酸枣仁配方颗粒的质量控制研究

徐振球，陈哲妮

(佛山市食品药品检验所，广东 佛山 528000)

酸枣仁配方颗粒的质量控制研究

徐振球，陈哲妮*

(佛山市食品药品检验所，广东 佛山 528000)

目的：对酸枣仁配方颗粒进行薄层色谱鉴别及HPLC含量测定研究，以客观评价酸枣仁配方颗粒的质量。方法：薄层色谱鉴别以酸枣仁对照药材和酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B混合对照品为对照，以水饱和的正丁醇为展开剂，喷以1%香草醛硫酸溶液，立即检视；含量测定采用Ultimate XB-C18色谱柱(200 mm×4.6 mm，5 μm)，流动相为乙腈-水(梯度洗脱)，流速：1.0 mL·min-1,蒸发光散射检测器检测。结果：酸枣仁配方颗粒在对照药材和对照品相同位置上显相同颜色的荧光斑点；含量测定样品中酸枣仁皂苷A峰分离度良好。结论：首次建立了酸枣仁配方颗粒中酸枣仁的薄层色谱鉴别方法，并进行了酸枣仁皂苷A的含量测定，提供了控制酸枣仁配方颗粒质量的科学依据。

酸枣仁配方颗粒；酸枣仁皂苷A；酸枣仁皂苷B；薄层色谱；HPLC

酸枣仁为鼠李科植物酸枣ZiziphusjujubaMill.var.spinosa(Bunge)Hu ex H.F.Chou的干燥成熟种子[1-3]。原植物生于向阳或干燥山坡、山谷、丘陵等地，分布于辽宁、内蒙古、河北、河南、山东、山西、陕西、甘肃、安徽、江苏[3]。又名山枣，刺酸枣[2]。化学成分含三萜皂苷、黄酮、脂肪油[3-4]以及有机酸、糖分、蛋白质、生物碱[5]等。酸枣仁具有养心补肾，宁心安神，敛汗，生津的功能[1，3-4]。酸枣仁配方颗粒是用符合炮制规范的酸枣仁中药饮片作为原料，经现代制药技术提取、浓缩、分离、干燥、制粒、包装精制而成的纯中药产品系列。其有效成分、性味、归经、主治、功效与传统酸枣仁中药饮片一致，保持了酸枣仁中药饮片的主要特征，既能保证中医传统的君、臣、佐、使和辨证施治、灵活加减的特点，又免去了病人传统煎煮的麻烦，同时还可灵活地单味颗粒冲服。酸枣仁皂苷A、B是《中国药典》2010年版中所规定的酸枣仁中的专属活性成分，而且皂苷A是酸枣仁中起主要作用的功能性成分[1]。有鉴于此，作者对酸枣仁配方颗粒所含酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B进行了薄层色谱鉴别，并对酸枣仁皂苷A进行了HPLC含量测定研究，以期为酸枣仁配方颗粒的采购、生产、临床应用提供客观和科学的质量控制依据。

1 仪器与材料

1.1 仪器

METTLER TOLEDO AB265-S电子天平(瑞士)；KQ-250B超声波清洗器(昆山)；Agilent 1100高效液相色谱仪，蒸发光检测器。

1.2 材料

酸枣仁对照药材、酸枣仁皂苷A对照品(批号：110734-200509)、酸枣仁皂苷B对照品(批号：110814-200505)，均购自中国食品药品检定研究院；酸枣仁配方颗粒(三九医药股份有限公司，批号：1006181S，1006241S，1006281S，每袋装0.9 g；相当于饮片10 g)。乙腈为色谱纯，水为超纯水，其余试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2.1 薄层色谱鉴别[1]

取酸枣仁配方颗粒粉末1袋，加甲醇30 mL，超声处理20 min，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解，作为供试品溶液。另取酸枣仁对照药材1 g，同法制成对照药材溶液，再取酸枣仁皂苷A对照品、酸枣仁皂苷B对照品，加甲醇制成每1 mL各含1 mg的混合溶液，作为对照品溶液。上述3种溶液各5 μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以水饱和的正丁醇为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1%香草醛硫酸溶液，立即检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。见图1。

1.供试品(1006181S) 2.供试品(1006241S) 3.供试品(1006281S) 4.酸枣仁对照药材 5.酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B混合对照品图1 酸枣仁配方颗粒薄层鉴别色谱图

2.2 含量测定[1]

2.2.1 色谱条件与系统适应性 色谱柱：Ultimate XB-C18(200 mm×4.6 mm，5 μm)，流动相：以乙腈为流动相A，以水为流动相B，按表1规定梯度洗脱，柱温：30 ℃，蒸发光散射检测器检测。理论板数按酸枣仁皂苷A峰计算应不低于2 000。对照品与样品色谱图见图2。

表1 梯度洗脱规定

A. 酸枣仁皂苷A对照品 B. 酸枣仁配方颗粒(批号：1006241S)图2 酸枣仁配方颗粒HPLC图

2.2.2 对照品溶液的制备 取酸枣仁皂苷A对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1 mL含0.1 mg的溶液，即得。

2.2.3 供试品溶液的制备 取酸枣仁配方颗粒，研细，取约0.45 g，精密称定，至锥形瓶中，加入70%乙醇20 mL，加热回流2 h，滤过，药渣用70%乙醇5 mL洗涤，合并洗液与滤液，回收溶剂至干，残渣加甲醇溶解，转移至5 mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀滤过，取续滤液，即得。

2.2.4 稳定性试验 精密吸取同一供试品溶液，分别在制备后的0,2,4,6,8,24 h，注入高效液相色谱仪，测定各时间点酸枣仁皂苷A的峰面积，计算6个时间点的RSD=2.9%，结果表明酸枣仁皂苷A在上述色谱条件及溶液中稳定性良好。

2.2.5 重复性试验 取同一供试品，研细，精密称取6份，按拟定含量测定方法测定供试品中酸枣仁皂苷A的含量，计算6份样品的RSD=2.8%，表明本方法重复性良好。

2.2.6 准确度试验 取同一已知含量的供试品(批号：1006241S，含酸枣仁皂苷A 0.964 mg·g-1)，精密称取6份(每份约0.45 g)，各加入酸枣仁皂苷A对照品溶液(0.010 78g→50 mL)2 mL，水浴挥干溶剂，按拟定含量测定方法，测定供试品中酸枣仁皂苷A的含量，计算6份的平均回收率为96.11%，RSD=2.3%。表明该方法准确度良好。

2.2.7 样品含量测定 取3批酸枣仁配方颗粒(批号：1006181S，1006241S，1006281S)，照2.2.3项下制备供试品溶液，分别吸取对照品和供试品溶液各10 μL，注入液相色谱仪，测定含量，结果酸枣仁皂苷A的含量分别为1.074，0.868，0.742 mg/袋。

3 讨论

薄层色谱鉴别中，供试品与酸枣仁对照药材和酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B混合对照品色谱可见相同的两个明显蓝绿色斑点，因此，采用酸枣仁作为对照药材及酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B作为对照品可体现酸枣仁配方颗粒有效成分的特征。

酸枣仁皂苷A是酸枣仁配方颗粒的主要有效成分，含量较高(大于0.7 mg/袋)。实验建立了酸枣仁配方颗粒中酸枣仁皂苷A含量的HPLC测定方法，结果表明该方法检测灵敏度高、操作简便、结果准确，因此选择其作为酸枣仁配方颗粒的质量控制方法较为合适。

[1] 国家药典委员会.中国药典[S].一部.北京：中国医药科技出版社，2010：343-344.

[2] 苗明三，李振国.现代实用中药质量控制技术[M].北京：人民卫生出版社，2000：1075-1080.

[3] 国家药典委员会,中国医学科学院药用植物研究所.中华人民共和国药典中药材及原植物彩色图鉴[M].下册.北京：人民卫生出版社，2010：1144-1145.

[4] 江苏新医学院.中药大辞典[M].上海：上海科学技术出版社，1977：2534-2536.

[5] 尹升镇，金河奎，金宝渊.酸枣仁生物碱的研究[J].中国中药杂志，1997,22(5)：296.

QualityControlofSuanzaorenFormulaParticles

XU Zheng-qiu,CHENG Zhe-ni*

(FoshanInstituteForFoodandDrugControl,Foshan528000,China)

Objective： To evaluate quality of Suanzaoren formula particles by TLC and HPLC analysis.Methods： TLC identify with controlled suanzaoren herbs and jujuboside A,jujuboside B were mixed as the control reference substances,water saturated n-butanol as the agent,view thin layer plate immediately after spraying with 1% vanillin sulfuric acid solution. The content was measured by HPLC with Ultimate XB-C18column (200 mm×4.6 mm,5 μm),mobile phase： acetonitrile - water (gradient elution),flow rate： 1.0 mL·min-1,evaporative light scattering detector detection.Results： Suanzaoren formula particles showed the same color fluorescent spots in the same position of the reference herbs and substances. Peak separation of jujuboside A determination is good.Conclusion： This stuffy established TLC identification method for Semen ziziphi spinosae from Suanzaoren formula particles for the first time,supplied quantitative determination method for Jujuboside A,and provided a scientific basis for the quality control of Suanzaoren formula particles.

Suanzaoren formula particles； Jujuboside A； Jujuboside B；TLC； HPLC

2013-01-09)

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陈哲妮，E-mail：hetherine@21cn.com