不同厂家生产的替硝唑薄膜衣片实时溶出度结果分析

徐轶飞，苗爱东，李晓翠

替硝唑片临床主要用于治疗厌氧菌所致的口腔、呼吸道、妇科、外科感染［1］。《中国药典》2010 年版对替硝唑薄膜衣片采用30 min测定溶出度，规定溶出量应不得少于80%。光纤药物溶出度仪可实现连续自动化检测和分析，与现有的溶出度测定仪相比，不需取样，不需过滤，实现了原位实时溶出检测，可反映药片的真实溶出过程［2］。为探索光纤药物溶出度测定仪对替硝唑薄膜衣片溶出度检查方法的可行性，笔者尝试了通过改变测定的光程和波长，对3个厂家生产的6批次替硝唑薄膜衣片进行溶出度的研究，现报告如下。

1 仪器与试剂

光纤药物溶出度实时测定仪(FODT)-601(上海富科思分析仪器有限责任公司);UV-2450紫外可见分光光度计(日本岛津制作所);METTLER TOLEDO AG 285电子天平(d=0．01 mg，上海梅特勒－托利多仪器有限公司);替硝唑对照品(中国药品生物制品检定所，批号:100336-200703，纯度99.9%);替硝唑片(薄膜衣片，规格均为0．5 g/片，A 厂，A1、2 批号:110901、111201;B 厂，B1、2、3 批号:1108120、1101129、1111140;C 厂，批 号:111002);盐酸(分析纯)。

2 方法与结果

2.1 对照品溶液的制备 取替硝唑对照品适量，精确称取0．25 g，置于250 ml量瓶中，加盐酸溶液(9→1000)溶解并稀释至刻度，浓度为1000 μg/ml，作为对照品储备液。分别精密量取替硝唑对照品储备液8、24、32、40、50、60 ml置 100 ml量瓶中，加盐酸溶液(9→1000)稀释至刻度，得 80、240、320、400、500、600 μg/ml的替硝唑对照品系列溶液，分别相当于 14.4%、43.2%、57.6%、71.9%、89.9%、107.9%的药物溶出率。

2.2 检测波长的确定 在UV-2450紫外可见分光光度计上扫描测定上述对照品溶液的紫外吸收光谱，发现替硝唑的高浓度溶液在最大吸收波长278 nm处有裂峰现象，且其吸光度值超过3.0。用FODT-601在线扫描测定各浓度溶液(0.5 mm探头)的紫外吸收光谱，替硝唑溶液的最大吸收波长为278 nm，吸光度值超过1.2(图1);比较替硝唑水溶液和盐酸溶液(9→1000)的紫外吸收光谱，发现替硝唑在盐酸溶液(9→1000)中的吸收峰位存在蓝移现象，由水(甲醇)中的最大吸收波长317 nm变为278 nm。通过比较选择不同的测定光程和测定波长，依照替硝唑薄膜衣片溶出相当于标示量的100%的浓度(约为560 μg/ml)时的吸光度值在0.5左右的原则［3］，最终确定光程为1 mm、检测波长为314nm、参比波长为550 nm的分析测试条件。

2.3 工作曲线 选择0．5 mm的探头，将其分别放入“2．1”项下的替硝唑对照品系列溶液中，在检测波长为314 nm时，替硝唑对照品溶液在80～600 μg/ml浓度范围内的吸光度值与浓度间的线性关系良好，回归方程Y=bX－a，Y:溶出百分率，X:吸光度值，见表1。

2.4 精密度(RSD) 称取500 μg/ml的替硝唑对照品溶液，分别考察日内和日间RSD，计算所得日内和日间RSD值分别为0．4%和1．2%，表明RSD良好。

图1 FODT-601光纤药物溶出度实时测定仪扫描替硝唑溶液的紫外吸收光谱

表1 6个通道的线性方程及相关系数

2.5 回收率试验 取10片替硝唑薄膜衣片(B2批号:1101129，含量为标示量的95．3%)，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于替硝唑28 mg)，置于100 ml量瓶，共6份，分别加入浓度为1 mg/ml替硝唑对照品溶液28 ml，以盐酸溶液(9→1000)溶解并定容至刻度，按“2．3”项下方法测定。计算回收率为 99．8%，RSD 值为 1．0%(n=6)。

2.6 溶出度测定 打开FODT实时监测系统，选择0．5 mm 的探头，采用转篮法［3］，以盐酸溶液(9→1000)900 ml为溶出介质，转速为100 r/min，设定温度37℃，检测波长为314 nm，参比波长为550 nm，采样间隔60 s，实时记录替硝唑薄膜衣片的溶出情况。同时按《中国药典》2010年版(二部)［3］规定方法——紫外可见分光光度法测定3个厂家6批次替硝唑薄膜衣片的溶出度。应用奇思高智统计软件进行t检验，两种方法所测结果差异无统计学意义(P ＞0.05)，见表2。

表2 两种方法测定3个厂家6批次替硝唑薄膜衣片溶出度结果比较(±s)

表2 两种方法测定3个厂家6批次替硝唑薄膜衣片溶出度结果比较(±s)

注:A1、2:A 厂，批号:110901、111201;B1、2、3:B 厂，批号:1108120、1101129、1111140;C:C 厂，批号:111002

A1 A2 B1 B2 B3 C光纤药物溶出度实时测定 101．05 ±1．47 99．02 ±2．01 97．03 ±5．11 96．85 ±1．方法49 96．35 ±0．94 97．88 ±1．01紫外可见分光光度法 99．77 ±1．64 97．83 ±1．39 96．05 ±3．96 95．52 ±1．36 95．06 ±1．19 97．43 ±1．01 t 1．430 1．184 1．389 1．294 2．072 0．768 P 0．183 0．264 0．223 0．252 0．065 0．460

实时监测了3个厂家6批次替硝唑薄膜衣片的溶出过程，结果见图2。虽然各批次替硝唑薄膜衣片的溶出度检查结果均符合《中国药典》2010年版(二部)的规定，但各厂家替硝唑薄膜衣片的溶出曲线还是存在一定差异:A、C厂各片间的溶出曲线一致性好，片间差异小;而B厂各片间的溶出曲线存在明显差异。结果提示A、C厂生产的替硝唑薄膜衣片的质量均一性较好，而B厂生产的替硝唑薄膜衣片的质量均一性较差。

图2 3个厂家6批次替硝唑薄膜衣片实时溶出曲线

3 讨论

《中国药典》2010年版(二部)替硝唑薄膜衣片质量标准下溶出度检查项规定为转篮法，定时取样后经稀释再测定，对照品法计算其溶出度［3］，操作环节较多，易带来较大的误差，无法反映片剂溶出过程。FODT集溶出度试验与分析检测于一体，通过光导纤维将光源信号直接导入溶出杯中，根据药物的光谱特性选择合适的探头，药物溶出过程浓度的变化引起光信号的改变，通过数字模型消除背景干扰，经软件系统编译后实现对药物溶出度过程原位和实时测定，可获得药物溶出度的过程溶出曲线［4］。本研究通过调整探头间距离选择合适的光纤探头(即改变光程)，结合改变替硝唑的测定波长(314 nm)实现了对替硝唑薄膜衣片溶出过程的原位、实时监测，与中国药典2010年版(二部)该制剂规定的方法比较，两种方法的检查结果差异无统计学意义。

通过对3个厂家生产的6批次替硝唑薄膜衣片的溶出曲线进行考察，虽然所有产品溶出度均符合《中国药典》2010年版(二部)的标准规定［3］，但其溶出过程却有所不同。由于各生产厂家使用的替硝唑原料药来源不同，且生产过程所使用的辅料、配方和工艺等因素的差异，可能影响药品的内在质量［5］。现行标准由于只检查规定时间点的溶出度值，无法监测片剂溶出过程中的差异;而FODT实时监测系统则可通过直接绘制药物溶出曲线实现药物溶出过程监测和溶出结果的直接判定，大大提高了分析工作效率，对于药物制剂工艺研究、药品质量控制及生物利用度研究方面也具有十分重要的指导意义。

［1］ 陈新谦，金有豫，汤光．新编药物学［M］．16版．北京:人民卫生出版社，2007:111．

［2］ 金丽，古卓良，周国华，等．光纤药物溶出度实时测定仪在线监测阿昔洛韦片的溶出度［J］．中南药学，2012，10(4):274-276．

［3］ 国家药典委员会．中华人民共和国药典:二部［K］．北京:中国医药科技出版社，2010．

［4］ 李新霞，陈坚．光纤药物溶出度过程分析仪的应用［J］．中国医药工业杂志，2011，24(1):70-72．

［5］ 张晓丹，武海萍，周国华，等．利用六通道光纤传感系统实时监测格列齐特片Ⅱ的体外溶出度［J］．解放军药学学报，2008，24(6):544-546．