慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群变化临床研究

江浪进，陈 欣

（解放军202医院 检验科，辽宁 沈阳110003）

外周血T淋巴细胞亚群是细胞免疫中重要的细胞群，反应机体细胞免疫状态的较好指标［1］，谷氨酸氨基转移酶是肝脏损伤后释放到血清中的一种重要蛋白，直接肝细胞损伤程度。乙型肝炎是一种免疫相关疾病，机体感染乙型肝炎病毒（HBV）后并不直接对肝细胞造成损伤，而是通过诱发机体的免疫反应间接损伤肝细胞［2，3］。细胞免疫的异常在乙型肝炎慢性化发病机制中发挥着重大的作用，T淋巴细胞对清除细胞内HBV起主导作用［4］。近年研究表明细胞免疫与慢性乙型肝炎的关系。本实验通过监测外周血T淋巴细胞亚群中CD3＋、CD4＋及CD8＋细胞在慢性乙型肝炎患者和健康人群间的变化，进一步了解慢性乙型肝炎患者在细胞免疫方面的动态。

1 材料与方法

1．1 研究对象 试验组：解放军202医院传染科门诊及住院患者，慢性乙型肝炎患者280例，诊断符合2010年《慢性乙型肝炎防治指南》慢性乙型肝炎诊断标准。其中男性130例，女性150例，年龄介于26－52岁。对照组：解放军202医院体检健康者235例，其中男性124例，女性111例，均无肝脏疾病，肝脏功能检查均正常。

1．2 方法 试验组及对照组测定T淋巴细胞亚群均使用抗凝管抽取清晨空腹静脉血5ml送检。采血后均在2小时内进行测定。使用仪器为美国BD公司生产的FACS Calibur流式细胞仪，所用检测试剂均为原装配套试剂，严格按照仪器操作。ALT检测均使用带分离胶的真空采血管抽取清晨空腹静脉血3ml。ALT检测使用的是瑞士罗氏公司生产的Modular D2700全自动生化分析仪，所用检测试剂均为原装配套试剂，严格按照仪器操作。

1．3 统计学分析 所有数据使用SPSS11．5统计软件分析，T淋巴细胞亚群的百分率用¯x±s，组间均数比较用t检验。

2 结果

2．1 试验组的CD3＋、CD4＋百分率及CD4＋／CD8＋百分率比值明显低于对照组，差异具有统计学意义（P＜0．01）；试验组CD8＋百分率较对照组升高，差异也具有统计学意义（P＜0．01），具体数值见表1。

表1 试验组和对照组CD3＋、CD4＋、CD8＋百分率及CD4＋／CD8＋比值结果

2．2 慢性乙型肝炎患者ALT统计 ALT异常组外周血CD3＋、CD8＋细胞数百分率明显高于慢性乙型肝炎患者中ALT正常组，差异具有统计学意义（P＜0．01），异常组和正常组CD4＋百分率差异无统计学意义，异常组CD4＋／CD8＋比值低于正常组，差异具有统计学意义（P＜0．05），具体数值见表2。

表2 ALT正常组与异常组CD3＋、CD4＋、CD8＋百分率及CD4＋／CD8＋比值结果

3 讨论

慢性乙型肝炎是一种常见的传染病，当机体感染HBV后并不是直接损伤肝细胞，而是诱发机体的免疫应答间接的损伤肝细胞。慢性乙型肝炎患者病情反复发作一方面与病毒损害程度有关，另一方面与机体免疫功能紊乱有关。外周血T淋巴细胞亚群是公认的反应机体细胞免疫状态的较好指标。

HBV感染时对病毒抗原的免疫作用与病毒清除和乙型肝炎发病机制相关，其中包括特异性的CD8＋细胞、毒性T细胞（CTL细胞）和CD4＋辅助性T细胞（Th细胞）、非特异性的单核巨噬细胞还有自然杀伤细胞，他们可直接损伤肝细胞或由其分泌细胞因子发挥抗病毒作用。乙型肝炎的免疫病理机制主要由T细胞的免疫应答所决定。CD4＋细胞在不同细胞因子作用下分化为Th1和Th2两种［6］。对病毒的清除起重大作用的CD8＋细胞的抑制和激活依赖CD4＋细胞。如果Th1细胞比例占优势，可提高CD8＋细胞的活性，进而清除病毒并使得肝细胞损伤加重；如果Th2细胞比例占优势，CD8＋细胞的活性降低，肝细胞损伤减轻。因此Th1／Th2比值是反应机体免疫状态的非常重要指标。

国内有实验报道［5－6］，慢性肝炎患者总体上表现为CD4＋T细胞计数明显低于健康人，CD8＋T细胞计数则较健康人高，CD4＋／CD8＋比值下降，与本实验结果一致。段国荣等［7］报道，慢性乙型肝炎患者外周血 CD3＋、CD4＋百分率、CD4＋／CD8＋比值下降。李梦东等［8，9］报告：CD3＋、CD4＋百分率在各型肝炎患者中均有下降，CD3＋、CD8＋细胞数均明显高于正常对照组，在慢性乙型肝炎患者中，肝功能损害越重，其变化程度越明显，而随着病情缓解，这种变化接近正常，其中CD3＋、CD4＋百分率下降，与本实验结果不一致。

本实验表明，由于T细胞亚群间的不平衡，导致免疫功能紊乱，病毒清除障碍。本研究病例数不多，仍需扩大样本进一步观察对比，比如T细胞分化和成熟以及细胞间信号转导方面是否障碍，希望能对慢性乙型肝炎的免疫应答和免疫治疗提供一些参考和启发。

［1］Mizukoshi E，Sideny J，Livingston B，et al．Cellularsponses immune response to the hepatitis B virus polymerase Immunol，2004，173（9）：5863－5871．

［2］金 萍，杨明荣，孙 琦，等．慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞Fas抗原及T淋巴细胞亚群检测的意义．大连医科大学学报，2003（3）

［3］段国荣，周永兴，聂青和，等．慢性乙型肝炎、慢性丙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群及其细胞膜IFN－r，IL－6表达的变化．第四军医大学报，2003（15）．

［4］邬祥惠．慢性肝炎的发病机理和治疗．现代实用医学，2001，13（1）：5．

［5］马存根，刘淑璋，王力生，等．乙肝患者T淋巴细胞亚群变化与血清HBV DNA关系的观察．中华微生物学和免疫学杂志，1992，12（5）：301．

［6］刘丽霞，张 铮，苏先狮，等．慢性活动乙型肝炎患者免疫功能检测及其临床意义．中华免疫学杂志，1995，11（3）：176．

［7］段国荣，周永兴，聂青和，等．慢性乙型肝炎、慢性丙型肝炎患者外周血T细胞亚群及其细胞膜IFN－r、IL－6表达的变化．第四军医大学学报，2003，24（15）．

［8］李梦东 ．实用传染病学第2版 ．北京：人民卫生出版社1998，104－111．

［9］李 鸣，林 蔚．慢性乙型肝炎患者外周血T淋巴细胞亚群变化．Journal of morden Clinical Medcial Bioengineering，2002 1（8）36－37．