，10，15，20，30，40，60 分钟取样 2mL，过微孔滤膜，同时补充同温度的等量的介质，于270nm处测定丹参酮IIA的含量并计算累积溶出百分率。

(1)同溶出介质对丹参酮固体分散体溶出的影响。丹参酮－PVP(1∶6)固体分散体在人工胃液和脱气蒸馏水中的溶出曲线都呈先上升后下降趋势，而在0.5%吐温80溶液中的溶出曲线不存在下降趋势。究其原因可能是因为丹参酮固体分散体在人工胃液和蒸馏水中溶出是以粒子状态扩散，释放的粒子处于高度分散状态，具有高自由能，容易相互聚集成大颗粒而沉淀下来［2］;而0.5%吐温80溶液属于表面活性剂降低了丹参酮溶出粒子的能量，增大了丹参酮的溶解度，从而抑制溶出粒子的聚集。结果如图1。

(2)丹参酮/PVP K30比例不同对释放度的影响。不同比例的丹参酮－PVP固体分散体在0.5%吐温80溶液中的溶出曲线见图2。

结果表明:丹参酮－PVP固体分散体比丹参酮和PVP的物理混合物的溶出有显著性提高，并且随着载体PVP在固体分散体中的比例的增大，溶出度也增大，丹参酮/PVP的比例在1∶6以上的溶出度已经达到96%，综合溶出度和载药量因素选择丹参酮/PVP比例为1∶6制备丹参酮－PVP固体分散体。

图1 丹参酮固体分散体中丹参酮IIA在不同溶出介质中的溶出曲线

图2 不同比例丹参酮固体分散体中丹参酮IIA的溶出曲线

(3)表面活性剂对丹参酮固体分散体溶出度的影响。由图3可知，加表面活性剂的丹参酮固体分散体在脱气蒸馏水中溶出没有聚集，因为吐温80和SDS均能增加丹参酮的溶解度，降低了丹参酮溶出粒子的能量，改善丹参酮固体分散体的溶出聚集问题。由图4可知，吐温80对丹参酮的增溶作用比SDS的效果较好，可能是因为吐温80在37℃时的临界胶束浓度比SDS的要小;不加表面活性剂的丹参酮固体分散体的溶出比加表面活性剂的固体分散体的溶出要好，可能是因为丹参酮在丹参酮－PVP、丹参酮－PVP－吐温和丹参酮－PVP－SDS的固体分散体中的分散状态的不同导致溶出度不同。