维他昔布咀嚼片体外溶出度的测定

宋 颂，华 洁，周福军，吕鹏月，孙燕锦，侯文彬

(1．天津中医药大学，天津 300193;2．天津药物研究院，天津 300193;3．北京欧博方医药科技有限公司，北京 100085)

环氧合酶－2(COX－2)抑制剂成为一类新的非甾体类抗炎药，可迅速的缓解骨关节炎，风湿性关节炎引起的疼痛［1］。维他昔布为新型的COX－2抑制剂，可特异性地抑制COX－2，阻止炎性前列腺素类物质的产生，起到抗炎、镇痛及退热作用，适用于缓解犬骨关节炎引起的疼痛和炎症，用于骨或软组织围手术期治疗管理。对于因为骨关节炎造成慢性疼痛的犬类的治疗，目前所使用的方法包括:抗发炎和止痛药物、舒缓疾病的骨性关节炎药物等。该药用于治疗犬类骨关节炎所引起的痛疼和炎症具有口服后快速吸收，广泛分布，生物利用度高的优点。

目前，在我国维他昔布咀嚼片(Vitacoxib chewable tablets)尚未上市，维他昔布咀嚼片的体外溶出度研究国内外均未见文献报道，而溶出度是评价药物制剂质量的重要依据［2］。为此，对其进行了相关研究，建立了该片剂的体外溶出度测定方法。

1 仪器与试剂

1．1 仪器 UV－1601型紫外分光光度仪(日本岛津)、ZRS－8G智能溶出试验仪(天津大学无线电厂)、BP211D－电子天平(Sartorius公司)

1．2 药品与试剂 维他昔布对照品为北京欧博方医药科技有限公司提供(批号:30080－098A1);维他昔布咀嚼片(天津药物研究院自制，批号20120105，20120106，20120107);十二烷基硫酸钠为化学纯，盐酸、磷酸二氢钾、氢氧化钠均为分析纯，蒸馏水。

2 方法与结果

2．1 对照品溶液和供试品溶液的制备

2．1．1 对照品溶液的制备 精密称取维他昔布对照品适量，用甲醇溶解制成每1 mL含维他昔布0．25 mg的对照品储备液，精密吸取对照品储备液适量，用0．8%十二烷基硫酸钠溶液稀释制成每1 mL含维他昔布0．01 mg的溶液，即得。

2．1．2 供试品溶液的制备 精密称取本品约30 mg，置于50 mL量瓶中，加0．8%十二烷基硫酸钠溶液适量，超声处理30 min，用0．8%十二烷基硫酸钠溶液稀释至刻度，摇匀，精密吸取2 mL置10 mL量瓶，加0．8%十二烷基硫酸钠溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2．2 溶出方法 按照《兽用化学药物质量标准建立的规范化过程技术指导原则》与《中国兽药典2010年版》一部［3］中溶出度的有关内容，维他昔布咀嚼片为片剂，选择桨法，转速为50 r/min。

2．3 溶出介质的选择

2．3．1 维他昔布为难溶性药物 因此选择了多种溶出介质进行研究。

方法:桨法，温度37℃，转速:50 r/min，溶出介质体积为 900 mL。介质:水、0．1 mol/L HCl、磷酸盐缓冲液(pH6．8)、0．5%十二烷基硫酸钠溶液。

以45 min为取样时间，取样后在244 nm的波长处测定吸光度，结果见表1。

表1 维他昔布咀嚼片在不同介质中的溶出度结果表

结果表明，维他昔布咀嚼片在水、0．1 mol/L HCl和磷酸盐缓冲液(pH6．8)中，均不能完全溶出，必须加入适量的十二烷基硫酸钠来增加药物的溶解。

2．3．2对十二烷基硫酸钠的加入量进行进一步的研究，结果见表2。

表2 维他昔布咀嚼片在不同浓度的十二烷基硫酸钠溶液中的溶出度结果表

结果表明，维他昔布咀嚼片在0．8%十二烷基硫酸钠溶液中，在45 min时，溶出度已达到80%以上，符合要求，因此确定维他昔布咀嚼片的溶出介质为0．8%十二烷基硫酸钠溶液。

2．4 取样时间的确定 取维他昔布咀嚼片(20120105批)6片，采用桨法，温度37℃，转速:50 r/min，以0．8%十二烷基硫酸钠溶液为溶出介质，介质体积为 900 mL，分别在 5、10、20、30、45、60 min取样，在247 nm的波长处测定吸光度，考察其溶出曲线。结果见表3。

表3 维他昔布咀嚼片溶出度曲线结果表

结果表明，在30 min时，溶出度已达到80%以上，符合要求，因此确定维他昔布咀嚼片溶出取样时间为30 min。

2．5 专属性 取维他昔布咀嚼片与空白辅料分别研成粉末，取适量用0．8%十二烷基硫酸钠溶液溶解，滤过，取续滤液制成供试品溶液。照紫外－可见分光光度法［3］在200～400 nm之间进行全波长扫描，结果显示，维他昔布咀嚼片在247 nm的波长处有最大吸收，辅料于247 nm处无吸收，不影响测定。因此确定维他昔布咀嚼片溶出度的检测波长为247 nm。

2．6 线性范围 精密称取维他昔布对照品适量，用甲醇溶解制成每1 mL含维他昔布0．25 mg的对照品溶液，精密吸取对照品溶液适量，加0．8%十二烷基硫酸钠溶液稀释制成每1 mL含维他昔布0．05 mg的溶液，作为对照品储备液。精密吸取对照品贮备液0．5、1．0、1．5、2．0、2．5、3．0、3．5 mL 移入 10 mL量瓶中，加0．8%十二烷基硫酸钠溶液稀释至刻度，摇匀，即得浓度为 0．002496、0．004992、0．007488、0．009984、0．01248、0．014976、0．017472 mg/mL 的一系列溶液。在247 nm的波长处测定吸光度，将吸光度(Y)对浓度(X)结果进行回归分析，得线性方程为 Y=50．78X+0．002(r=0．9995)，即维他昔布浓度在0．002496～0．017472 mg/mL范围内，与吸收度呈良好的线性关系。

2．7 回收率试验 取维他昔布咀嚼片(20120105批)，研细，分别称取9份，每份约15 mg(半量)，置50 mL量瓶中，每3份分别精密加入相当于半量浓度的80%，100%和120%的维他昔布对照品溶液，按2．1．2项下的方法，制成样品溶液，在247 nm的波长处测定吸光度，结果见表4。

表4 维他昔布咀嚼片含量测定加样回收率试验结果表

结果测得，维他昔布咀嚼片加样回收率的平均值为102．9%，RSD 为1．36%。

2．8 重复性 取维他昔布咀嚼片(20120105批)，研细，分别称取6份，按2．1．2项下的方法，制成样品溶液，在247 nm的波长处测定吸光度，含量分别为 0．0554、0．0553、0．0553 、0．0565、0．0558、0．0547、0．0555 mg/mg，重复性试验的 RSD 为1．09%，本方法重复性良好。

2．9 溶液的稳定性 取重复性项下的样品，分别于 0、1、2、4、8 h，在 247 nm 的波长处测定吸光度，0、1、2、4、8 h 的吸光度分别为 0．347、0．346、0．345、0．347、0．347，稳定性试验的 RSD 为 0．26%，表明供试品溶液在8 h内稳定。

2．10 重现性试验 取本品三批(20120105、20120106、20120107)各6片，照《中国兽药典2010年版》一部溶出度测定法第二法桨法，0．8%十二烷基硫酸钠溶液为溶出介质，体积为900 mL，温度37℃，以50 r/min钟的转速，依法分别操作，经5、10、20、30、45、60 min 后，取溶液 5 mL，及时补充相同体积的溶出介质，滤过，弃去初滤液，取续滤液，即得。在247 nm的波长处测定吸光度，结果见图1，重现性良好，质量稳定。

图1 三批维他昔布咀嚼片的溶出度重现性结果图

2．11 均一性试验 取本品(20120105批)6片，同“2．7”项下操作，测定其溶出度。结果见图2，溶出均一性好，质量稳定。

图2 维他昔布咀嚼片溶出均一性试验结果表

2．12 三批样品溶出度的测定 取本品三批(20120105、20120106、20120107)各 6 片，照《中国兽药典2010年版》一部溶出度测定法第二法桨法，0．8%十二烷基硫酸钠溶液为溶出介质，体积为900 mL，温度37℃，以50 r/min的转速，依法分别操作，30 min取样，在247 nm的波长处测定吸光度，维他昔布咀嚼片三批样品的平均溶出度84．87%、85．14%、86．15%，三批样品30 min时溶出度均达到80%以上，符合《中国兽药典2010年版》一部要求。

3 讨论与结论

3．1 溶出度系指药物从片剂或胶囊剂等固体制剂在规定条件下溶出的速度和程度［2］。是一种模拟内服固体制剂在胃肠道中的崩解和溶出的体外实验方法。维他昔布为难溶性药物，一般认为，难溶性药物、因制剂处方与生产工艺造成临床疗效不稳定的药物以及治疗量与中毒量相接近的药物，其口服制剂质量标准中必须设定溶出度检查项。药物进入体内，需经过崩解、溶出才能被机体吸收而发挥药效，因此，溶出速度的快慢会对药效产生影响，它是评价药物制剂质量的重要依据。

3．2 在溶出介质的选择试验中，选择244nm作为紫外检测波长测定吸光度是由于在预实验中溶出介质尚未确定，因而参考了原料药的最大吸收波长244nm。在专属性研究中，测定了维他昔布咀嚼片在选定的溶出介质中的最大吸收波长为247nm，因此在之后的研究中采用247nm作为溶出度试验的紫外检测波长。

3．3 在选择溶出介质的研究中，先进行了预实验，测定了维他昔布在各种介质中的平衡溶解度，筛选出四种介质后，进行了溶出度考察和筛选，最后确定为0．8%十二烷基硫酸钠溶液。

3．4 谢沐风的研究中［4］建议采用900mL作为溶出介质体积，由于900mL与人体消化道内的体液总体积较为接近，增加其体内外的相关性。另外，维他昔布咀嚼片规格为30mg，根据平衡溶解度的预实验，900mL也可以满足漏槽条件。所以试验中介质体积确定为900mL。

本法通过对维他昔布咀嚼片溶出度线性关系、回收率、重复性和溶液稳定性的方法学的验证，确认本方法准确，可用于维他昔布咀嚼片的体外溶出度测定。

［1］ Brooks，PM，DayRO．Cox － 2Inhibitors［J］．MedicalJournalof Australia，2000，177(8):433 －436．

［2］ 尹烨华，梁文涛，余永鹏，等．恩诺沙星微囊体外溶出度的研究［J］．中国兽药杂志，2011，2:20 －22．

［3］ 中国兽药典委员会．中国兽药典2010年版一部［S］．附录26－27．

［4］ 谢沐风．科学、客观地制订溶出度试验质量标准［C］．药品技术审评论坛，2012，1(35):23．