江苏省淮安市淮安区猪衣原体病的血清学调查
2013-10-14蒋法成葛东红范兆才
蒋法成 葛东红 范兆才 贾 洪
(1江苏省淮安市动物疫病预防控制中心,江苏淮安 223001;2江苏省淮安市淮安区动物卫生监督所,江苏淮安 223200)
猪衣原体病是由鹦鹉热衣原体感染猪群引起不同症候群的一种接触性人畜共患传染病。此病症状较复杂,一般多呈隐性感染经过。病原体可以感染190多种鸟类和几十种哺乳动物,导致鸟疫、哺乳动物的衣原体性流产综合征,还可引起肺炎、肠炎、脑脊髓炎、关节炎、浆膜炎、角膜结膜炎及公猪的附睾炎、尿道炎和精囊炎,母猪的阴道炎、子宫内膜炎等[1]。为准确掌握该病在本地的流行动态,为猪衣原体病的防控提供基础数据,制定科学有效的防控方案,笔者于2012年9月对江苏省淮安市淮安区猪衣原体病进行了血清学调查,现将调查结果报告如下。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 诊断试剂
猪衣原体抗体检测试剂盒,深圳市康百得生物科技有限公司生产(批号:120609)。
1.1.2 待检血清
猪血清900份,采自江苏省淮安市淮安区城东、板闸、席桥、钦工、宋集、顺河、季桥、苏嘴、博里、朱桥、平桥、马甸、上河、车桥、南闸等15个乡(镇),每乡(镇) 选择1个育肥猪规模养殖场和5个育肥猪散养户。前腔静脉采血后自然凝固,分离血清,各血清样品清亮,无溶血,置冰箱4℃保存备用。所有被检测猪场和散养户均未接种猪衣原体疫苗。
1.1.3 试验仪器
酶标检测仪,洗涤器,50μL、100μL精确微量移液器,一次性移液器吸头,稀释样品的U型96孔稀释板,恒温箱等。
1.2 监测方法
1.2.1 配制洗涤液
将浓缩的洗涤液恢复至室温(25℃左右),用蒸馏水将浓缩洗涤液按1∶10稀释。
1.2.2 样品稀释
用样本稀释液将待检血清样本按1∶100稀释,混匀。阴性、阳性对照品不用稀释,直接加样。
1.2.3 加样反应
每次试验设阴性对照2孔、阳性及空白对照各1孔(分别加入阴性对照、阳性对照及样本稀释液100μL)。样本检测孔每孔加已稀释血清样本100μL。于37℃避光反应30分钟后,甩去孔内液体,每孔注满工作洗涤液洗涤3次,每次均需停留1分钟后再甩净,拍干。
1.2.4 加酶反应
除空白对照孔外,每孔加酶结合物1滴。37℃避光反应30分钟后,甩去孔内液体,如上洗涤,拍干。
1.2.5 显色反应
加底物液和显色剂各1滴,混匀,37℃避光显色10分钟。加终止液1滴,终止反应并用酶标仪判读结果。
1.3 结果判定
阴性对照呈无色或浅黄色,阳性对照呈明显黄色,表示试验有效。
以空白对照调零,用酶标仪于450n m处读取吸光度(A值)。待检孔A值大于阴性对照A值平均值的2.1倍者,判为阳性。如阴性对照A值的平均值低于0.08时,按0.08计算。
2 调查结果
调查结果详见表1。
3 讨论
本调查通过酶联免疫吸附试验(ELISA),对采自江苏省淮安市淮安区15个乡镇的规模猪场和散养户的900份猪血清进行衣原体的抗体检测。结果表明,被检样品猪衣原体抗体阳性率平均为5.44%,各规模猪场之间的抗体阳性率有一定差异,最高为13.33%,个别猪场未检出阳性猪。散养户多数是阴性,散养户的平均阳性率低于规模场。
本次调查结果比郎利敏等对河南省各地和山西、安徽等省检出的54.1%[2]、曹兴萍等对楚雄检出的10.71%[3]、毕峻龙等对云南部分地区检出的18.5%[4]、王江辉等对河南部分地区检出的25.5%[5]都低,表明江苏省淮安区猪衣原体的感染率较低。
此次调查结果,散养户猪衣原体的阳性率普遍比规模场低。因此,该病在淮安区的防控重点应放在规模场上。提倡自繁自养,如果必须引进外来猪只,应严格把好检疫关,谨防带进病原,污染猪场。对于散养户阳性率低于规模场是否具备普遍性规律,仍需进一步验证。
表1 江苏省淮安市淮安区猪衣原体病的血清学调查结果
病猪和隐性感染的带菌猪是本病的主要传染源。猪群一旦感染本病,清除十分困难,且康复猪群可长期带菌,因此发现可疑病猪应及时检疫,果断淘汰阳性猪。此外,衣原体野毒在易感猪群中不断自然传代,其毒力可能会逐渐增强,在一定条件下可导致疫病暴发。所以要做好预防工作,防止衣原体持续潜伏性的感染。每年可对种公猪及母猪用衣原体灭活疫苗进行免疫接种,同时做好免疫监测工作,掌握疫苗免疫效果,及时采取相应措施,使猪群处于良好的免疫状态。
衣原体病是人畜共患的自然疫源性传染病,人接触衣原体可经呼吸道等途径感染,严重者也可引起死亡[1]。目前在猪的繁殖障碍性疾病中,衣原体感染普遍未引起重视,仅对猪伪狂犬病、细小病毒病、猪繁殖与呼吸障碍综合征、猪瘟和圆环病毒感染等猪病比较重视,对猪衣原体病的检疫和防控重视不够,以致部分地区衣原体病阳性率普遍较高。因此,加强猪衣原体病的防控工作,对搞好兽医公共卫生具有重要意义。
[1]蔡宝祥.家畜传染病学.北京:中国农业出版社,2001:136-139.
[2]郎利敏,王克领,熊华东,等.猪衣原体感染情况调查及防制对策.养猪,2005(3):33.
[3]曹兴萍,张以芳.云南省楚雄州猪衣原体病血清学调查.中国畜牧兽医,2007,34(10):110-111.
[4]毕峻龙,杨斌,高利波等.云南省部分地区猪衣原体感染的血清学调查.动物医学进展,2011,32(3):134-136.
[5]王江辉,陈陆,任向阳,等.河南部分地区猪衣原体感染的血清学调查研究.动物医学进展,2006,27(3):88-89.